明膠空心膠囊中鉻含量檢驗方法研究

李文云

（山東步長神州制藥有限公司，山東菏澤274039）

0 引言

明膠空心膠囊是由明膠加輔料制成的空心硬膠囊，膠囊用明膠為動物的皮、骨、腱與韌帶中膠原蛋白經適度水解后（酸法、堿法、酸堿混合法或酶法）純化得到的制品，或為上述不同明膠制品的混合物。2012年央視《每周質量報告》報道，由廢舊皮革等制成的工業明膠膠囊流入修正藥業、海外藥業等九大藥企，樣品被檢出鉻含量嚴重超標，最高鉻含量超標達90余倍，涉及13個鉻超標產品。鉻不僅會對肝臟、腎臟等器官產生危害，還會對血液系統及細胞造成破壞，導致骨骼方面的疾病，對神經系統也有影響，并有致癌隱患，甚至還會影響人的遺傳基因DNA。因此，國家食藥監局強調對于明膠空心膠囊鉻的檢驗，要求企業必須具備明膠空心膠囊鉻檢驗的能力，不能委托檢驗。企業必須保證使用的明膠空心膠囊的鉻含量合格，如所抽樣品鉻含量檢測不合格，將對其立案查處。

我司產品輔料均含有明膠空心膠囊，檢驗產品所用明膠空心膠囊中的鉻含量成為企業的一項重大任務。我司在鉻檢驗過程中，通過多次試驗，研究出了快速、準確、操作簡單的樣品消解及鉻含量檢測方法。

1 儀器與材料

1.1 儀器

FA2004N電子天平（上海精密科學儀器有限公司）；WX-8000微波消解儀（上海屹堯儀器科技發展有限公司）；DKQ-1000智能控溫電加熱器（上海屹堯儀器科技發展有限公司）；240ZAA安捷倫石墨爐原子吸收儀（安捷倫公司）。

1.2 材料

硝酸（優級純，國藥集團化學試劑有限公司）。

2 方法與結果

2.1 試驗用儀器的清洗

試驗用燒杯、容量瓶、滴定管、刻度吸管先用鹽酸溶液（濃鹽酸∶水=1∶1）浸泡1 h，后用硝酸溶液（濃硝酸∶水=1∶1）浸泡1 h，最后用超純水沖洗干凈。

原子吸收儀上的進樣杯先放入盛有10%硝酸的燒杯中超聲30 min，后用超純水沖洗干凈。

消解罐使用前先用20%的硝酸浸泡24 h，后用超純水清洗干凈、晾干，備用。

2.2 明膠空心膠囊樣品的制備

精密稱取0.3 g明膠空心膠囊（康婦炎膠囊、消乳散結膠囊、宮瘤消膠囊）分別放入0～7號消解罐內，用刻度吸管加入硝酸8 mL。另外，8、9號消解罐內直接加硝酸8 mL，作為樣品空白。

把0～9號消解罐放入100℃水浴鍋中預消解30 min。預消解后取出，0號消解罐用帶有溫度和壓力傳感器的蓋子蓋好，安裝到框架中，放入消解儀內的0號位置，并插入溫度探針和用于擰緊壓力傳感器導氣管的接頭。1～9號消解罐按上述步驟對應裝入消解儀內。

微波消解程序設置如表1所示。

對樣品進行消解，消解結束后，確認反應罐體降溫到安全溫度（≤80℃）后將安全門打開，將標準罐（1～9號消解罐）移至通風櫥內；在消解爐腔內將控制罐（0號消解罐）的導氣管接頭擰松，等壓力降到零，再將控制罐移至通風櫥內。從框架中取出套筒和內罐，打開消解罐罐蓋，用少量的超純水將消解罐罐蓋上殘留的樣品洗入消解罐內，將消解罐放入智能控溫電加熱器（設置溫度150℃）上趕酸，直至紅棕色蒸汽揮盡并剩余樣品1～2 mL時，用2%的硝酸轉移至50 mL容量瓶中，并用2%的硝酸定容，混勻，即得供試品溶液。

2.3 對照品溶液的制備

精密量取鉻單元素標準溶液50μL，加入2%的硝酸溶液稀釋成50 mL，搖勻，再精密量取8～100 mL至容量瓶中，用2%的硝酸溶液稀釋，混勻，即得含鉻80 ng/mL的對照品溶液。

2.4 石墨爐原子吸收儀的調試

開機順序：打開高純氬氣瓶的開關，打開冷卻系統的開關（溫度要求，夏天25℃、冬天20℃），打開石墨爐儀器的開關，打開計算機上的石墨爐軟件，調節氬氣壓力至0.2 MPa，按要求安上鉻元素燈。

將自動進樣器取下，把石墨爐爐體搬出，優化元素燈，調節元素燈的位置，使光通量達到最大；把石墨爐爐體放回原來的位置，調節爐體位置，保證通過的光最多；把自動進樣器放回原位置，調節自動進樣器，保證進樣針能準確到達樣品杯的中心和石墨管的中心位置。

2.5 鉻含量測定方法的建立

使用石墨爐原子吸收儀測定明膠空心膠囊中的鉻含量時，打開石墨爐工作站軟件，設定下列相應參數：

2.5.1 類型/模式

類型：Zeeman；元素：Cr；進樣模式：自動配置。

2.5.2 測量

測量模式：峰高；校正模式：濃度；讀數次數：標樣3次、樣品3次。

2.5.3 光學參數

燈電流：7.0 mA；波長：357.9 nm；狹縫：0.2 nm；扣背景：扣背景開。

2.5.4 石墨爐

石墨爐軟件程序升溫過程參數如表2所示。

2.5.5 標樣

各標樣濃度如表3所示。

有效下線濃度：0.000 0μg/L；有效上線濃度：40.000 0 μg/L；濃度小數位：2。

2.5.6 校正

曲線擬合法：新合理；曲線重校頻率：20；重置斜率頻率：20；重置斜率標樣點：2。

表1 微波消解程序設置

表2 石墨爐軟件程序升溫過程參數

表3 各標樣濃度

2.5.7 進樣器

進樣器程序參數如表4所示。

母液位置：51；制備液位置：52；母液濃度：80.000 0μg/L。

2.6 明膠空心膠囊鉻的石墨爐原子吸收進樣

在母液位置51放80μg/L標準溶液的進樣杯，在制備液位置52放2%硝酸的進樣杯，樣品杯（1～10）位置依次放0～9號消解罐內的樣品。

點開軟件上的石墨爐實用工具，對石墨爐高溫加熱進行老化兩次，點“開始”圖標開始進樣。

2.7 明膠空心膠囊的鉻結果分析

明膠空心膠囊的鉻結果分析如表5所示。

表4 進樣器程序參數

表5 明膠空心膠囊的鉻結果分析

根據2015版《中國藥典》規定，藥用膠囊中鉻的含量不得超過百萬分之二，即2 mg/kg。從表5可以看出，試驗所用3個品種的明膠空心膠囊中的鉻含量均低于2 mg/kg，符合國家規定。

3 結語

本文通過以上微波消解程序的設置，樣品消解時間大約在1 h左右，樣品不需要浸泡過夜，大幅節約了樣品處理所需的時間，同時減少了環境污染。此外，通過對石墨爐原子吸收儀硬件的優化和軟件進樣程序的研究，得到標準曲線的線性相關系數r=1.000 0，表明鉻濃度在0～80 ng/mL之間具有良好的線性關系，能準確檢測處理好的樣品鉻含量，得到相對準確的實驗結果。該測量方法操作性強，適用于明膠空心膠囊鉻元素的定量檢測。