氣相色譜法測定硫酸阿米卡星中乙醇的殘留量

張朋飛 王 琳 劉素鴿

(保定學院 生化系，河北 保定 071000)

硫酸阿米卡星為新型廣譜卡那霉素A的半合成衍生物，具有抗菌譜廣、活性強的特點，是臨床上敏感性細菌導致的疾病有效治療藥物之一[1－4]。

該藥合成過程中需使用甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等溶劑，未能被全部清除。人用藥品注冊技術要求國際協調會(ICH)[5]和中國藥典(2010版)規定了69種組分作為藥品中殘留溶劑的檢測對象及各組分在藥品中的殘留限度，其中乙醇的殘留限度為 0.5%[2－5]。

本實驗根據中國藥典第二部2010版有機溶劑殘留量測定的原則[3]，建立了毛細管氣相色譜法，對硫酸阿米卡星中甲醇、乙醇、乙腈、丙酮四種殘留的有機溶劑進行分離，并使用內標分析法測定硫酸阿米卡星中乙醇的殘留量。

1 實驗部分

1.1 儀器設備與材料

GC－4000(A)毛細管氣相色譜儀(北京東西電子廠)，A5000氣相色譜儀工作站(北京東西分析儀器有限公司)，SGH－500高純氫發生器(北京東方精華苑科技有限公司)，G103色譜用空氣發生器(北京東方精華苑科技有限公司)，硫酸阿米卡星注射液(批號2101441FA，齊魯制藥有限公司)，其他試劑均為分析純。

1.2 溶液的配制

分別配制五種有機溶劑此為標準溶液1、2、3、4、5號，濃度分別為(0.007917 ml、0.007895 ml、0.004000ml、0.001580ml、0.003214 ml)。分別各取上述甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、正丙醇1.0 mL，0.5 mL，0.5 mL，0.2 mL，0.6 mL 于100 mL 容量瓶中，配成對照品溶液6;精確量取5 mL乙醇，于100 mL容量瓶中，配成貯備液。

1.3 色譜條件

OV－17(30m×0.32mm)毛細管氣相色譜柱;檢測器為FID;載氣為氮氣，柱前壓為0.06MPa;進樣口溫度200℃;檢測器溫度200℃;柱溫:40℃恒溫;進樣量為1μL;載氣分流流量為53.85mL/min。取待測試劑0.8μL 和正丙醇0.2μL，直接分流進樣。

2 結果與討論

2.1 專屬性實驗

取配制好的標準溶液6進樣。如圖1表明甲醇保留時間為 1.70 min，乙醇為 1.90min，丙酮為 2.15 min，乙腈為 2.48 min，正丙醇為 2.57min，相鄰色譜峰間的分離度分別為 0.9，1.05，1.26，0.85，基本可以分離。

圖1 標準溶液圖

圖2 硫酸阿米卡星譜圖

2.2 校正因子

取乙醇和正丙醇標準溶液各0.5μL，按上述色譜條件進行檢測，平行測五次，由公式:

其中Ar=標樣組份的峰面積;Cr=標樣組份的濃度;Ai=內標物的峰面積;Ci=內標物的濃度。

計算出校正因子數值分別為(1.639、1.631、1.642、1.648、1.628，其 RSD 為 0.51%)

2.3 線性關系考察

精密量取貯備液 0.2mL、0.8mL、1.4mL、2.0mL、2.6mL、3.2mL分別置于25mL容量瓶中，配制成一系列濃度的溶液，分別進樣測定峰面積(14455、55286、88409、141534、207137 和246945)，進行線性回歸分析(A=2.52125×107×C －9646.0482，其中 R=0.99488)

2.4 硫酸阿米卡星的測定

儀器的噪聲為0.4405μA*s，經計算，乙醇的檢出限為0.00019g/mL。表明檢測靈敏度能夠滿足要求。取試劑0.8μ和正丙醇0.2μL，進行檢測，結果如圖2，按內標法計算藥品中的乙醇的殘留量。

計算公式為如下:

其中Ar=樣品組份的峰面積或峰高;Ai=內標物的峰面積或峰高;Rf=校正因子。

由試劑色譜圖和以上兩公式可知供試品中乙醇含量為0.283%，符合中國藥典2010版二部附錄ⅧP的規定。

3 結論

本文所建立的方法專屬性良好，所測有機殘留溶劑乙醇具有良好的線性關系，RSD=2.6%，方法靈敏、準確、快速且分離度良好，適用于硫酸阿米卡星注射液中乙醇含量的測定。乙醇含量為0.283%，符合中國藥典2010年版二部附錄ⅧP的規定。

[1]王立萍，李茜，劉英.硫酸阿米卡星注射液質量評價[J].湖南畜牧獸醫，2008，2(1):10 －11.

[2]寧建龍，劉進輝，孫志良等.硫酸阿米卡星脂質體注射液對豬細菌性疾病的療效研究[J].湖南畜牧獸醫，2008，2(1):10－11.

[3]周洪柱，翠云表.氣相色譜法測定乙腈廢水中乙腈的含量[J].云南化工，2005，32(5):42－43.

[4]朱小兵.解析氣相色譜[N].中國包裝報，2006－9－18(6).

[5]國家藥典委員會.中國藥典[M].第七版，北京:中國醫藥科技出版社，2000:1326－1327.