乙肝表面抗原/梅毒聯合檢測試紙條在血液篩查中的應用研究

范錫嶺

(河南省輝縣中醫院，河南 新鄉 453600)

2010年全球乙型肝炎(簡稱“乙肝”)表面抗原陽性人數約有2.48億，已成為全球性重大公共衛生問題，其中我國所占比例為45%[1]。我國梅毒疫情在甲乙類傳染病發病中排序僅次于乙肝[2]。血液傳播是乙肝與梅毒最常見的傳播途徑，因此在獻血前對血液進行嚴格有效的篩查可以降低乙肝與梅毒的感染率。筆者通過采用乙肝表面抗原(HBsAg)/梅毒聯合檢測試紙條對血液樣本的檢測，發現可有效提高HBsAg、梅毒的檢出率，現報道如下。

1 臨床資料

選取2015年7月至2016年12月新鄉市符合《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2011)規定及獻血前采用HBsAg試紙條篩查合格的血標本20 000例。經過實驗室HBsAg-ELISA和TP-ELISA法檢測HBsAg或梅毒陽性血標本176份為研究對象(TP-ELISA和HBsAg-ELISA檢測結果OD≥0.8×Cutoff為陽性)，通過HBsAg-ELISA檢測出HBsAg陽性為62例，TP-ELISA檢測出HBsAg陽性者114例。

2 方法

2.1 試劑與儀器 ①試劑：(TP)ELISA試劑盒(海雅吉生物科技有限公司)，梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(膠體金法)(廣州健侖生物科技有限公司)；HBsAg診斷試劑盒(法國生物梅里埃和廈門英科新創)；HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條(英科新創科技有限公司)。②儀器Hamilton STAR全自動加樣器及FAME2430酶聯后處理系統(瑞士費米公司)，移液器(法國吉爾森公司)，RaytoRT-6100酶標分析儀(深圳雷杜生命科學股份有限公司)。

2.2 檢測方法 ①采用抗TP酶聯免疫診斷試劑盒與HBsAg酶聯診斷試劑盒分別檢測血標本中抗TP和HBsAg。②采用HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)，對實驗室抗TP-ELISA法結果陽性血漿標本進行檢測。③采用HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條和HBsAg金標試劑檢測實驗室ELISA法HBsAg陽性的血漿標本。④TP-ELISA與HBsAg-ELISA檢測結果為陽性血漿標本，各取20份并按1∶1混合，分別采用HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條與HBsAg試紙條對其進行檢測。以上實驗條件為：加樣量60 μL，觀察時間10 min，反應溫度15℃。

2.3 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件進行統計分析，計數資料以百分率(%)表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

3 結果

(1)HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)結果比較 TPPA陽性率為90.35%(103/114)，HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條陽性率為87.72%(100/114)，兩者陽性率差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 114例患者HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗結果比較(例)

(2)HBsAg金標試劑檢測和HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條檢測結果比較 HBsAg金標試劑檢測陽性率為82.25%(51/62)，HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條陽性率80.65%(50/62)，兩者陽性率差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 62例患者HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條和HBsAg金標試劑檢測結果比較(例)

(3)HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條對混合血液樣本檢測結果比較 采用HBsAg/梅毒聯合檢測試紙條對20份單一抗-TP陽性與單一HBsAg陽性兩者的混合血液樣本進行檢測，試紙條上出現2條相應檢測線的陽性反應；采用HBsAg金標試紙條對混合血樣標本進行檢測，試紙條上僅出現1條相應檢測線的陽性反應。

4 討論

乙肝是我國最常見的傳染性疾病之一，我國HBsAg陽性患者占全國人口的10%以上。在乙肝患者體液中均可以檢出HBsAg，尤其血液檢出率較高[3]。乙肝不僅具有較強的傳染性，并且可能發展成肝硬化、肝癌，嚴重威脅人們的生命安全。梅毒是由蒼白密螺旋體蒼白亞種感染人體后引起的系統性、慢性傳染性疾病，可以引起機體多系統、多臟器的損害，威脅生命[4]。近年來，我國梅毒感染率逐年上升，與乙肝并列成為血液及性傳播的主要疾病。隨著醫學的發展，血液制品在臨床中應用逐漸廣泛，成為重要的醫療手段之一，同時用血安全問題也越來越受到人們的關注[5]，尤其是經血液傳播的傳染性疾病。在采集血液前進行嚴格的篩查是降低、阻斷乙肝和梅毒傳播的關鍵環節。

江素君等[6]采用單一HBsAg試紙條在獻血前進行初篩，不合格率為0.49%；對于TP初篩不合格獻血者采取隱私保密措施，動員其采集樣本。TPPA是目前檢驗科進行梅毒檢測的金標準[7]，HBsAg金標試劑檢測是檢驗科檢測HBsAg的主要手段，但由于TPPA與HBsAg金標試劑操作流程繁瑣復雜，僅用于實驗室檢測。本研究中收集的20 000例血液標本均符合獻血者健康要求及獻血前采用HBsAg試紙條篩查合格，通過HBsAg-ELISA檢測出HBsAg陽性為62例，TP-ELISA檢測出HBsAg陽性者114例。筆者通過對176份ELISA陽性血液樣本進行HBsAg/TP聯合檢測試劑條、TPPA、HBsAg金標試劑平行檢測分析，發現HBsAg/梅毒聯合檢測試劑條對HBsAg、梅毒的檢出陽性率分別與HBsAg金標試劑檢測結果相同。同時，HBsAg/梅毒聯合檢測試劑條能夠準確檢測出混合血液中的陽性反應。因此，HBsAg/梅毒聯合檢測試劑條不僅可以準確有效地檢出梅毒陽性、HBsAg血液標本，并且操作方便簡單，可用于獻血前的血液篩查。