HS-SPME/GC-MS法測(cè)定榛蘑中揮發(fā)性成分

王 妮

(長(zhǎng)春職業(yè)技術(shù)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春 130033)

榛蘑,學(xué)名蜜環(huán)菌(Armillariamellea(Vahl ex Fr.)Quel),又名蜜環(huán)蕈,屬于擔(dān)子菌亞門、傘菌目、白蘑料、密環(huán)菌屬[1]。榛蘑是一種食藥兼用真菌,其子實(shí)體味道鮮美,營(yíng)養(yǎng)豐富,是一種高蛋白、低脂肪,富含維生素、纖維素、無(wú)機(jī)鹽以及各種多糖的食用菌,是我國(guó)人們經(jīng)常食用的野生食用菌之一。研究發(fā)現(xiàn)榛蘑子實(shí)體或其發(fā)酵物具有一定的功能活性,如降血糖、增強(qiáng)耐缺氧能力及增強(qiáng)肌體免疫功能等作用[2-4]。

榛蘑在我國(guó)東北地區(qū)產(chǎn)量高,但因鮮品不耐儲(chǔ)存,故在市場(chǎng)上的流通以干品為主。而榛蘑干品具有的獨(dú)特氣味,也是評(píng)價(jià)其干品質(zhì)量品質(zhì)的有效途徑。榛蘑干品中揮發(fā)性成分不僅含量低而且成分復(fù)雜,不易通過常規(guī)方法進(jìn)行提取和測(cè)定。而固相微萃取技術(shù)(SPME)作為一種集萃取、濃縮和進(jìn)樣于一體的提取新技術(shù),近年來(lái)在天然產(chǎn)物揮發(fā)性成分檢測(cè)等方面都得到了廣泛應(yīng)用[5-6]。

本文采用固相微萃取技術(shù)(SPME)結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)法對(duì)榛蘑揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行鑒定分析,以期更好地評(píng)價(jià)野生榛蘑營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,為其進(jìn)一步的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

榛蘑 秋季采摘,選取無(wú)蟲完好榛蘑,自然干燥,采自吉林省通化縣光華鎮(zhèn)。

6890N/5975 GC-MS聯(lián)用儀 美國(guó)Agilent公司;65 μm PDMS/DVB萃取頭 美國(guó)Supelco公司;20 mL鉗口頂空樣品瓶 美國(guó)Agilent公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 取粉碎后榛蘑樣品約5 g,置于20 mL固相微萃取儀頂空采樣瓶中,插入已老化好的裝有65 μm PDMS/DVB萃取頭的手動(dòng)進(jìn)樣器,在80 ℃頂空萃取30 min取出,快速移出萃取頭并立即插入氣相色譜儀進(jìn)樣口中,熱解吸2 min后進(jìn)樣。

1.2.2 GC-MS條件 色譜條件:色譜柱為Agilent wax(30 m×0.25 mm×1.0 mm),進(jìn)樣口溫度:250 ℃;程序升溫條件:起始溫度40 ℃(保留3 min),以5 ℃/min升溫至220 ℃,保持2 min,再以10 ℃/min升溫至250 ℃,保持10 min;載氣為高純He(99.999%);柱前壓6.87 psi,載氣流量1.0 mL/min;不分流進(jìn)樣;溶劑延遲2 min。

質(zhì)譜條件:EI電離源,電離電壓70 eV;傳輸線接口溫度:280 ℃,離子源溫度230 ℃;四極桿溫度150 ℃;質(zhì)量范圍(m/z)20～500。

1.3 數(shù)據(jù)處理

揮發(fā)性成分的分析鑒定是與NIST 2008數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和比對(duì)分析。

2 結(jié)果與分析

圖1給出了SPME-GC-MS法對(duì)榛蘑揮發(fā)性成分分析的總離子流圖。各組分同NIST2008標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行對(duì)照分析,以化合物匹配度≥90%為定性標(biāo)準(zhǔn),采用峰面積歸一化法計(jì)算各化學(xué)成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù),確定了榛蘑中的揮發(fā)性成分,其組分分析結(jié)果見表1。

表1 榛蘑揮發(fā)性成分

續(xù)表

圖1 榛蘑揮發(fā)性成分GC-MS總離子流圖

由表1可知,利用HS-SPME-GC/MS法測(cè)定榛蘑中揮發(fā)性成分,根據(jù)與譜庫(kù)的對(duì)比分析,共鑒定出39種揮發(fā)性成分,其中含酯類15種、酸8種、烷類6種、芳香類4種、呋喃2種,其它4種,相對(duì)含量分別為54.9%、12.97%、4.53%、7.25%、4.24%和4.85%,其中含量最高的三種化合物為順-9-十八碳烯酸甲酯,9,12-十八碳二烯酸甲酯和油酸乙酯,含量分別為13.93%、12.7%和8.74%。

由此可知,采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜質(zhì)譜法鑒定出來(lái)的揮發(fā)性風(fēng)味成分主要是酯類成分,這一結(jié)果與酯類成分在松茸干品和白金針菇干品中揮發(fā)性成分所占比例一致[7-8]。其原因可能是因?yàn)殚荒⒌却笮途愒谧匀伙L(fēng)干過程中,易揮發(fā)的風(fēng)味化合物會(huì)有不同程度的損失,相對(duì)而言的小分子醇、醛類等較易在干燥過程中損失,而大分子酯類成分揮發(fā)較慢,在榛蘑揮發(fā)性成分中酯類成分含量最高,使榛蘑干品具有的獨(dú)特氣味。

3 結(jié)論

應(yīng)用HS-SPME/GC-MS分析榛蘑香氣成分,共鑒定出39種揮發(fā)性成分,其中含酯類和酸類成分?jǐn)?shù)量多,并且含量高,數(shù)量分別為15和8種,含量分別為54.9%和12.97%,同時(shí)含量最高的三種化合物均為酯類成分。由此可知在干燥的榛蘑中,弱極性的大分子酯類成分是干燥榛蘑的主要揮發(fā)性成分,為榛蘑干品的品質(zhì)評(píng)價(jià)提供依據(jù)。

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