豬瘟疫苗免疫抗體檢測與分析

段正贏，周志忠，周丹娜，楊克禮，郭 銳，劉 威，劉澤文，袁芳艷，焦祖武，田永祥

（1.湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所/農業部畜禽細菌病防治制劑創制重點實驗室/動物胚胎工程及分子育種湖北省重點實驗室，湖北 武漢 430064；2.湖北省洪湖市農業綜合執法大隊，湖北 洪湖 433200）

豬瘟（Classical swine fever,CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起豬的一種高度接觸性傳染病，被世界動物衛生組織（OIE）列為必須報告的傳染病[1]，我國將豬瘟列入一類動物疫病病種，是目前危害我國養豬業健康發展的主要疫病，也是我國重點防范的主要疫病。1956年我國研制出了豬瘟兔化弱毒疫苗，經免疫的豬具有持久免疫能力，也減少了被其他病毒感染的概率，該疫苗被認為是最具有安全性和免疫原性最好的疫苗[2]。至今該疫苗仍被許多國家應用于豬瘟病毒的防控。

目前，規模豬場在豬瘟疫苗高密度免疫下，豬瘟的發生與流行已逐步減少，但“非典型豬瘟”以及疫苗免疫失敗現象仍時有發生。對豬群進行抗體水平監測，是我們評價免疫效果及優化免疫程序的重要手段。為了使豬群保持較高而整齊的豬瘟抗體水平，保證豬瘟疫苗免疫確實有效，2017年對湖北洪湖某豬場的豬瘟疫苗免疫抗體水平進行了檢測與分析，為豬場豬瘟疫苗免疫效果的評價與免疫程序的優化提供參考與指導。

1 材料與方法

1.1 血清

該場存欄母豬610頭，種公豬13頭。該豬場豬瘟疫苗免疫程序：種豬一年接種4次，免疫劑量為4頭份/頭；商品豬21日齡進行首免，60日齡進行二免，免疫劑量為2頭份/頭。根據該豬場養殖數量與豬瘟疫苗免疫現狀，分別抽檢后備母豬血清樣品20份，妊娠母豬血清樣品30份，哺乳母豬血清樣品50份，種公豬血清樣品13份，21日齡（首免前）哺乳仔豬血清樣品100份，42日齡（首免后21 d）保育豬血清樣品100份，81日齡（二免后21 d）肥育豬血清樣品100份，共計抽檢血清樣品413份。血液樣品采集時間為2017年10月，血樣在實驗室分離血清后，置-20℃冰箱中保存，備用。

1.2 檢測試劑

豬瘟抗體ELISA檢測試劑盒為IDEXX公司生產，其余試劑、儀器及耗材均由農業部畜禽細菌病防治制劑創制重點實驗室提供。

1.3 方法

采用IDEXX公司生產的豬瘟抗體ELISA檢測試劑盒對所有血清樣品進行抗體檢測，檢測程序和判斷標準嚴格參照試劑盒使用說明進行操作。樣品豬瘟抗體判定標準：阻斷率≥40%為陽性，阻斷率≤30%為陰性，30%＜阻斷率＜40%為可疑。并計算和分析抗體的離散度、平均值。

2 結果

豬瘟抗體檢測樣品共計413份，其中種豬群檢測樣品113份，商品豬群300份。種公豬的抗體陽性率為100%，離散度為13%，平均值為83，表明抗體水平高且整齊度較好；后備母豬、妊娠母豬及哺乳母豬的抗體陽性率分別為100%、97%、98%，離散度分別為23%、21%、17%，平均值分別為 78、79、81，顯示抗體水平均較高且較整齊。哺乳仔豬、保育豬及肥育豬的抗體陽性率分別為67%、54%、93%，離散度分別為39%、45%、24%，平均值分別為 53、49、67，可以看出，哺乳仔豬和保育豬抗體水平的整齊度和效價均不高，肥育豬抗體水平較整齊且較高。結果詳見表1。

表1 豬瘟抗體檢測

3 小結與討論

目前，疫苗免疫接種仍是控制豬瘟的最重要手段，而豬瘟疫苗免疫抗體水平檢測是評價豬群豬瘟疫苗免疫效果的主要方法，對指導豬場制定科學的免疫程序至關重要[3]。本次檢測的豬場種豬群的抗體平均值均在78以上，抗體陽性率均達97%以上，離散度均在23%以下，顯示抗體效價較高，整齊度較好，豬瘟疫苗免疫效果較好，免疫程序合理科學。

但在商品豬群的豬瘟抗體檢測中，哺乳仔豬群首免前母源抗體陽性率達67%，抗體平均值為53，表明此時母源抗體尚維持在較高水平，而選擇此時進行豬瘟疫苗的首次免疫，疫苗中的抗原將被較高水平的母源抗體所中和，疫苗抗原刺激機體產生的免疫應答反應十分有限，導致首次免疫后豬瘟抗體水平提高緩慢，至首免后21 d的保育豬群免疫抗體效價平均值為49，離散度達45%，抗體陽性率僅為54%，顯示抗體滴度較低，整齊度較差。而二免后21 d的肥育豬群，免疫抗體陽性率達93%，抗體平均值為67，離散度為24%，顯示抗體水平較高且整齊度較好。表明該豬場首免時間應調整，應在連續監測母源抗體水平變化后進行優化，調整其免疫程序，而二免的免疫時機掌握較準確，疫苗免疫效果較理想。

因此，抗體水平檢測對調整優化免疫程序、保證疫苗免疫效果至關重要。通過此次檢測，也表明我國的豬瘟疫苗免疫效果確實，在豬瘟的防控中有不可替代的作用。按照國家《動物疫病防控中長期規劃（2012—2020年）》，豬瘟是列入凈化的病種之一，目前我國已研發出標記疫苗及配套的檢測試劑盒，豬瘟的防控和凈化又有了更為有力的工作手段。