老年胃癌患者EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系

呂士紅 劉 磊 李美姍 史春靜

(牡丹江醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，黑龍江 牡丹江 157000)

胃癌的發(fā)病較為隱匿，早期癥狀類似于胃部炎癥，易被忽視，目前尚未發(fā)現(xiàn)有效的臨床早期診斷技術(shù)〔1〕。相關(guān)研究提出生物標(biāo)志物具有極其重要的作用〔2〕。在胃癌細(xì)胞中表皮生長因子受體(EGFR)相互作用，同時(shí)能促進(jìn)侵襲轉(zhuǎn)移。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9作為腫瘤細(xì)胞穿透基底膜所必需的蛋白水解酶，能影響腫瘤遷移擴(kuò)散調(diào)節(jié)〔3〕。斯鈣素(STC)作為糖蛋白激素，能促使腎對磷酸鹽的吸收，防止血鈣過高，有利于鈣磷動(dòng)態(tài)平衡的維持，相關(guān)研究提出STC的表達(dá)和人類腫瘤發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)〔4〕。本文擬分析老年胃癌患者EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2015年3月至2016年2月牡丹江醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院收治的88例胃癌術(shù)后胃癌組織標(biāo)本，均通過病理證實(shí)為胃癌，在術(shù)前未經(jīng)過放化療等治療，均為首次手術(shù)治療。患者年齡63～85〔平均(72.14±2.76)〕歲；女31例，男57例；浸潤深度：T1～T2 16例，T3～T4 72例；23例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，65例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；68例低度分化，20例中/高度分化；34例Ⅰ、Ⅱ期，54例Ⅲ期。另選擇同期行胃鏡檢查室內(nèi)活檢，提示為正常胃組織的64例視為對照組，無重度不典型增生者。其中女11例，男53例；年齡61～83〔平均(71.65±2.68)〕歲。兩組年齡、性別等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法 德國Leiac公司提供sT501o自動(dòng)染色機(jī)和RM2245病理切片機(jī)，由北京市中山生物制品技術(shù)公司提供鼠抗人EGFR單克隆抗體、鼠抗人MMP-9單克隆抗體、鼠抗人STC2單克隆抗體，濃縮性二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒由烏海博士德生物公司提供。樣本切片3張，采取免疫組化方法予以染色，并檢測樣本中EGFR、MMP-9、STC2表達(dá)。選取5個(gè)不同視野的切片，觀察及記錄視野中100個(gè)細(xì)胞的陽性細(xì)胞數(shù)，細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)染成黃色或棕黃色為陽性，5次陽性細(xì)胞個(gè)數(shù)的平均值作為最終數(shù)目，然后算出平均陽性細(xì)胞率。僅細(xì)胞質(zhì)著色或不存在陽性著色細(xì)胞，同時(shí)陽性細(xì)胞率<5%為陰性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS11.5軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)及Pearson相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組EGFR、MMP-9、STC2陽性表達(dá)分析 胃癌組EGFR、MMP-9、STC2陽性表達(dá)率顯著高于對照組(P<0.001)，見表1。

2.2胃癌組EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達(dá)和臨床病理的關(guān)系 不同性別EGFR、MMP-9、STC2表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但不同腫瘤直徑、浸潤程度、淋巴轉(zhuǎn)移、分化程度、臨床分期患者EGFR、MMP-9、STC2表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 兩組EGFR、MMP-9、STC2陽性表達(dá)對比〔n(%)〕

表2 胃癌組EGFR、MMP-9、STC2蛋白陽性表達(dá)和臨床病理的關(guān)系(n)

2.3胃癌組EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達(dá)相關(guān)性 EGFR和MMP-9、EGFR和STC2、MMP-9和STC2表達(dá)均呈正相關(guān)性(r=0.674、0.724、0.582，均P<0.05)。

3 討 論

胃癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及遷徙和多節(jié)段、多因素、多基因的參與有關(guān)，涉及多種抑癌基因失活、腫瘤基因激活及多種因子調(diào)節(jié)〔5〕。當(dāng)前在診斷和治療胃癌的難點(diǎn)主要是因?yàn)樵缙诎Y狀不明顯，診斷時(shí)間較晚，腫瘤易從胃部經(jīng)過血管、淋巴等向人體內(nèi)其他器官、組織內(nèi)擴(kuò)散和遷移，抗腫瘤效果不明顯。

近年來，已發(fā)現(xiàn)較多的腫瘤影響基因、因子，主要包括EGFR、MMP-9、STC-2〔6〕。MMP-9被稱為明膠原或Ⅳ型膠原酶，作為MMPs的一員，是機(jī)體內(nèi)參與降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)眾多酶中的關(guān)鍵酶〔7〕。ECM降解作為腫瘤細(xì)胞向正常組織侵襲擴(kuò)散的前提，此過程依賴多種酶的共同參與，MMP-9作為腫瘤細(xì)胞穿透基底膜所需的蛋白水解酶〔8〕，不但有降解作用，同時(shí)能促進(jìn)腫瘤血管的生成，能上調(diào)腫瘤血管化的程度。相關(guān)研究表明，食管癌、胃癌、大腸癌等上皮細(xì)胞來源的惡性腫瘤均伴有EGFR蛋白表達(dá)乃至過表達(dá)情況，從中促使癌細(xì)胞的血管生成、增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移，阻礙癌細(xì)胞的凋亡〔9〕。相關(guān)研究使用DNA甲基化檢測發(fā)現(xiàn)EGFR啟動(dòng)子甲基化可能為胃癌發(fā)生、發(fā)展的表觀遺傳學(xué)生物標(biāo)志〔10〕。相關(guān)研究提出多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及演進(jìn)過程和STC家族密切相關(guān)〔11〕。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌細(xì)胞系中STC2作為視黃酸信號通路和雌激素的下游靶標(biāo)，持續(xù)的STC2表達(dá)會(huì)阻礙細(xì)胞的生長及活力〔12〕。相關(guān)研究顯示，神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞通過STC2轉(zhuǎn)染后，會(huì)提高浸潤能力，同時(shí)增強(qiáng)MMP-2的活性，加大腫瘤細(xì)胞出血和轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)〔13〕。STC2在腎癌中的表達(dá)上升，同時(shí)和腎癌侵襲力有關(guān)，縮短患者總生存期。相關(guān)研究在mRNA水平通過檢測癌旁和胃癌組織，得到相似的STC2表達(dá)結(jié)果〔14〕，提示STC2表達(dá)增強(qiáng)作為胃癌侵襲轉(zhuǎn)移過程的重要分子事件，有可能會(huì)加大胃癌的惡性程度。

相關(guān)研究顯示，EGFR、MMP-9、STC2在子宮癌、食道癌、乳腺癌等惡性腫瘤中的表達(dá)上調(diào)〔15〕。本研究結(jié)果EGFR、MMP-9、STC2三者之間的表達(dá)可能和胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。另外EGFR、MMP-9、STC2表達(dá)水平和腫瘤的擴(kuò)散程度呈正相關(guān)，EGFR的過度激活對胃癌組織中惡性細(xì)胞的演進(jìn)過程及胃黏膜正常細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過程發(fā)揮極其重要的作用。

綜上，EGFR、MMP-9、STC2蛋白在胃癌組織中的表達(dá)上升，其表達(dá)和臨床病理特征密切相關(guān)，通過檢測三者的表達(dá)對診治胃癌有一定指導(dǎo)價(jià)值。