Bcl-2、P53聯合P57、Ki-67表達在葡萄胎中的意義

劉景城

（福建衛生職業技術學院 福建 福州 350101）

葡萄胎是臨床常見妊娠滋養細胞疾病，雖然屬于良性病變，但具有生長活躍、潛在惡變的特點，相關資料顯示，4%左右的部分性葡萄胎和20%左右的完全性葡萄胎可發展為侵蝕性葡萄胎或絨毛膜癌[1-2]。近年來有研究發現不同類型葡萄胎的Bcl-2表達程度不同，其過度表達可能與葡萄胎轉化為侵蝕性葡萄胎密切相關[3]。本研究分析Bcl-2、P53、P57、Ki-67表達在葡萄胎中的意義，現報道如下。

表1 PM組、CM組及對照組中Bcl-2、P53、P57、Ki-67表達情況

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月至2017年8月于福建中醫藥大學附屬第二人民醫院檢查的部分性葡萄胎（PM）標本90例、完全性葡萄胎（CM）30例展開研究，同期抽取正常子宮絨毛組織的30例作為對照。所有標本均明確診斷，年齡24～43歲，平均（26.8±5.4）歲。

1.2 方法

對所有病例標本進行EliVisionTMplus免疫組織化學染色，染色步驟包括脫蠟、水化后使用蘇木素浸染5min，自來水洗1min，1%鹽酸酒精分化3s，再用自來水沖洗30～60min，0.5%伊紅酒精染液浸染1min，完成后脫水、二甲苯透明、中性樹膠和蓋玻片封固。接著將載玻片貼上標簽，常規石蠟3μm連續切片，將載玻片在60℃溫度下烘烤30min，脫蠟、水化組織切片，并高壓抗原修復、阻斷內源性過氧化物酶活性、滴加一抗、試劑，最后在DAB溶液下進行顯色處理，對組織中Bcl-2、P53、P57、Ki-67表達進行檢測。一抗為鼠抗人單克隆抗體Bcl-2、P53、P57、Ki-67，試劑盒選用EliVisionTMplus試劑盒。

1.3 結果判斷

根據Beesle法分為四級：（+++）為強陽性，陽性細胞數＞50%；（++）為中度陽性，陽性細胞數為25%～50%；（+）為弱陽性，陽性細胞數＜25%；（-）為陰性，無明顯陽性細胞。各蛋白陽性判斷標準：Bcl-2、P53、P57、Ki-67均通過綜合積分法進行陽性判斷，以著色強度計分與陽性細胞百分比計分相加的總評分評價，≤2分為（-），3分為（+），4分為（++），5～6分為（+++），7分為（++++）。

1.4 統計學方法

采用SPSS20.0軟件分析，經χ2檢驗計數資料，以率表示，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 不同類型子宮葡萄胎中各蛋白表達情況

PM組和對照組中，P53、Bcl-2、Ki-67呈低表達，P57呈高表達；而在CM組中，P53、Bcl-2、Ki-67表達增強，P57表達不明顯。四種抗體在CM組與PM組及對照組之間存在顯著差異（P＜0.05）；而PM組與對照組之間則無明顯差異（P＞0.05），見表1。

2.2 年齡與各蛋白表達的關系

120 例患者中年齡＞40歲有27例，＜40歲有93例。結果可見年齡＞40歲Bcl-2表達陽性率明顯高于年齡≤40歲患者，而其他蛋白表達與年齡無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 年齡與個蛋白表達的關系

3.討論

目前常規HE染色組織病理學依然是大多醫院診斷葡萄胎的主要方法，雖然該方法診斷鑒別葡萄胎有重要作用，不過隨著影像學發展、葡萄胎早期發現，為形態學診斷、鑒別帶來了難度，加之醫師經驗、水平差異影響，葡萄胎病理診斷可重復性差，因此如何對早期滋養層細胞增生疾病準確診斷、鑒別十分關鍵[4]。

Ki-67是一種重要抗體，主要代表細胞繁殖指數，在增生的滋養細胞中表達，以細胞核為陽性表達部位，本研究發現Ki-67在CM中存在較高的表達率，而在PM及正常子宮絨毛組織中呈低表達，說明該抗體對部分性、完全性葡萄胎有重要的鑒別診斷價值。P57是一種細胞周期抑制因子，位于母方11號染色體上，由于CM不含母方染色體，故其無P57有絲分裂抑制因子，本研究中P57在PM中呈陽性表達，在CM中則呈現低表達或未表達。P53是一種抑癌基因，其可發生突變，進而導致抑癌基因缺失，引發癌變；Bcl-2基因使原癌基因，其能夠抑制細胞凋亡。本研究中發現該兩種基因在PM及正常絨毛組織中呈低表達，在CM中呈高表達，由此可見其表達可為治療提供準確指導。P53、P57、Ki-67表達早已被證實在葡萄胎中具有較高的鑒別診斷價值，而本研究發現Bcl-2在不同類型子宮葡萄胎中表達程度也不同。Bcl-2蛋白具有延長細胞壽命的生物學功能，還能夠使細胞對各種凋亡刺激因素抵抗力提高，延遲、阻止多種因素引起的細胞凋亡，Bcl-2表達陽性率高的細胞壽命長，細胞凋亡的進程也更為緩慢，進而可造成細胞堆積，增加腫瘤發生率。在本研究中可以看出，Bcl-2蛋白在正常子宮絨毛組織中僅30.0%的陽性率，而在部分性葡萄胎中陽性率為72.0%，在完全性葡萄胎中陽性率為86.7%，該蛋白在部分和完全性葡萄胎中表達陽性率顯著高于正常者，由此可見Bcl-2可作為鑒別滋養細胞腫瘤的有效指標。同時研究發現，在部分性葡萄胎中Bcl-2主要呈現陽性低表達（38.7%），而在完全性葡萄胎中主要呈現高表達（53.3%），說明該蛋白表達可反映出葡萄胎嚴重程度，對于預后有一定預測意義。此外，在本研究中比較年齡與各蛋白表達情況發現，年齡＞40歲Bcl-2表達陽性率明顯高于年齡≤40歲患者，而其他蛋白表達與年齡無統計學意義，說明年齡與Bcl-2呈正相關，即年齡越大Bcl-2表達陽性率越高，綜合上述來看，進一步說明年齡＞40歲患者預后效果可能相對于年齡≤40歲患者更差。

綜合上述，Bcl-2、P53聯合P57、Ki-67表達在葡萄胎鑒別診斷中發揮了重要作用，具有較高的鑒別診斷意義。