乳腺浸潤性導管癌組織中PHH3和Ki—67的表達及其臨床意義探討

黃江生　鄧偉　楊春梅　王平

[摘要] 目的 探究乳腺浸潤性導管癌組織中PHH3和Ki-67的表達及其臨床意義。方法 方便選取該院2014年11月—2017年11月收治的31例乳腺浸潤性導管癌患者為研究對象，為研究組；并將同期收治的另外31名正常乳腺組織者設為對照組，對其一般資料進行回顧分析。結果 研究組的PHH3陽性表達率為70.97%，Ki-67陽性表達率為61.29%，明顯高于對照組的9.68%、6.45%（P<0.05）；且研究組的PHH3、Ki-67表達跟淋巴結轉移、TNM分期、腫瘤組織學分級相關，預后效果較差。結論 PHH3、Ki-67表達跟乳腺浸潤性導管癌組織發生、發展相關，可為臨床治療及預后效果評價提供理論依據。

[關鍵詞] 乳腺浸潤性導管癌組織；PHH3；Ki-67；表達；臨床意義

[中圖分類號] R739 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）04（c）-0040-03

Study on Expressions of PHH3 and Ki-67 and Clinical Significance in the Breast Infiltrating Ductal Carcinoma Tissues

HUANG Jiang-sheng， DENG Wei， YANG Chun-mei， WANG Ping

Department of Pathology， Kunshan Hospital of TCM Affiliated to Nanjing University of TCM， Kunshan， Jiangsu Province， 215300 China

[Abstract] Objective To study the expressions of PHH3 and Ki-67 and clinical significance in the breast infiltrating ductal carcinoma tissues. Methods 31 cases of patients with breast infiltrating ductal carcinoma tissues admitted and treated in our hospital from November 2014 to November 2017 were selected as the research group， while 31 cases of patients with normal breast tissues at the same period were selected as the control group， and the general data were analyzed. Results The PHH3 positive expression rate and Ki-67 positive expression rate in the research group were obviously higher than those in the control group（70.97%， 61.29% vs 9.68%， 6.45%）（P<0.05）， and the expressions of PHH3 and Ki-67 in the research group were related to the lymphatic metastasis， TNM staging and histological grade of tumor， and the prognosis effect is worse. Conclusion The expressions of PHH3 and Ki-67 are related to the occurrence and development of breast infiltrating ductal carcinoma tissues， which can provide theoretical basis for the clinical treatment and evaluation of prognosis effect.

[Key words] Breast infiltrating ductal carcinoma tissues； PHH3； Ki-67； Expression； Clinical significance

乳腺癌為臨床上常見的婦科惡性腫瘤，近些年來，該病癥發病率呈現出逐年上升的趨勢。而浸潤性導管癌為乳腺癌癥中較為常見的一種組織學類型，約占乳腺癌的70%。從浸潤性導管癌的發生機制看，主要跟腫瘤細胞的無線增殖、自主分裂相關，所以，需要對關鍵性指標進行有效測量，從而更好的分析患者的病情發展狀況，并為診治、預后評定提供可靠依據[1]。該文主要研究乳腺浸潤性導管癌組織中PHH3和Ki-67的表達及其臨床意義，并將該院2014年11月—2017年11月收治的31例乳腺浸潤性導管癌患者作為該次研究對象，并將結果報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

方便選取該院收治的乳腺浸潤性導管癌患者31例納入該次研究，設為研究組。所有患者均行手術切除治療，且經過倫理委員會批準，患者及家屬均簽署知情同意書。其年齡在46～80歲，平均年齡為（52.3±3.06）歲；腫瘤直徑在1.6～6.2 cm，平均直徑為（3.1±0.12）cm；依據組織學分級，I級占8例，Ⅱ占13例，Ⅲ級占10例。合并有腋窩淋巴結轉移者共有17例。依據國際抗癌聯盟（UICC）TNM標準，I期共有14例，Ⅱ期有9例，Ⅲ期有5例，Ⅳ期有3例。另外，將同期收治的31名癌旁正常乳腺組織者設為對照組，其年齡在54～79歲，平均年齡為（51.6±3.21）歲，其組織學結構均正常。所有研究對象均未在術前接收過放療、化療、抗雄激素等治療。兩組研究對象在性別、年齡等一般資料上比較差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

將兔抗人多克隆抗體RAB-0693型作為免疫組化試劑PHH3；用鼠抗人單克隆抗體MAB-0672型為Ki-67試劑。采用免疫組化MaxVision兩步法，對研究組、對照組乳腺組織中的PHH3、Ki-67表達予以檢測，并對研究組的病理特征、預后關系進行分析。所有標本均采用10%的中性福爾馬林予以固定，且用石蠟包埋，連續切片，厚度為4 μm。在操作過程中，需要按照試劑盒說明書的相關步驟進行，并已知陽性切片為陽性對照，用PBS代替一抗為陰性對照。

1.3 效果評定

記錄兩組乳腺組織內的PHH3、Ki-67表達，兩者陽性表達皆定位在細胞胞核，其中，當細胞核內存在黃色顆粒沉淀物時，可視為陽性細胞。在判定時，要使用高倍鏡對計數10個視野內的陽性細胞占比予以記錄，PHH3的陽性細胞≥10%表示高表達，陽性細胞<10%表示低表達；Ki-67的陽性細胞≥20%為高表達，反之則為低表達。

1.4 統計方法

該研究涉及到的數據均用SPSS 19.0統計學軟件予以處理，計數資料用[n（%）]表示，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 組間乳腺組織表達水平比較

對照組PHH3高表達有3例，陽性率為9.68%，Ki-67高表達有2例，陽性率為6.45%；而研究組的PHH3高表達有22例，陽性率為70.97%，Ki-67高表達有19例，陽性率為61.29%；經比價發現，研究組的PHH3、Ki-67陽性表達明顯高于對照組，且在細胞核內均呈黃色（χ2=24.196 8、20.810 7，P<0.05）。

2.2 乳腺浸潤性導管癌病理特征與PHH3、Ki-67表達關系

通過對研究組患者的PHH3、Ki-67表達進一步研究后發現，其表達水平跟淋巴結轉移、TNM分期、腫瘤組織學分級相關（P<0.05）；但與腫瘤直徑、患者年齡無關，見表1。

2.3 PHH3、Ki-67表達與預后關系

在31例研究組患者中，所有患者通過治療后2年隨訪，發現有6例患者死亡，且患者均為PHH3、Ki-67高表達，說明 PHH3、Ki-67表達水平，跟乳腺浸潤性導管癌預后效果有密切聯系，其陽性表達率越高，則預后效果越差。

3 討論

乳腺浸潤性導管癌的發生、發展與多種因素相關，且包含了不同的可能機制，而不同的機制又會直接或是間接的對正常細胞周期造成影響。產生惡性腫瘤，主要是由于腫瘤細胞無限制的增殖、自主分裂。因此，對其瘤細胞的具體增殖狀況進行有效測量，可以更好的協助診斷，并對預后效果進行評價，從而為臨床治療提供可靠的依據[2-4]。

Ki-67為增殖細胞核抗原，其蛋白主要由相對分子質量為3.58×104及3.19×104的多肽鏈構成，基因位于10號染色體上，一般在G1晚期存在表達，并在S期、G2期表達逐漸增多，到M期時達到頂峰。Ki-67不僅在乳腺浸潤性導管癌中有著較高的表達，在其他多種惡性腫瘤中均有著較高的表達，可以有效反映出細胞增殖活性，并用于檢測腫瘤細胞的增殖狀況，對其預后效果予以評價[5]。Ki-67表達與增殖細胞相關，且廣泛存在于細胞核基質核抗原內，不僅可以在靜止期細胞內檢出，且可能在增殖細胞相關周期活動期內檢出[6-7]。在該研究中，研究組患者的組織內Ki-67表達水平，明顯要高于對照組，組間差異有統計學意義（P<0.05）。另外，在該組研究中，研究組患者的Ki-67高表達，主要與高組織學分級、高TNM分期以及是否存在淋巴結轉移相關，但與患者的年齡以及腫瘤直徑無明顯的關系（P<0.05）。且其Ki-67表達，與淋巴結轉移、高組織學分級、高TNM分期呈正比例關系。

磷酸化組蛋白H3（PHH3）為最新發現的5個核心組蛋白之一，在真核細胞內跟其它的組蛋白一同組成了染色質中關鍵性的蛋白組分。PHH3表達通常可在核分裂期間達到最大值，為核分裂特異性標志物之一，是公認的腫瘤細胞核分裂象。在該研究中，發現研究組患者的PHH3高表達率較對照組明顯增高，組間差異有統計學意義（P<0.05），表明PHH3表達狀況跟乳腺浸潤性導管癌的發生、進展等有密切的關聯，且其表達跟組織學分級為正比例關系。也就是說，患者的組織學分級越高，則其陽性表達率也越高。同時，從研究結果可看出，PHH3表達，跟淋巴結是否轉移、高TNM分期等相關，與王文超等[8]研究結果相符（P<0.05）。因此，可通過檢測PHH3表達，來對淋巴結轉移狀況、預后治療效果進行評價。而對PHH3在乳腺浸潤性導管癌組織內的表達進行抑制，極有可能對該病癥的進展、淋巴結遠處浸潤轉移等產生良好的阻礙作用，能夠在一定程度上提升預后效果，并提高患者的生存率，可以為新治療方案的研制提供新的思路。

綜上所述，PHH3、Ki-67表達跟乳腺浸潤性導管癌的發生與進展有密切的聯系，是其主要蛋白之一，結合PHH3、Ki-67在乳腺浸潤性導管癌組織內的表達，可以對其病理分級、預后效果進行有效判斷，并為臨床治療提供可靠依據，有利于合理治療方案的制定。

[參考文獻]

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[6] 黃凌萍，丁潔瓊.乳腺浸潤性導管癌組織中ER、PR、Ki-67、p53表達與超聲造影特征的相關性研究[J].解放軍醫藥雜志，2017，29（9）：63-66.

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[8] 王文超，楊麗.乳腺浸潤性導管癌鈣化與人表皮生長因子受體-2及細胞增殖抗原Ki67關系[J].中華實用診斷與治療雜志，2016，30（8）：815-817.

（收稿日期：2018-01-22）