杭州地區羊水染色體檢查結果分析

汪燕 李華偉 李蘭丁 楊南南 王昊

我國是新生兒缺陷高發國家，根據世界衛生組織估計，我國新生兒缺陷發生率約5.6%，且呈逐年上升趨勢［1］，已成為影響兒童健康和出生人口素質下降的重大公共衛生問題。染色體病是造成新生兒缺陷最常見原因之一，且尚無根治方法，目前國內已基本建立“孕中期血清學篩查+羊水染色體核型分析”為主的產前篩查診斷體系，是發現染色體病、降低新生兒缺陷的重要手段。本文探討羊水染色體核型分析在妊娠中期產前診斷的胎兒染色體異常中的應用。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2015年1月至2016年12月杭州市產前診斷中心就診的需進行羊膜腔穿刺術的高風險孕婦4360例。年齡19～46歲，平均年齡（33.05±4.21）歲。孕17～26周，平均孕（20.52±2.18）周。羊水穿刺產前診斷指征為高齡、21-三體綜合征高風險、18-三體綜合征高風險、胎兒無創DNA檢查高風險、超聲異常、夫婦之一為染色體異常攜帶者、不良孕產史等。抽取羊水進行細胞學培養與染色體核型分析。

1.2 方法 受檢孕婦在B 超引導下進行羊膜腔穿刺術，棄去最初的1ml羊水后取20ml羊水送檢。無菌條件下將羊水平均分為兩管各10ml，1500r/min離心8min后棄上清液，留取約0.5ml沉淀加入4ml羊水培養基（BIO-AMF-2，BI，以色列），充分混勻后轉入25cm細胞培養瓶（BD公司），置37℃5% CO2培養箱中培養6d后更換培養基，再過48h后根據細胞生長情況，常規方法收獲細胞、制片顯帶，并進行染色體核型分析。每例羊水總共計數20個核型、分析6個核型，按照《ISCN2009》的標準描述核型。

2 結果

2.1 染色體培養情況 4360例羊水標本中，4345例穿刺后培養成功，15例培養失敗，培養成功率99.66。

2.2 染色體異常核型分布 見表1。

表1 248例羊水染色體異常核型分布［n（%）］

2.3 不同羊水穿刺指征下異常核型檢出情況 見表2。

表2 不同指征下異常核型檢出情況

2.4 不同羊水穿刺指征的染色體異常真陽性率 見表3。

表3 不同羊水穿刺指征的染色體異常的真陽性率

3 討論

羊膜腔穿刺術及羊水細胞染色體核型分析是產前診斷胎兒染色體病，降低出生缺陷的經典方法［2］。研究顯示新生兒中染色體異常率約為0.85%，據以往浙江省及杭州地區產前診斷羊水中染色體異常發生率3.60%～3.69%［3-4］。本資料結果顯示染色體異常檢出率為5.71%，與上述研究有所差異。

杭州地區產前診斷的指征主要為血清學篩查高風險（50.61%）、高齡（33.83%）、超聲異常（6.17%）、異常妊娠史（4.72%）及無創DNA檢測異常（3.96%）。血清學篩查相對于其他產前診斷方法操作簡單，易于開展，成本和流產風險也較低［5］，仍然是目前產前診斷的主要指征。血清學篩查檢出的染色體異常占所有異常病例29.03%，且不局限于21-三體和18-三體，證明傳統的血清學篩查不僅可篩選出相應的染色體數目異常，還可提示其他類型染色體異常。但該指征存在一定的假陰性率［6］，本資料也顯示21-三體高風險篩查出染色體異常的真陽性率低（2.62%），因而其臨床應用策略仍有待進一步優化。

近年來無創產前檢測技術發展迅速，目前已能可靠地檢測21/18/13三體組合。本資料結果顯示非整倍體異常仍為杭州地區胎兒染色體異常的主要組成部分，常見的21-三體（44.35%）、18-三體（14.52%）及13-三體（2.42%）占全部染色體異常核型61.29%。無創DNA檢測技術因其真陽性率高且異常核型檢出率較高，已逐漸成為一種更為有效的篩查方法。但研究顯示其仍然存在一定程度漏診風險，建議“慎用于產前篩查高風險預產期年齡≥35歲高齡孕婦及有其他直接產前診斷指針的孕婦”［7］。

本資料顯示，不同指征的真陽性率和染色體異常檢出率并不平行：真陽性率顯示，無創DNA檢測異常（58.14%）較高，18-三體高風險（13.24%）次之；而異常檢出率顯示，無創DNA檢測異常最高（2.30%），其次是21三體高風險（1.24%）和高齡（1.10%）。提示在分析各指征檢出率數據時，不僅要關注指征的敏感度，更要關注各指征普及程度對檢出率的影響。推測本地區染色體異常的總體檢出率較往年大幅提高［4］，可能是“無創DNA檢測異常”指征引入導致的結果。

［1］ 中華人民共和國衛生部. 中國出生缺陷防治報告. 2012. 9.

［2］ Aypar U, Thorland EC, Hoppman N. Prenatal diagnosis of chromosome abnormalities: past, present, and future. Clinical chemistry, 2013,59(10): 1432-1434.

［3］ 朱宇寧, 呂時銘, 陳雁, 等. 12841例羊水染色體核型分析與分子技術應用漏診風險分析. 中華檢驗醫學雜志, 2015, 38(8): 517-521.

［4］ 王昊, 汪燕, 孫博, 等. 杭州地區2151例羊水染色體檢查結果分析. 中國優生與遺傳雜志, 2013, 21(11): 32-33.

［5］ Syngelaki A, Pergament E, Homfray T, et al. Replacing the combined test by cell-free dna testing in screening for trisomies 21, 18 and 13: impact on the diagnosis of other chromosomal abnormalities . Fetal Diagn Ther, 2014, 35(3): 174-184.

［6］ 劉啟蘭,胡婭莉,許爭峰,等.江蘇地區以人群為基礎的唐氏綜合征產前篩查和診斷研究.中華醫學遺傳學雜志,2010, 27(3):340-342.

［7］ 中華人民共和國衛生計劃生育委員會婦幼健康服務司.高通量基因測序產前篩查與診斷技術規范(試行),2015.