電化學發光法檢測甲胎蛋白的精密度驗證

梅麗春，王 凡，蔣紅君，黃秀群

（1.云南省昭通市第一人民醫院檢驗科 657000；2.云南省第一人民醫院檢驗科，昆明 650032）

根據美國《臨床實驗室改進法案修正案》以及2003年國際標準化組織發布的醫學實驗室認可標準ISO15189，均要求臨床實驗室在開展某一檢測項目前，需提供并保留相關的方法學驗證實驗數據，即某一檢測項目在正式用來檢測患者標本、發出檢驗報告前，實驗室需對其相關方法學分析性能予以驗證，對廠商提供的評價資料中的主要性能予以確認。對封閉系統只需做基本性能驗證實驗，即精密度、準確度、臨床可報告范圍和參考區間驗證實驗［1］。作者參照相關文件，對電化學發光法檢測甲胎蛋白（AFP）的精密度進行驗證，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 羅氏Elecsys2010全自動電化學發光免疫分析儀。羅氏電化學發光AFP試劑盒，批號為152172，配套校準品，批號為181641，通用稀釋液。

1.2 標本 英國朗道公司高、低值免疫質控品，批號分別為637EC、642EC；混合高、低值AFP標本各1份。

1.4 方法 按照操作說明書的要求對儀器進行常規的保養和維護，每天進行常規質控（兩個濃度水平），質控在控后進行驗證實驗。精密度驗證實驗：按照EP10-A2《臨床實驗室定量方法的初步評價》對AFP測定的精密度進行驗證，通過實驗得到估計的批內標準差（S批內）和總的標準差（S總），并與廠家聲明的批內標準差和總標準差比較［2］。

2 結 果

羅氏公司聲明Elecsys2010電化學發光法檢測AFP的批內精密度為3%，總精密度為6%，因為S批內＜2／3S總，所以作者每天分析兩個濃度水平的室內質控品，每個濃度重復測定4次，連續5d［1］。結果見表1及表2。

表1 電化學發光法檢測AFP精密度驗證實驗數據（低值）（U／mL）

表2 電化學發光法檢測AFP精密度驗證實驗數據（高值）（U／mL）

從表1可以看出，對低值標本（測定均值為11.90U／mL）廠家聲明S批內＜0.36U／mL，S總＜0.71U／mL，驗證的S批內為0.28U／mL，S總為0.45U／mL，均處于廠家聲明的允許范圍內。

從表2可以看出，對高值標本（測定均值為237.23U／mL），廠家聲明S批內＜7.11U／mL，S總＜14.23U／mL，驗證的S批內為2.85U／mL，S總為3.50U／mL，均小于廠家聲明的允許范圍。從表1、表2可知，對于高值和低值標本，驗證的AFP測定批內精密度及總精密度均與廠家聲明一致。

3 討 論

臨床實驗室修正法規（CLIA）規定了檢測系統性能評估的最基本要求為精密度、準確度、可報告范圍和參考區間，即醫學實驗室至少必須對所選用的檢測系統的上述4項性能指標進行驗證。臨床實驗室的驗證實驗不同于廠家在建立檢測系統時進行的建立實驗，也不同于廠家確認其檢測系統性能時的確認實驗，要求使用簡便快捷、便于操作的方法來驗證廠家已經聲明的性能參數。

對于精密度的驗證，目前國內主要參考臨床和實驗室標準化協會（CLSI）EP6-A，準確度的驗證主要參考EP9-A2。精密度性能是檢測系統的基本分析性能之一，也是其他方法學評價的基礎，國內臨床實驗室對樣品只作單次測量便發出報告，所以精密度性能更是至關重要［3］。EP10-A2《臨床實驗室定量方法的初步評價》使用戶通過最小的努力即可核實廠家聲明的精密度性能，作者使用該方案對電化學發光測定AFP的批內不精密度和總不精密度進行驗證，廠家聲明的批內不精密度為3%，總不精密度為6%，表1及表2結果顯示，低AFP測定值標本驗證的S批內為0.28U／mL，S總為0.45U／mL，高 AFP測定值標本驗證的S批內為 U／mL，S總為3.50U／mL，均小于廠家聲明值。

上述結果顯示，對于高值和低值標本，電化學發光檢測AFP測定批內精密度及總精密度均符合廠家聲明的范圍，此驗證方案和實驗方法簡便可行，可用于其他項目的性能驗證。

［1］ 楊有業，張秀明.臨床檢驗方法學評價［M］.北京：人民衛生出版社，2008.

［2］ 畢波，呂元.定量檢測方法學性能驗證的系統設計［J］.中華檢驗醫學雜志，2007，30（2）：143-145.

［3］ 楊志釗，繆麗韶.利用CLSI EP15-A指南驗證精密度和準確度［J］.國際檢驗醫學雜志，2010，31（3）：231-232.