藥品微生物檢測中均質器的應用探討

王閆

摘 要：隨著我國現代社會經濟發展水平的不斷提高，人們越來越注重個人健康，這也就意味著我國的醫療設備、技術、人才、藥品等都會面臨巨大的挑戰。藥品的安全性也就成為了患者是否能夠獲得生命安全的重要影響因素。藥品微生物檢測結果的可靠性和準確性對臨床醫學的發展產生了一定的影響，在藥品微生物檢測中會有多種方式，本文將重點對使用均質器進行檢測作相應的探究。

關鍵詞：均質器；微生物檢測；供試液制備

一、藥品微生物使用均質器檢測的事前準備

（一）準備實驗儀器

拍擊式均質器（西班牙IUL）；旋刀式均質器；

（二）準備所用到的菌株

有中國食品檢定研究院提供的第三代菌種，分別是金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉。

（三）培養基

由美國BD公司提供的胰酪大豆胨瓊脂、沙式葡萄糖瓊脂。

（四）試藥

稀釋劑為PH值為7.0的氯化鈉-蛋白胨緩沖液。

二、藥品微生物使用均質器檢測的具體操作步驟和實驗結果的獲取

（一）配制所需要的菌液

按照《中國藥典》中附錄中所說的微生物限度的檢查法規定的試菌液制備方法，開始制備所需要的菌液。首先將金黃色的葡萄球菌、大腸埃希菌制成每1ml約含50-100cfu的菌懸液；其次將白色念珠菌制成每1ml約含50-100cfu的菌懸液；最后將黑曲霉制成每1ml約含50-100cfu的孢子懸液，完成菌液的制作。

（二）制造所需的供試液

在10g試品中加入100ml的PH值為7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的均質袋中，將其拍擊成1：10的供試品溶液I，完成拍擊式均質器的制備。然后同樣在10g供試品中加入100ml的PH值為7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，制成供試品溶液Ⅱ，完成旋刀式均質器的制備。

（三）進行實驗

按照《中國藥典》中的一部分附錄中所說的微生物限度檢查法規定方法對供試品的細菌數、霉菌、酵母菌的數量進行檢測。每株試驗菌的每種培養基至少制備兩個平皿，最終的技術結果可以通過求其數值的算術平均數得到。將1ml的供試液放在90mm的無菌平皿中，并在其中注入15～20ml溫度低于45℃的融化的胰酪大豆胨瓊脂和沙式葡萄糖瓊脂培養基混合均勻、待其凝固、將其倒置按規定的條件培養并記錄數據。

（四）看不同組中微生物的回收率

按照《中國藥典》后的增補本第二公示稿非無菌產品需要氧菌檢查菌回收率方法將活菌進行回收率試驗。在此要注意的是：加入的菌液的體積不能夠超過供試液體積的1%。將上述實驗中所用的供試液取出，用稀釋之后的溶液代替菌液同試驗組操作，完成對供試品的對照。然后再將稀釋后的液體代替供試液，按照實驗組中所論述的步驟加入試驗菌液并完成對微生物的回收試驗。試驗組以法測定，同時測定供試品對照組及菌液對照組菌數做好相應的記錄，然后根據所記錄的數據求出各個試驗組的平均菌落數及其回收率。

三、藥品微生物使用均質器檢測后對實驗結果的對比

取40批的樣品，按照上述實驗制備供試品溶液，依法檢驗。制定兩種方法檢驗結果的對比表，然后對樣品檢驗的結果進行統計學的處理并作相關記錄。

四、分析如何選擇相應的均質器去檢測

（一）簡單分析旋刀式均質器和拍擊式均質器

我們對9批供試品進行加樣回收率的試驗時，根據上述試驗中的相關數據我們可以得到：旋刀式均質器對細菌的回收率要比拍擊式均質器的回收率稍稍高出一些，兩種均質器的檢出率分別是87.5%-100%、77.5%-100%；旋刀式均質器對真菌的回收率是81.6%-98.3%而拍擊式均質器對真菌的回收率為83.3%-102%，相較之下旋刀式均質器要比拍擊式均質器稍微低一些。

（二）對檢測結果的簡單分析

我們對40批藥品用拍擊式均質器和旋刀式均質器進行微生物檢測結果利用統計學進行分析時，可以得出通過兩種方法處理所得到的霉菌及酵母菌和菌落總數的相關系數分別是0.998和1.000，后經過配對t檢驗p值是我們得到的數據是：霉菌數為0.324，大于0.05，由這兩數據我們可以得知兩種方法差距不大。菌落總數的P值為0.035說明兩種的方法的檢測方法也是有差別的。綜上所述，我們可以得到在微生物檢測中，我們必須要根據樣品的特性選擇適宜的均質器來進行樣品的試前處理。

（三）對蜜丸的微生物檢驗的分析

蜜丸的粘性較大，用拍擊式均質器可以使蜜丸逐漸分散在稀釋液當中，形成較為均勻的供試液，而使用旋刀式均質器的時候蜜丸很容易粘在刀片上，不易均質，如槐角丸、明目地黃丸，根據測出的數據也可以得出旋刀式均質器檢出率較低。

（四）對水丸的微生物檢驗的分析

水丸的硬度相對較大，用拍擊式均質器時，易損壞均質袋，而旋刀式均質器能夠快速將水丸均勻的打碎，由此可見在水丸的微生物檢驗時我們需要用旋刀式均質器。

（五）對膠囊劑的微生物檢驗的分析

在進行膠囊試劑的檢測時需要先加入45℃左右的稀釋劑軟化膠囊使膠囊殼溶解之后再使用相應的均質器。

（六）對顆粒劑以及混合劑檢驗分析

顆粒是比較容易溶解的均質，兩種均質器不會有太大的差別，所以使用兩種其中的任一均質器都可以達到混合均勻的效果。

（七）對上述選擇均質器作相應的總結

在進行微生物檢驗使用均質器設備供試液的時候，必須先對藥品進行分析和歸類，選用合適的均質器，這樣才能提高微生物的檢出率，確保實驗結果的準確性。

總結：本文通過講述用兩種不同均質器進行的藥品污染微生物回收率的試驗，得到不同劑型的藥品細菌的回收率有明顯的差距的結果，因此在使用均質器的之前我們首先要分析一下藥品的劑型然后再選擇合適的均質器進行實驗，否則會導致實驗結果出現誤差，從而影響我國的臨床醫學的發展，甚至會導致患者的生命安全受到威脅，這與中國現階段所講的要實現全面小康，就先實現全面健康不相符，所以我們需要更加注重試驗的可考察性。

參考文獻

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（作者單位：天津藥物研究院藥業有限責任公司）