農殘速測技術在農產品質量安全檢測中的應用

高婭芳

摘 要：為保障農產品質量安全，控制農殘較高的水果、蔬菜等農產品進入市場是確保農產品質量安全的重要工作。本論文結合2017年大麥地鎮農產品質量安全檢測操作的相關步驟，系統介紹農殘速測技術在農產品質量安全檢測中的應用，簡要分析了檢測操作步驟中應該注意的問題和避免措施作。

關鍵詞：農藥殘留；快速檢測；農產品質量安全

一、 農藥殘留的原因與危害

農藥殘留是指在農業生產中施用農藥后一部分農藥直接或間接殘存于谷物、蔬菜、果品、畜產品、水產品中以及土壤和水體中的現象。

1.農藥殘留的危害

農藥是把“雙刃劍”，對促進農業增產有極其重要的作用。但由于農藥本身固有的化學屬性和對其使用不當，導致農產品農藥殘留嚴重超標，嚴重危害到廣大人民群眾的身體健康。

2.農藥殘留的原因

在我國農藥中，70%為有機磷農藥，而在我國生產使用的有機磷農藥中，70%為劇毒、高毒類，如果用于生長期較短，連續采收的蔬菜，很難避免因殘留量超標而導致人畜中毒，雖然很多高度農藥是禁止在蔬菜作物上使用的，但仍然存在諸多因素。

一是農戶農產品安全意識淡薄，農產品不按規定使用藥量、次數、方法或安全間隔期施藥，或施用不允許在蔬菜上使用的劇毒、高毒農藥；二是農藥殘留監管單位宣傳指導不到位，導致農殘質量超標的后果認識不足。三是現在標準施行的農藥殘留測定需要通過有機溶劑提取、凈化和用大型分析儀器進行，無法對廉價的蔬菜進行隨時隨地或快速檢測而形成的監管不到位。四是消費者對農產品的安全意識差等一系列原因，導致很多農產品中毒事件的發生。

為保證人們吃上安全放心的蔬菜，保障人民身體健康，加強對農藥殘留的快速檢測已成為十分必要的監管措施。因此，蔬菜農藥殘留快速檢測越來越普遍地被各大農產品檢測機構所采用。

二、農產品質量安全檢測

農藥殘留檢測是農產品質量安全檢測的主要工作，主要的檢測方法有兩種：色譜檢測法和速測儀器法。

1.色譜檢測法

色譜檢測法用作農殘定量分析，可為農藥殘留執法提供依據。優點：靈敏度高、準確、定性定量；缺點：成本高、操作復雜、時間較長。

2.速測法

速測法只能作為農殘定性分析，易于在基層推廣等特點，是目前我國控制高毒農藥殘留的一種有效方法，也是目前國內和我省應用最為廣泛的農藥殘留快速檢測方法。

速測法的主要優點：一是該方法具有快速方便、前處理簡單、成本較低等優點，適用于現場定性測定，特別適合在蔬菜生產基地、批發市場及農產品檢測部門開展快速檢測工作。二是該方法可對有農藥殘留的蔬菜進行粗篩，將一部分農藥殘留含量較高的蔬菜控制在市場之外，避免因農藥殘留發生中毒事件。速測儀的檢測方法又分：速測卡法（紙片法）和酶抑制率法（分光光度法）。

兩種快速檢測方法的技術原理：根據有機磷和氨基甲酸酯類農藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中的乙酰膽堿酯酶的活性造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累，影響正常傳導，導致昆蟲中毒致死的原理而設計。如果蔬菜中不含有機磷和氨基甲酸酯類農藥，乙酰膽堿酯酶水解后，水解產物可與顯色劑反應產生顏色；如果蔬菜中含可以抑制乙酰膽堿酯酶的活性的有機磷和氨基甲酸酯類農藥，這種酶就不能被水解，從而無顯色反應。在溶液中加入乙酰膽堿酯酶和顯色劑，用此判斷有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留是否存在。該方法僅對含有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的蔬菜進行粗篩，對其他農藥的檢測無作用，檢測結果僅起監督作用。

計算公式計算：

抑制率（%）=[（△Ao-△Ai）/△Ao]×100

式中：△Ao---對照溶液反應1min吸光度的變化值；

△Ai---樣品溶液反應1min吸光度的變化值；

下面我主要分析一下酶抑制率法（分光光度法）的操作方法及注意事項。

三、酶抑制率法（分光光度法）技術

1.試劑的配制

（1）緩沖液。將緩沖液試劑袋中的試劑倒出，溶于500ml蒸餾水中，溶解，混合即可。

（2）底物。往標注于底物的瓶中加入13ml蒸餾水，2～4°C環境條件下，冷藏保存。

（3）顯色劑。無需配置放入冰箱冷藏（2～4°C）切勿冷凍結冰。

（4）酶試劑。酶試劑已配置成溶液可以直接使用。需放入冰箱冷藏（2～4°C）切勿冷凍結冰。

2.檢測時用到的儀器

燒杯（50ml、500ml）、量筒（500ml）、電子天平、玻璃棒、細口試劑瓶 、移液器、移液吸頭、試管、試管架、三角燒瓶、稱量瓶、試管刷、膠頭滴管、塑料洗瓶、塑料瓶小瓶、比色皿、農藥殘留檢測儀。

3.檢測操作步驟分析

（1）樣品前處理。

①植株：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品2g，放入三角瓶中，加入10mL緩沖溶液，振蕩1～2min，倒出提取液，靜置3～5min，待用。

②茶葉：稱取0.5g茶葉樣品，加入5ml丙酮，振蕩提取5min，取0.2ml上述丙酮溶液，40～50°C水浴蒸干，加入2.5ml緩沖溶液，振蕩2min。

（2）對照溶液測試。

先于試管中加入100ul酶液，再加入2.5mL緩沖溶液、100ul顯色劑，搖勻后于35℃放置15min以上（每批樣品的控制時間應一致）。加入100ul底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，應立即放入儀器比色池中，記錄反應1min的吸光度變化值△Ao。對照值應為0.15—0.3為對照標準值。

（3）樣品溶液測試。

先于試管中加入100ul酶液， 2.5mL樣品提取液，再加入100ul顯色劑，搖勻后于35℃放置15min以上（每個樣品的控制時間應一致）。加入100ul底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，應立即放入儀器比色皿中，記錄反應1min的吸光度變化值△Ai。

結果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。當樣品抑制率在40～50%之間為可疑農殘超標樣品；當抑制率≥50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥存在，樣品為陽性結果。陽性結果的樣品需要重復檢驗2次以上，對陽性結果的樣品，建議用氣相色譜等儀器分析法進一步確認。

4.酶抑制率法注意事項

（1）蔬菜農藥殘留快速檢測方法。適用于葉菜類、果菜類、豆菜類、瓜菜類、根菜類 （ 除胡蘿卜、茭白等 ） 中甲胺磷、氧化樂果、對硫磷、甲拌磷、久效磷、倍硫磷、殺撲磷、敵敵畏、克百威、涕滅威、滅多威、抗蚜威、丁硫克百威、甲萘威、丙硫克百威、速滅威、殘殺威、異丙威等農藥殘留的快速檢測。蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質，容易產生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。

生菜、小白菜、豆角、芹菜等為必檢項目，因為這幾類蔬菜或容易殘留農藥， 或使用農藥次數多、密度大。

（2）酶液和顯色劑多少的影響。酶液和顯色劑不能漏加或多加。每個樣品中的試劑應保持一致，才能保證測出數值的準確性。

（3）待測樣品放入分光光度計速度的影響。待測樣品加入底物后，應馬上搖勻，放入測定儀，否則影響數據準確性。

（4）比色皿的透光度影響。注意不要用手觸摸比色皿的光面，要拿毛面，面對準光路。比色皿中的液體要超過 2/3 ，且不得溢出，要保持光面外側的潔凈，使比色皿有好的透光度是減少檢測誤差的必要條件。比色皿可定期用乙醇進行清洗。

（5）微量移液器的影響。微量移液器要專用，貼上標簽，避免交叉使用造成試劑污染；試劑從試劑瓶吸出后，不能再放回瓶中，堅持只吸不進的原則，防止試劑污染。

（6）藥品配制和部分儀器最后的沖洗過程。一定要用蒸餾水、純凈水或去離子水，不可使用礦物質水，否則在測量過程中干擾較大，影響準確性。

四、農藥殘留快速檢測中易出現的問題及解決措施

蔬菜農藥殘留快速檢測技術對生化反應條件要求嚴格，在操作過程中常會出現一些問題，為了減少失誤，提高檢測結果的可信度，應采取相應的措施加以避免。

1.同批次蔬菜檢測結果重現性不同

由于該方法為快速檢測，是粗測，所以每次檢測過程中使用的定量加液器的加液量及取樣量有差異，加上操作方法和儀器系統誤差等原因，會造成結果重現性不同。解決措施：

（1） 要保證抽樣工具和容器潔凈、干燥、異味，不會對樣品造成污染，同時及時封存，保護樣品的待檢性狀。

（2）檢測儀器工作以前，應預熱 5～10 min ，使儀器狀態穩定。儀器應置于干燥、通風的環境中，并保持電流穩定。

（3）取樣檢測時，樣品量要保證，一般葉菜類取 2 g ，非葉菜類取 4 g 。對同批次蔬菜抽樣要有公正性和代表性，取樣部位要均勻合理，多點混取，盡量取可食用部分。

（4）在制備待測液的過程中，定量加液器的加液量要均勻一致，酶液和顯色劑不能漏加或多加。加入提取液后需震蕩 1～2 min ，并保證靜置 3～5 min ，振蕩后要充分靜置，為了避免細小菜沫被吸到比色皿中，影響吸光值。（5）在測量過程中，不要打開樣品室蓋，以免影響測量結果，并且定期對儀器進行自檢，嚴格按照操作規程操作，這樣方可減小誤差，有效避免結果重現性不同。

2.抑制率偏小

該方法是通過酶被抑制的程度 （ 即抑制率 ） 來反映農藥殘留是否超標。 抑制率的正常范圍是 -10%～+110% ， 對照組 / 樣本的吸光值在 3 min 后與 3 min 前的差值 （ΔAc/ΔAs） 范圍是 0.3～0.8 。 當抑制率值偏小，即小于 -10% 時，會出現以下情況：（1）酶在參加反應之前就已經部分失活， 導致ΔAs<0.3 。（2）底物與酶未反應完全。

解決措施：取底物時，用移液槍直接加到比色皿內，盡量不要濺到壁上，加完底物后立即進行比色。

3.抑制率偏大

當抑制率出現不正常的偏大時，主要原因是在上機比色前酶就已經與底物發生反應，致使 ΔAs 較小。解決措施： 從樣本培養結束到上機比色速度要快，盡量在 1 min 內完成。 培養時間也要準確把握，不能超過 15 min 。

參考文獻：

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