生活飲用水總大腸菌群兩種不同檢驗方法對比研究

趙學峰

【摘要】目的：探討生活飲用水總大腸菌群紙片法與多管發(fā)酵法兩種不同檢驗方法的操作過程及不同時段的檢驗效果。方法：從2017年1月-2018年1月收集的生活飲用水標本中選出80份，開展水總大腸菌群實驗，將其分為不同檢驗方法的兩組，分別為觀察組40份和對照組40份，觀察組采用多管發(fā)酵法檢驗，對照組采用紙片法檢驗，比較兩種檢測方法應(yīng)用下2018年1月總大腸桿菌的檢出率以及2018年6月總大腸桿菌的檢出率。結(jié)果：在2018年1月進行的檢驗中，采用紙片法檢驗的對照組標本檢出陽性29例，檢出率為72.5%，低于采用多管發(fā)酵法檢驗的觀察組標本的37例和檢出率的92.5%，P<0.05。在2018年6月的檢驗中，觀察組標本檢驗陽性為32例，檢出率為80%，依舊高于對照組標本的22例和55%，P<0.05。結(jié)論：針對生活飲用水開展的檢驗總大腸菌群的實驗中，采用多管發(fā)酵法進行檢驗，其檢出率明顯比采用紙片法檢驗的檢出率更好，能夠提高檢驗結(jié)果的準確性與科學性，更能確保生活飲用水的安全，值得在實驗室檢驗工作中廣泛應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】生活飲用水；總大腸菌群；多管發(fā)酵法；紙片法

當前，我國的水污染情況越來越嚴重，我國相關(guān)部門及社會各界人士紛紛加大了對飲用水污染情況的重視力度。在醫(yī)學檢驗方面，總大腸桿菌用以判斷飲用水是否受到嚴重污染，成為檢驗的重要因素，也是當前我國相關(guān)部門進行飲用水安全衛(wèi)生管理的重要手段。伴隨著相關(guān)部門的大力整頓與改善，人們生活的飲用水衛(wèi)生標準取決于總大腸桿菌范圍的鑒定，因此相關(guān)的檢測工作非常重要，做好對生活飲用水總大腸桿菌的檢測，很大程度上能夠確定飲用水的指標符合健康飲用范圍[1]。目前，檢驗總大腸桿菌的方法比較多，應(yīng)用的方法不同，其對應(yīng)的應(yīng)用特點也各不相同，比如當下廣泛應(yīng)用的紙片法，這種方法的操作過程相對簡單和便捷，但其結(jié)果準確性存在不確定的因素，因此需要改進，而更多檢驗人員提倡應(yīng)用多管發(fā)酵法，其全面的操作與適宜的方法更能提高檢驗質(zhì)量[2]。為了探討生活飲用水總大腸菌群的有效檢驗方法，本研究現(xiàn)選擇80份生活飲用水標準，進行專業(yè)的檢測對比分析，現(xiàn)將具體的分析過程整理為以下的報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院在2017年1月～2018年1月期間收集的80份生活飲用水標準作為本研究的研究對象，進行總大腸桿菌的檢驗，隨機將其分為觀察組與對照組各40例，分別采用多管發(fā)酵法和紙片法，對比研究不同檢驗方法的檢驗過程以及檢驗結(jié)果，以確定采用不同檢驗方法在不同時期的結(jié)果準確性。

1.2 研究方法

對照組的40例標本檢驗方法為紙片法，在采用紙片法進行檢驗時，檢驗人員要確保儀器及使用試劑得到充分消毒，根據(jù)規(guī)定要求進行霉菌消毒操作，進一步保證檢驗結(jié)果更為準確。結(jié)合紙片法的要求制定檢驗計劃，并根據(jù)說明書的操作標準操作實驗，預防出現(xiàn)實驗數(shù)據(jù)信息遺漏的情況。在開展檢驗以前，檢驗人員要通過微生物實驗培養(yǎng)細菌，做好實驗室消毒工作，采用生理鹽水將紙浸濕，確保紙片貼在需要進行檢驗的飲用水中保持30s時間，隨后將其放入到恒溫培育箱進行18～24h的增菌處理，保持（36±1）℃的溫度，采用9ml生理鹽水稀釋大腸埃希菌菌苔，稀釋到10-3，采用無菌棉簽蘸取被稀釋的菌液，蘸取到試紙上，確定結(jié)果為陽性時，則在無菌濾紙上有發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸紙片變成黃色或是有紅色斑點出現(xiàn)的情況。

觀察組的40例標本檢驗方法為多管發(fā)酵法，取10ml的不同標本水樣，同時準備10ml乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將其注入其中，再抽取lml樣本放置到9ml霉菌0.85%生理鹽水當中，使之與生理鹽水混合，再從混合的液體中取出1ml，與單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)接種，再通過恒溫培育箱培養(yǎng)，將溫度調(diào)控為（3611）℃，時間調(diào)控為（2412）h，再對處理過的樣本進行專業(yè)的檢測，與10ml樣本接種，培養(yǎng)細菌，對整體操作的結(jié)果進行觀察。完成培育工作后，檢驗分析結(jié)果，比如在檢驗時乳糖蛋白胨培養(yǎng)館當中無氣體產(chǎn)生，或是無酸性位置，則結(jié)果顯示呈現(xiàn)陰性，如試管內(nèi)有氣體，有酸性位置則結(jié)果表示陽性。針對檢測出問題的標準種到伊紅美蘭瓊脂板當中，再持續(xù)18止24h的培養(yǎng)，對菌群所發(fā)生的變化進行觀察和記錄，直到確定是菌群以后通過顯微鏡進行進一步的查實，最后驗證結(jié)果。

1.3 觀察指標

同實驗均在2019年1月和2018年6月進行，采用多管發(fā)酵法與紙片法對比總大腸桿菌的檢出率，最終的菌群總數(shù)判斷方法參照國家衛(wèi)生檢驗標準飲用水的指標，菌群總數(shù)低于100CFH/ML表示結(jié)果呈陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法

本研究采用18.0統(tǒng)計學軟件對比分析，計量資料通過均數(shù)±標準差表示，通過t檢驗，計數(shù)資料通過%表示，以X2檢驗，P<0.05表示比較差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 2018年1月總大腸桿菌檢出率

觀察組在2018年1月總大腸桿菌檢出率為92.5%，明顯高于對照組的72.5%，P<0.05。如表1所示。

2.2 2018年6月總大腸桿菌檢出率

觀察組2018年6月總大腸桿菌檢出率為80%，高于對照組檢出率的55%，P<0.05。如表2所示。

3 討論

飲用水是居民的必須品，對人體的機體有很好的吸收作用，從而促進血液循環(huán)，保持機體體內(nèi)酸堿平衡，調(diào)節(jié)體溫等等，由此可見，飲用水對于人們生活生存有著非常重要的應(yīng)用[3]。這些年來，飲用水的安全威脅逐漸出現(xiàn)，其主要的感染細菌就是大腸桿菌，在環(huán)境的進一步污染和生態(tài)的破壞背景下，飲用水受到整體水質(zhì)下降的影響，其凸顯的問題越來越多，對人們的身心健康構(gòu)成嚴重的威脅，因此相關(guān)的實驗室檢查人員必須結(jié)合飲用水含有的大腸桿菌情況進行嚴格準確的檢測，科學檢查菌群的具體數(shù)量，加強檢驗管理和方法的規(guī)范，確定更準確的結(jié)果，才能及時發(fā)現(xiàn)飲用水存在的問題，將安全威脅降至最低[4]。在檢驗總大腸菌群的工作中，目前應(yīng)用的方法較多，本研究主要探討采用多管發(fā)酵法及紙片法在檢出率上的優(yōu)劣，采用多管發(fā)酵法檢驗的40例觀察組標本2018年1月檢出陽性37例，檢出率為92.50%，采用紙片法檢驗的對照組同時段的陽性檢出率僅為29例，檢出率72.5%，P<0.05。而在2018年6月進行的檢測中，觀察組標本的檢出率依舊高于對照組，檢出率分別是80%與55%，P<0.05。原因可能如下：

（1）采用紙片法檢測的過程比較便捷，花費的時間短，檢驗人員不需要過高的技術(shù)就可以操作，但這個過程很容易受到外部環(huán)境影響，其結(jié)果也會發(fā)生變化；

（2）多管發(fā)酵法的應(yīng)用步驟相對復雜，有較長的操作時間，整個過程很少受到外部環(huán)境影響，因此結(jié)果的準確性得到保障，也避免了單一檢驗結(jié)果影響結(jié)果的情況；

（3）兩種檢驗方法均具有一定的優(yōu)勢，檢驗人員可以通過紙片法快速確定標本是否存在總大腸菌群，采用多管發(fā)酵法進一步保障結(jié)果的科學準確性，進行結(jié)合應(yīng)用[5-6]。

綜上所述，多管發(fā)酵法比紙片法在檢測生活飲用水總大腸菌群中具有更高的準確性，檢驗人員要根據(jù)需要合理選擇檢驗方法，才能提高檢驗的效率與準確率。

參考文獻

[1]鄧婷，駱瓊.兩種方法對水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測的對比分析[J].食品工程，2017，1（03）：52-53.

[2]武利平，李曉路.兩種方法檢測水中總大腸菌群和大腸埃希菌的等效性分析[J].衛(wèi)生研究，2017，46（05）：793-796.

[3]張康.生活飲用水與水源水微生物檢驗結(jié)果探討[J].中國衛(wèi)生標準管理，2017，8（02）：6-7.

[4]尹紅.淺析生活飲用水總大腸菌群兩種不同檢驗方法的比較[J].疾病監(jiān)測與控制，2016，10（07）：568-570.

[5]李粉霞，許向云.呼和浩特市2009-2012年生活飲用水微生物檢測指標分析[J].疾病監(jiān)測與控制，2014，8（10）：633-634.

[6]陳燕.對比分析生活飲用水總大腸菌群的兩種不同檢驗方法[J].世界最新醫(yī)學信息文摘，2018，17（17）：133-134.