乳房肥大患者外周血中雌激素表達水平研究

王鈉 馬顯杰 栗勇

[摘要]目的：研究乳房肥大患者外周血中雌激素表達水平，為乳房肥大患者病因學研究奠定基礎，為腺性乳房肥大癥的臨床治療提供相關實驗依據。方法：將乳房肥大（95例）和正常體積乳房患者（84例）按照入院時處于月經周期的卵泡期、排卵期、黃體期進行分類，抽取患者入院當天外周血5ml，采用17β-雌二醇放射免疫藥盒及SN-682放射免疫計數器測定外周血中17β-雌二醇表達水平，根據各指標OD值計算其濃度，結果采用放射免疫γ計數器及配套統計軟件進行計數和數據處理。結果：在體重指數同一范圍內，乳房肥大組與正常體積乳房組17β-雌二醇表達水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。結論：外周血中17β-雌二醇可能與乳房肥大的發生無關。

[關鍵詞]乳房肥大癥；雌激素；17β-雌二醇；外周血；體重指數

[中圖分類號]R622 [文獻標志碼]A [文章編號]1008-6455（2018）05-0119-03

Study on Expression of Estrogen in Peripheral Blood of Patients with Mammary Hypertrophy

WANG Na，MA Xian-jie，LI Yong

（Department of Plastic Surgery，Xijing Hospital of the Military Medical University of the Air Force，Xi'an 710032，Shaanxi，China）

Abstract： Objective To study the expression of estrogen in peripheral blood of patients with mammary hypertrophy， and to lay a foundation for the study of etiology of mammary hypertrophy in the future， and to provide relevant experimental evidence for the clinical treatment of glandular mammary hypertrophy. Methods After admission， mammary hypertrophy （95 cases） and normal volume breast patients （84 cases） were classified according to the follicular phase， ovulation phase， and luteal phase during the menstrual cycle at the time of admission， and 5ml of peripheral blood was collected on the day of admission， using 17β-estradiol Radioimmunoassay kit and SN-682 radioimmunoassay counter were used to measure the expression level of 17β-estradiol in peripheral blood. The concentration was calculated according to the OD value of each index. The results were counted and processed by radioimmunoassay r counter and statistical software. Results There was no significant difference in the expression level of 17β-estradiol between hypertrophic breast and normal breast in the same range of body mass index（P>0.05）. Conclusion 17β-estradiol in peripheral blood may not be related to the occurrence of mammary hypertrophy.

Key words： mammary hypertrophy； estrogen； 17β- estradiol； peripheral blood； body mass index

乳房肥大癥，指女性乳房腺體及脂肪結締組織過度增生導致的體積和重量增加[1-2]。乳房肥大多發生在青春期和妊娠后女性的一側或兩側乳房，給年輕女性帶來巨大的痛苦。雌激素（estrogen）是一種女性激素，由卵巢和胎盤產生，腎上腺皮質也產生少量雌激素。雌激素是生物體內許多生物學過程如生長、發育和復制的關鍵調節劑，在男性和女性體內都包括許多雌激素的靶器官如生殖道、乳房組織、骨骼、心血管和中樞神經系統[3-4]。乳房組織在體內作為一個性激素作用的重要靶器官，性激素在其生長、發育、成熟及功能方面發揮著重要作用。有關外周血中雌激素水平與乳房肥大是否有關系一直存在爭議，課題組在乳房肥大患者和正常體積乳房患者的外周血中檢測雌激素的水平，分析雌激素對乳房肥大的Z作用。由于前來就診的患者處于絕經期的稀少，臨床資料無統計學意義，本次只研究卵泡期、排卵期和黃體期3個時期各組患者外周血中17β-雌二醇水平的差異。

1 材料和方法

1.1 一般資料：實驗組為2012年12月-2014年2月西京醫院整形外科收治的因乳房肥大行乳房縮小整形術的患者95例（見圖1），其中卵泡期37例，排卵期32例，黃體期26例，均為女性，年齡14～51歲，平均29歲，平均體重指數22.25kg/m2，選擇單側乳房體積600ml以上，單側乳房切除量均在300g以上。

對照組（正常體積乳房組）為2012年12月-2014年2月收治的乳房下垂行乳房上提懸吊術患者84例，乳房體積正常行單純乳房下垂懸吊術81例，女復男乳房全切術3例（未服用激素）。其中卵泡期27例，排卵期31例，黃體期26例，均為女性，年齡17～45歲，平均年齡29歲，平均體重指數21.65kg/m2，乳房體積為250～350ml。經文獻回顧及臨床病例分析，目前學者們認為正常乳房體積250～350ml較合適[5]。兩組年齡等基本資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。兩組手術時間均不在月經期，選自月經周期后的第2～3周。所有患者均無全身其他系統疾病，無不良嗜好，飲食規律，生活健康，無明顯手術禁忌證。

1.1.1 乳房體積計算：采用Sigurdson[6]等報道的方法。計算公式：乳房體積=33.5×PP+37.7×FP-1305（患者雙手叉腰，背靠墻站立，用軟卷尺沿乳房基底部測量其周長計為PP，在乳房表面標記一點P，該點為乳房下皺襞最低點在乳房前表面的投影，乳房下皺襞最低點到P點的直線距離為FP）。

1.1.2 排除標準：①人流及引產手術未滿2月者；②近期內或1個月內有服用雌激素及相關藥物史者；③6個月內有乳房手術史者；④有乳腺癌或乳腺癌家族病史者；⑤2個月內有乳房急慢性炎癥史者；⑥停止哺乳未滿6個月者；⑦乳房觸診可以摸到硬塊及結節者；⑧既往有乳腺雙側或單側的非典型增生者；⑨12個月內有子宮及卵巢等生殖系統切除及部分切除者；⑩長期月經周期不規律及行藥物治療者； 雙側或單側乳腺痛及乳頭溢液者； 乳房皮膚顏色及質地發生改變者。

1.2 主要試劑與儀器：17β-雌二醇試劑盒購自R-biopharm（德國拜發），血漿購自R-biopharm（德國拜發），甲基叔丁基醚購自R-biopharm（德國拜發），石油醚購自R-biopharm（德國拜發）。微孔板酶標儀（德國拜發），冰柜（美國Thermo Scientific公司），移液器（德國Eppendorf公司），刻度移液管（德國Eppendorf公司）。

1.3 實驗方法：①將乳房肥大（95例）和正常體積乳房患者（84例）按照入院時處于月經周期的卵泡期、排卵期、黃體期進行分類，詳細記錄患者資料，抽取患者入院當天外周血5ml后靜置并離心，取上清液（血清）；②取1ml樣品于標記好的玻璃試管中，加入5ml醚混合物中[甲基叔丁基醚/石油醚（30/70 v/v）]，室溫下（20℃～25℃）搖床內震蕩20min；③提取液在-20℃冰箱內冷凍60min（或-80℃冰箱內冷凍30min），收集上清液于一個標記好的試管中；④含醚上清液在60℃水浴鍋中蒸干，干燥殘留物用400μl樣品稀釋液稀釋并充分吹打混勻，每孔取20μl樣品進行檢測；⑤將稀釋后的酶連接物溶液50μl與標準品或處理好的樣品溶液20μl吹打混勻后逐一的加入到對應的微孔中；⑥向每一個微孔中加入50μl提前稀釋的17β-雌二醇抗體溶液，充分吹打混勻，靜置10min，在室溫（25℃）條件下孵育2h；⑦將微孔中的液體棄去，將微孔架倒置于濾紙上，輕輕拍打微孔架，直至微孔中的液體完全干燥，蒸餾水清洗微孔；⑧向每個清洗過的微孔中加入提前預冷好的50μl底物和50μl發色劑，充分混合后在室溫（25℃）條件下避光處孵育1h；⑨恢復光照，將100μl反應終止液仔細加入前面每一個微孔中，充分混合；⑩向微孔中加入反應終止液，靜置20min后于450nm處測量吸光度值； 根據各指標OD值計算其濃度并記錄，采用放射免疫γ計數器及配套統計軟件進行計數和數據處理。

1.4 統計學分析：采用SPSS 18.0版本統計軟件進行分析處理，兩組間體重指數比較采用t檢驗，外周血激素水平比較采用t檢驗的Mann-Whtney U進行統計分析，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 體重指數檢測結果：如圖1所示，實驗組95例患者體重指數為（22.25±5.11）kg/m2，對照組84例患者體重指數為（21.65±5.07）kg/m2，組間比較差異無統計學意義（P=0.9462），本次選擇的患者來源排除了由于肥胖原因造成的乳房體積的差異，為后面進一步的實驗奠定了基礎。

2.2 外周血17β-雌二醇水平檢測結果：如圖3所示，實驗組卵泡期患者外周血17β-雌二醇水平為（174.43±42.32）pmol/L，對照組為（189.11±57.45）pmol/L，組間比較差異無統計學意義（P=0.3029）；如圖4所示，實驗組排卵期患者外周血17β-雌二醇水平為（121.11±31.23）pmol/L，對照組為（132.77±41.42）pmol/L，差異無統計學意義（P=0.8160）；如圖5所示，實驗組黃體期患者外周血17β-雌二醇水平為（229.66±74.98）pmol/L，對照組為（214.11±63.25）pmol/L，差異無統計學意義（P=0.5526）。

3 討論

至今，乳房肥大癥只能通過手術治療而達到緩解，對于腺性乳房肥大的發病機制尚不清楚。有學者認為體內雌激素在乳房的正常發育過程中起著重要的作用[7-8]。另有學者認為，乳房肥大的發生可能與乳腺組織局部的雌激素水平增多或靶細胞對雌激素的反應性增強有關[3，9]。雌激素相關的乳房肥大癥多發生在青春期和妊娠后婦女，因其體內的激素水平處于比較敏感的變化時期，臨床上有少部分青春期乳房肥大患者有著明顯的遺傳傾向[10]。

雌激素在人體內發揮著重要的作用，雌激素的主要成分是17β-雌二醇，17β-雌二醇在人體內許多器官的生長、發育過程中起著關鍵性的作用[11-13]，例如乳房、子宮、卵巢、前列腺等。雌激素能促進人類乳房正常生長發育，還在體內通過與雌激素受體的共同作用參與了各種乳房疾病的發生，例如：乳房的各種良惡性腫瘤等[11，14]。

目前有關外周血中雌激素水平與乳房肥大的統計學研究數據及病例較少。所以，為了使乳房肥大的病因學研究更好地服務于臨床，本次收集了西京醫院乳房肥大患者95例和正常體積乳房患者84例作為研究對象，為了確保所選患者均為腺性乳房肥大，排除一些由于過度肥胖所導致的脂肪性乳房肥大，對患者的體重指數及其他全身性疾病進行了嚴格篩選，排除由于肥胖原因造成的乳房體積的差異。女性患者的生理周期分為卵泡期、排卵期、黃體期及絕經期，由于處于絕經期的患者稀少，且絕經期婦女激素水平相對穩定，所以本次研究主要以卵泡期、排卵期和黃體期患者為主。3組處于不同生理周期的研究資料顯示，乳房肥大組與正常體積乳房組患者外周血中17β-雌二醇比較，無明顯升高，提示探索乳房肥大的病因應該從局部著手。大量的研究資料表明，乳房肥大可能是局部雌激素增多或乳房局部組織對雌激素的敏感性增強有關，所以進一步實驗需要從局部去尋找與乳房肥大有關的雌激素水平及其受體的表達情況。

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[收稿日期]2018-01-28 [修回日期]2018-04-10

編輯/朱婉蓉