MUM1/IRF4聯合β2微球蛋白檢測與外周T細胞淋巴瘤預后的相關性研究

張琳 ，夏建勝 ，韓方征 ，董巧鳳

1.泰山醫學院，山東泰安 271000；2.菏澤市立醫院，山東菏澤 274000

外周T細胞淋巴瘤是一組罕見且具有異質性的臨床侵襲性疾病，預后不良[1]。在歐美國家中PTCL約占非霍奇金淋巴瘤（NHL）的10%，而在亞洲國家這一比例達到了20%～35%，且常發生于青壯年男性[2]，治療反應差異大，治療效果總體較差，使其逐漸得到更多的重視。1993年制定的侵襲性非霍奇金淋巴瘤的國際預后指數（IPI）評分被用來指導NHL的分層治療、判斷預后轉歸已超過20年[3]。但IPI主要對彌漫大B細胞性淋巴瘤有較好的預測價值，由于PTCL異質性較強，相同IPI評分的淋巴瘤患者其生存狀態也不盡相同[2]。因此，尋找準確識別PTCL預后的指標成為學界關注的熱點。隨著研究的進展，某些蛋白分子水平標志對PTCL預后的價值已初步顯現。很多文獻[4-5]報道多發性骨髓瘤癌基因-1/干擾素調節因子-4（MUM1/IRF4）的表達與B細胞淋巴瘤和多發性骨髓瘤的侵襲性有關，但它的表達與PTCL預后的關系研究較少，此外，國內外有研究表明血清β2-微球蛋白（β2-MG）水平與NHL患者預后有一定的關系，但這些研究對象多限于B細胞淋巴瘤[6-7]，鮮見血清β2-MG與PTCL預后的專項報道[8-9]。該研究探討2007年1月—2016年12月菏澤市立醫院79例PTCL患者標本中MUMl/IRF4與β2-MG的表達，尤其是MUMl/IRF4與β2-MG同時表達，并分析其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

調取菏澤市立醫院病理科外周T細胞淋巴瘤石蠟包埋標本79例，所有標本均依次經過10%福爾馬林固定、常規脫水、石蠟包埋切片、HE染色，經兩名病理科主任醫師獨立進行病理學確診，并按照WHO（2008年）血液和淋巴系統腫瘤分類進行病理分型。其中結外NK/T細胞淋巴瘤 (ENKL)共32例為40.5%，血管免疫母細胞T細胞淋巴瘤(AITL)共10例為12.7%，外周T細胞淋巴瘤NOS(PTCL-NOS)共18例為22.8%，間變大細胞淋巴瘤 (ALCL)共6例為7.6%，成人T細胞白血病/淋巴瘤 (ATLL)共5例為6.3%，腸病相關性T細胞淋巴瘤(EATCL)共5例為6.3%，肝脾T細胞淋巴瘤(HSTCL)共 2例為 2.5%，皮下脂膜炎樣T淋巴瘤(SPTCL)共1例為1.3%

1.2 實驗試劑

MUMl/IRF4單克隆抗體購自北京中杉金橋生物公司產品，β2微球蛋白所用試劑盒由天津九鼎醫學生物工程有限公司提供。

1.3 檢測方法

MUMl/IRF4的測定應用免疫組織化學EnVision二步法，血清β2微球蛋白的測定采用放射免疫分析法，操作方法均按其說明書進行。

1.4 結果判斷

MUMl/IRF4所有染色標本均為由單一病理學家獨立審查，他們均不了解患者的臨床信息。①陰性：無腫瘤細胞顯色或顯色數＜30%；②陽性：腫瘤細胞顯色數≥30%。測定β2微球蛋白的靈敏度為0.15 mg／L，在該研究中超過3 mg/L時為陽性。

1.5 療效評價

近期療效評價采用WHO實體瘤療效評價標準分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩定(SD)和進展(PD)。以CR＋PR定義為有效，以SD＋PD定義為無效。總生存時間（OS）為自確診后至死于任何疾病時間或末次隨訪時間。

1.6 隨訪

隨訪方式包括查閱病歷和電話等，末次隨訪時間為 2017年6月，79例PTCL病例中66例有完整的生存和隨訪資料，其中13例失訪。

1.7 統計方法

采用SPSS 18.0統計學軟件行Kaplan-Meier法計算生存率，Log-rank法單因素預后分析，百分數的比較用χ2檢驗及Fisher精確檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MUM1/IRF4在各型PTCL中陽性結果及病理圖片

79例PTCL患者中，MUM1/IRF4表達的陽性率為64.6%（51/79）。其中ALCL陽性率最高為83.0%（5/6），AITL共 7例為 70.0%，ENKL共 22例為 68.0%，PTCL-NOS共12例為67.0%，ATLL共2例為40.0%，EATCL共2例為40.0%，HSTCL共1例為50.0%。見圖1。

圖1 MUM1/IRF4在PTCL中的陽性表達與對照（×400）

2.2 MUM1/IRF4和β2-MG在PTCL患者中的表達及其與臨床資料的相關性

51例MUM1/IRF4陽性表達的PTCL患者中42例同時表達β2-MG，占其總數的82.3%。將患者按年齡、行為狀態、Ann Arbor分期、結外受侵部位數目、LDH高低以及IPI評分分組，結果顯示MUM1/IRF4與β2-MG同時表達與Ann Arbor分期、結外受侵部位數目、LDH 高低以及 IPI評分相關（P＜0.05），而與年齡、行為狀態評分無關，見表1。

表1 MUM1/IRF表達和β2-MG同時表達與PTCL臨床資料的相關性

2.3 MUM1／IRF4蛋白及β2MG的表達與近期療效關系

79例中66例患者可獲得治療信息，66例患者均接受了不少于2次CHOP方案進行化療，其中CR18例，PR21例，SD15例，PD12例，CR 率為 27.3%，有效（CR＋PR）(RR)率為 59.0%。MUMl/IRF4陽性表達者治療有效率為50.0%(23/46)；MUMl/IRF4陰性表達者治療有效率80.0%(16/20)，兩者比較差異有統計學意義(χ2=5.190，P=0.023，P＜0.05)。 β2微球蛋白陽性表達者治療有效率為44.4%(20/45)；β2微球蛋白陰性表達者治 療 有 效 率 90.5%(19/21)(χ2=12.551，P=0.000)。MUM1＋/β2-MG＋、MUM1-/β2-MG＋、MUM1＋/β2-MG-、MUM1-/β2-MG-表達的有效率分別為42.1%、57.1%、87.5%、92.3%（χ2=13.344，P=0.003）， 各組間差異有統計學意義，見表2。

表2 MUM1/IRF4蛋白及β2MG的表達與近期療效的關系

2.4 MUM1／IRF4蛋白及β2微球蛋白表達與遠期生存關系

79例患者中66例可進行生存分析，患者隨訪2～33個月，中位隨訪時間18個月，66例中，死亡33例，其余33例仍在隨訪中。全組中位OS為16個月(95%CI：12～20 個 月)， 中 位 數 OS Mum1/IRF4 陰 性 和Mum1/IRF4 陽性組為 20和 13個月（P=0.000）(圖 2)。進一步比較MUM1＋/β2-MG＋中位數OS為 13個月，MUM1＋/β2-MG-中位數 OS 為 15 個月，MUM1-/β2-MG＋中位數 OS 為 18 個月，MUM1-/β2-MG-中位數OS為20個月，按照Log Rank檢驗的結果，當MUM1/IRF4和β2-MG同時表達時生存率最低，而MUM1/IRF4和β2-MG同時陰性時，與其他組相比較顯示出較高的生存率（OS,P=0.000）（圖 3）。

圖2 MUM1/IRF4蛋白不同表達PTCL患者OS的生存曲線

圖3 MUM1、β2-MG分別表達及共表達PTCL患者OS的生存曲線

3 討論

PTCL是一組異質性腫瘤，診斷時多為晚期，通常具有更強的臨床侵襲性，預后不良，許多學者都從各方面積極尋找能提示預后的因素。Gallamini等[10]的一項前期研究基于4個簡單的臨床變量：年齡，ECOG評分，LDH水平和BMI，提出了一種新的PTCL-NOS預后模型，稱為PIT。然而，這種模型對PTCL的預后價值尚待進一步研究。T細胞淋巴瘤在國內NHL的比例又高于國外。目前，國內也有許多研究探討其預后因素，結果不盡相同。

Mum1/IRF4是干擾素調節因子IRF家族中的一員，通過一系列信號轉導作用參與免疫調控，介導淋系、髓系及樹突細胞(DC)等免疫相關細胞的發育和分化。它的癌基因功能最先在多發性骨髓瘤中被識別，又被稱為多發性骨髓瘤癌基因1[11]，并且是活化的B細胞如彌漫性大B細胞淋巴瘤的生物標志物[12]，在腫瘤的發生發展中發揮著重要作用[4]。該研究通過MUM1/IRF4在各類PTCL中陽性表達的結果表明，在所有患者中，MUM1/IRF4陽性表達者51例（64.6%），存在高表達性，這與孫妍等[11]的研究結果一致。在該研究中，MUMl/IRF4陽性表達者治療有效率為50.0%，MUMl/IRF4陰性表達者治療有效率80.0%（P＜0.05），推測MUMl/IRF4可能參與PTCL的發病過程，MUMl/IRF4高表達可能與PTCL預后不良有關。成人T細胞白血病/淋巴瘤在各類PTCL中的MUMl/IRF4表達率最低為40.0%，由此推測MUMl/IRF4在T淋巴細胞的活化中也起到重要作用。MUMl/IRF4蛋白抑制劑有可能成為PTCL新的治療靶點。

已有很多研究證明血清β2-MG水平與大多數類型NHL的預后相關，主要包括慢性淋巴細胞性白血病、濾泡性淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、和彌漫性大細胞淋巴瘤[6,7,13]。有觀察表明血清β2-MG高水平與腫瘤負荷相關[7,8,14]，也有研究表明，血清β2-MG高水平對預后的影響有限[15]。該研究中，β2-MG陽性表達者治療有效率為44.4%，β2-MG陰性表達者治療有效率90.5%，兩者比較差異有統計學意義(P＜0.05)。說明血清β2-MG高水平在PTCL中亦提示不良預后。

但對于血清β2-MG水平和MUM1/IRF4蛋白聯合表達對PTCL的研究目前尚未有人報道。該研究通過比較 MUM1/IRF4＋和 MUM1/IRF4-，MUM1＋/β2-MG＋和 MUM1-/β2-MG＋、MUM1＋/β2-MG-、MUM1-/β2-MG-組的治療有效率、中位數OS、Kaplan-Meier生存分析均顯示MUM1／IRF4、β2-MG蛋白表達的不良預后價值，證明了其表達對外周T細胞淋巴瘤預后的負面作用，反映了腫瘤多基因異常導致的更為不良的疾病后果。

這是一項回顧性研究，盡管僅從已被證實為PTCL患者的石蠟包塊的中選擇病例，但我們的研究仍表明MUM1/IRF4、β2-MG蛋白聯合表達的不良預后價值，證明了其表達對外周T細胞淋巴瘤疾病預后的負面作用，有助于臨床工作中更精確判斷PTCL的預后，制定更合理的治療方案。此后將以前瞻性的設計，在多中心、大樣本的前提下進行臨床相關性研究，獲得更加穩定、客觀的數據，指導外周T細胞淋巴瘤預后的判斷及分層精準治療。

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