原子吸收分光光度法分析注射用頭孢替安中鈉的含量

楊紅濤，陳真文，肖中元，彭亦新，周　玲

(1.太極集團(tuán)西南藥業(yè)股份有限公司,重慶　400038；2.陸軍軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院藥劑科,重慶　400038)

鹽酸頭孢替安是日本武田公司首先研發(fā)上市的第二代頭孢類抗生素[1]。該藥具有光譜而強(qiáng)力的抗菌活性，臨床療效顯著，安全性較好。其制劑主要是注射用鹽酸頭孢替安，由于鹽酸頭孢替安的水溶性并不是很好，因此在制劑中加入了一定量的碳酸鈉來該善其水溶性。碳酸鈉的量對(duì)于臨床應(yīng)用較為重要：如果太低，不利于樣品的溶解；如果太高，在溶解時(shí)，其產(chǎn)生的二氧化碳會(huì)沖破容器，不利于臨床操作。因此，測(cè)定樣品中的碳酸鈉含量意義重大。本文采用原子吸收分光光度法(火焰法)進(jìn)行測(cè)定，對(duì)其中影響結(jié)果的因素進(jìn)行了分析，對(duì)方法學(xué)進(jìn)行了研究。

1　材料與方法

1.1　主要儀器與試劑

原子吸收分光光度計(jì)(TAS-990、北京普析通用儀器有限公司)，真空恒溫干燥器(HZK60、重慶永生儀器有限公司)，注射用頭孢替安樣品(西南藥業(yè)股份有限公司)，NaCl，KCl均為基準(zhǔn)級(jí)。

1.2　實(shí)驗(yàn)方法

氯化鉀溶液的制備 稱取氯化鉀19.07g，加水溶解并稀釋至1000mL。

對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)105℃干燥2h的氯化鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1mL中約含14μg的溶液。精密量取此溶液10mL，置100mL量瓶中，精密加入氯化鉀溶液10mL，加水稀釋至刻度，搖勻。

供試品溶液的制備 精密稱取本品適量，加水溶解并稀釋制成每1mL中約含碳酸鈉12.5μg的溶液。精密量取此溶液10mL，置100mL量瓶中，精密加入氯化鉀溶液10mL，加水稀釋至刻度，搖勻。

空白溶液的制備 精密量取氯化鉀溶液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。測(cè)定法 測(cè)定對(duì)照品溶液和供試品溶液的吸光度，用空白溶液作空白。

原子吸收分光光度發(fā)條件 火焰離子化器，燈電流：12mA，檢測(cè)器波長(zhǎng)：589.0nm，狹縫0.2nm，空氣流量：5.0L /min ，乙炔氣流量：1.8L/min。

1.2.1水對(duì)測(cè)定的影響

按上述方法，分別用自來水、純水、超純水配制空白溶液，測(cè)定其吸光值。

1.2.2氯化鉀對(duì)測(cè)定的影響

分別用化學(xué)純、分析純、基準(zhǔn)級(jí)的氯化鉀配制氯化鉀溶液；按上述方法，用基準(zhǔn)級(jí)的氯化鈉配制對(duì)照品溶液，并測(cè)定其吸光值。

1.2.3氯化鈉對(duì)測(cè)定的影響

用基準(zhǔn)級(jí)的氯化鉀配制溶液；分別用化學(xué)純、分析純、基準(zhǔn)級(jí)的氯化鈉配制對(duì)照品溶液，并測(cè)定其吸光值。

1.2.4方法學(xué)研究

1.2.4.1線性

精密稱取105℃干燥2h的氯化鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1mL約含14μg的溶液，精密量取此溶液6,7,8,9,10,11,12mL,置100mL容量瓶中，精密加入氯化鉀溶液10mL，加水稀釋至刻度，搖勻，作為系列濃度的對(duì)照品溶液.照原子吸收分光光度法在589.0nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以氯化鈉的濃度(c)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程。

1.2.4.2準(zhǔn)確度

精密稱取已知含量的樣品適量(約相當(dāng)于碳酸鈉12.5μg)9份，分別置100mL量瓶中，分別加入氯化鈉儲(chǔ)備液3.2,4.93,6.8mL，各濃度3份，加入氯化鉀溶液10mL，用水稀釋至刻度。(按照處方分別配置含碳酸鈉為標(biāo)示量80%、100%、120%的3種不同濃度的供試品溶液，按照擬定方法測(cè)定供試品溶液中的碳酸鈉含量，每個(gè)濃度測(cè)定3次)，計(jì)算回收率。

1.2.4.3重復(fù)性

取樣品6瓶，在裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，精密稱取頭孢替安樣品6份。由一個(gè)分析人員，同一天內(nèi)采用擬定方法連續(xù)測(cè)定樣品中碳酸鈉含量，計(jì)算平均含量及RSD。

1.2.4.4檢出限

取空白溶液連續(xù)測(cè)定11次，按公式計(jì)算出檢出限D(zhuǎn)Lq=kσ/Sq，式中；K為置信因子(通常取3)；σ為測(cè)定精密度(標(biāo)準(zhǔn)偏差)；Sq為以絕對(duì)量為單位的靈敏度(即標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率)。

1.2.4.5供試品溶液穩(wěn)定性

為了考察供試品溶液在測(cè)定過程中的穩(wěn)定性，試驗(yàn)中，稱取樣品適量，分別于0，2，4，6，8，10h取樣，按擬定標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定樣品中碳酸鈉含量，計(jì)算平均含量及RSD。

2　結(jié)果

2.1　水對(duì)結(jié)果的影響

表1　不同水的吸收值

2.2　氯化鈉、氯化鉀對(duì)結(jié)果的影響

表2　不同氯化鉀的吸收值

表3　不同氯化鈉的吸收值

2.3　方法學(xué)研究結(jié)果

2.3.1線性結(jié)果

具體結(jié)果見表4。

表4　對(duì)照溶液線性

表4結(jié)果表明鈉離子檢測(cè)濃度在0.34～0.68μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3.2準(zhǔn)確度結(jié)果

平均回收率為100.29%，RSD為0.58%。詳細(xì)試驗(yàn)結(jié)果見表5。

表5　回收率試驗(yàn)結(jié)果

表5結(jié)果說明該方法準(zhǔn)確度符合含量測(cè)定要求，可用于產(chǎn)品中碳酸鈉的含量測(cè)定。

2.3.3重復(fù)性

結(jié)果見表6。

表6　碳酸鈉測(cè)定方法重復(fù)性

表6結(jié)果表明：該方法測(cè)定6份樣品平均含量為16.41%，RSD為1.165%，說明有良好的重復(fù)性，本方法具有良好的日內(nèi)精密度。

2.3.4檢出限

取空白溶液連續(xù)測(cè)定11次，按公式計(jì)算出檢出限D(zhuǎn)Lq=kσ/Sq，結(jié)果檢出限為0.0237μg/mL。

2.3.5供試品溶液穩(wěn)定性結(jié)果

具體結(jié)果見表7。

表7　溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

表7結(jié)果顯示，供試品溶液在10h內(nèi)RSD為0.56%，碳酸鈉含量基本無變化，表明供試品溶液的鈉離子在10h內(nèi)穩(wěn)定，頭孢替安隨時(shí)間的變化對(duì)鈉離子的含量無影響。

3　討論

從光源發(fā)出的待測(cè)元素的特征輻射時(shí)，基態(tài)原子吸收能從輻射中吸收能量，產(chǎn)生共振吸收，從而產(chǎn)生吸收光譜，原子吸收分析就是利用上述原理，使用最強(qiáng)吸收線作為分析線[2]。由于不同來源的物質(zhì)，其含的雜質(zhì)不一致，這些雜質(zhì)中的基態(tài)原子也不一致，會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的不一致。比如自來水和純水中含有的大量的鈉離子，若用其作空白對(duì)照，會(huì)掩蓋樣品本身的鈉離子而使結(jié)果不準(zhǔn)確。化學(xué)純和分析純的氯化鈉和氯化鉀，由于其含有大量的其他金屬離子或不穩(wěn)定的基態(tài)原子，因此會(huì)造成檢檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

4　結(jié)論

采用原子吸收分光光度法分析注射用鹽酸頭孢替安樣品中鈉的含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，回收率高，用該方法可控制樣品中的碳酸鈉含量，從而保證臨床用藥的安全。