張 坤 , 樊海平 , 張蕉南 , 胡 兵 , 邱曼麗 , 薛凌展 , 陳 斌 , 鐘全福
(1.福建天馬科技股份集團股份有限公司,福建福州 350308;2.福建省特種水產配合飼料重點實驗室,福建福州 350308;3.福建省淡水水產研究所,福建福州 350002)
大刺鰍(Mastacembelus aculeatus)主要分布于我國廣東、廣西、云南、海南以及福建等地的河流、湖泊中(林偉強等,2016),其肌肉中鮮味氨基酸總量超過青魚、草魚,肉味鮮美,無肌間刺,具有較高的營養價值和經濟價值(Anu等,2013)。大刺鰍為底棲淡水魚類,主要捕食水生昆蟲、小魚、小蝦等小型無脊椎動物和水生植物(黃永春,1999),胃壁厚,腸道粗而短。目前,大刺鰍營養物質的需求量及飼料配方研究應用等鮮見報道,馴養主要使用水蚯蚓、冰鮮及鰻鱺配合飼料。
本文采用正交設計法,考察飼料中蛋白質、蛋氨酸及脂肪不同含量水平對大刺鰍幼魚生長性能和形態學指標的影響,篩選出大刺鰍幼魚適宜飼料配方,以期為大刺鰍配合飼料的研制和應用提供依據。
1.1 試驗材料及試驗魚 試驗用飼料、蛋氨酸及魚油均由福建省天馬科技集團股份有限公司提供。飼料原料以全過100目篩,逐級混合均勻的魚粉及豆粕為主要蛋白源,以魚油為主要脂肪源,以預糊化淀粉作為黏合劑,另外添加少量維生素及礦物質預混料。
試驗魚為順昌縣兆興魚種養殖有限公司利用野生大刺鰍自繁育的同批次子一代苗種,經浮游動物、水蚯蚓、鰻鱺配合飼料系列餌料培育至幼魚,平均體重和全長分別為 (8.63±0.23)g和(14.87±0.32)cm。挑選外表正常,健康的個體于直徑1.5 m的玻璃纖維桶中暫養2周,暫養期間24 h不間斷充氣,保證水體溶解氧穩定,水源為經充分曝氣24h以上的地下水,溫度維持26~28℃,每日分別于7∶00和16∶00投喂鰻鱺配合飼料2次,投餌量為魚體總重的2%,分別于投餌后1.5 h清污換水,日換水量40%左右,待魚體穩定攝食后移至150 L玻璃缸中進行正式試驗。
1.2 試驗設計 采用正交表L9(34)設計,以蛋白質、蛋氨酸及脂肪含量為因素,設置3個水平,其中蛋白質水平為44%、47%、50%,蛋氨酸水平為1.4%、1.7%、2.0%,脂肪水平為 4%、6%、8%,分別配制G1~G9共9組不同營養水平配合飼料 (表1)。9個處理組,每組放養36尾經停食24 h的大刺鰍幼魚,每組設置2個重復。每天分別于7∶00、16∶00投餌,日投餌率為魚體總重的2.5%~3%。攝食結束1.5 h后虹吸排污,日換水量為70%,試驗持續60 d,試驗期間利用電加熱棒維持水溫為27~28℃,溶解氧≥6.0 mg/L,氨氮 <0.2 mg/L,亞硝酸鹽 <0.02 mg/L,pH 7.3±0.3。每日記錄飼料攝食量和死亡魚尾數,每隔10 d每組隨機抽樣6尾大刺鰍稱重后調整飼料投喂量。

表1 配方飼料的正交試驗設計表L9(34)
1.3 樣品采集與處理 試驗結束前24 h停止投餌,稱量每組魚體總重后,每組隨機取6尾魚稱重并測定體長,然后在冰盤上進行解剖,分離并稱量內臟重、肝臟重和腸系膜脂肪重,生理鹽水分別沖洗肝臟和腸道,濾紙吸干后分別加入9倍體積(V/m)的預冷生理鹽水,冰水浴中勻漿制成10%組織液,3000 r/min離心10 min,取上清液保存待測。
1.4 指標測定 生長性能采用增重率、特定生長率、蛋白質效率和餌料系數表示;形態學指標采用肥滿度、臟體比、肝體比、腸系膜脂肪體比表示。具體計算公式如下:
存活率/%=Nt/N0×100;
增重率/%=(Wt-W0)/W0×100;
特定生長率/%=(ln Wt-ln W0)/t×100;
蛋白質效率=(Wt-W0)/WP;
餌料系數=F/(Wt-W0);
肥滿度/%=100×m/L3×100;
臟體比/%=100×mv/m×100;
肝體比/%=ml/m×100;
腸系膜脂肪體比/%=mi/m×100;
式中:Wt為試驗結束時魚體質量,g;W0為試驗開始時魚體質量,g;WP為蛋白質攝入量,g;t為飼喂天數,d;F為飼料攝食量,g;N0試驗初始尾數;Nt為試驗末尾數;ml為肝臟重量,g/尾,mv為內臟重量,g/尾,mi為腸系膜脂肪重量,g/尾;m 為魚體重量,g/尾;L 為魚體體長,cm/尾。
1.5 數據處理與分析 所有試驗數據采用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析,并進行多重比較,P<0.05表示各組間差異顯著。直觀分析法及方差分析考察3種試驗因素對大刺鰍幼魚增重率和餌料系數的影響,層次分析法(郭穗勛等,2004)考察試驗因素各水平對增重率和餌料系數的影響權重。
2.1 飼料營養水平對大刺鰍幼魚生長性能的影響 結果見表2。試驗期間大刺鰍幼魚攝食正常,存活率均超過97%,組間差異不顯著 (P>0.05)。 G7處理組試驗魚的增重率(WGR)、特定生長率(SGR)和蛋白質效率(PER)最大,分別為177.38%、1.65%和2.65%,其中WGR、SGR除與G9組差異不顯著外(P>0.05),與其余各處理組差異顯著(P<0.05),分別較其余處理組提高了8.09%~26.81%和5.45%~18.79%;PER較G4處理組顯著提高了26.79%(P<0.05),與其余各組差異不顯著(P>0.05)。G9處理組的餌料系數(FCR)最小,較G3處理組顯著降低了32.35%(P<0.05),與其余各組差異不顯著(P>0.05)。

表2 試驗飼料營養水平對大刺鰍幼魚生長性能的影響
2.2 飼料營養水平對大刺鰍幼魚形態學指標的影響 結果見表3。大刺鰍幼魚肥滿度(CF)及腸系膜脂肪比(IPF)受飼料中蛋白質、蛋氨酸及脂肪添加水平影響不顯著(P>0.05)。G5處理組肝體 比 (HSI) 較 G4、G6、G8處 理 組 顯 著 增 大 了13.55%、11.68%、13.55%(P < 0.05),與其余各組差異不顯著(P>0.05)。 G9處理組臟體比(VSI)較G8處理組顯著升高了27.08%,除與G3處理組差異不顯著外(P>0.05),與其余各組差異顯著(P < 0.05)。

表3 試驗飼料營養水平對大刺鰍幼魚形態學指標的影響%
2.3 正交試驗結果分析
2.3.1 直觀分析法 結果見表4。以增重率和餌料系數為考察指標,三種試驗因素對大刺鰍幼魚增重率和餌料系數的極差 (R)值分別為24.21、10.87、5.81 和 0.17、0.08、0.02,R 值的主次順次為A(蛋白質)因素 >C(蛋氨酸)因素>B(脂肪)因素,因此試驗因素中蛋白質的含量是影響大刺鰍幼魚增重率的主要因素,其次為蛋氨酸含量,再者為脂肪含量。通過比較各因素水平間k值的大小得出,大刺鰍幼魚的飼料配方以A3B3C2為佳。

表4 試驗飼料營養水平對大刺鰍幼魚生長的效應分析(2個重復)
2.3.2 方差分析法 結果見表5。以增重率為考察指標,蛋白質對大刺鰍幼魚增重率影響極其顯著(P=0.000),其次是蛋氨酸含量(P=0.025),脂肪含量對大刺鰍幼魚增重率影響不顯著(P=0.233)。以餌料系數為考察指標,3種飼料主要成分均對大刺鰍幼魚餌料系數影響顯著 (P<0.05)。因模型誤差同試驗誤差顯著差異(P<0.05),說明試驗因素間存在交互作用,進行各因素水平間的多重比較無實際意義,為尋求最優水平組合,需進行試驗各處理組間的多重比較。
2.3.3 層次分析法 結果見表6。以增重率和餌料系數為考察指標,試驗因素不同水平對大刺鰍幼魚增重率和餌料系數的影響權重最大的分別是A3、B3和C2,各因素的主次順序由各水平影響權重之和的大小決定,增重率各因素水平權重之和分別為 A:0.592,B:0.183,C:0.265;餌料系數各因素 水 平 權 重 之 和 分 別 為 A:0.613,B:0.077,C:0.311。因此主次順序為A>C>B,試驗最優處理組合為A3B3C2,與直觀分析法一致。

表5 試驗飼料營養水平對大刺鰍幼魚生長的方差分析(2個重復)

表6 試驗飼料營養水平對大刺鰍幼魚生長的層次分析
配合飼料具有營養全面均衡、利用效率高、安全方便、便于儲存等優點,是大刺鰍養殖業規模化、集約化、標準化和產業化的物質基礎,其質量決定了大刺鰍養殖效益和產品質量與安全(宋青春,2009)。然而有關大刺鰍的營養生理、代謝規律、營養需求及有害物質的危害量等研究及其系列配合飼料研發仍處于起步階段,因此優化大刺鰍幼魚飼料配方,對大刺鰍養殖業具有重要意義。
以增重率、餌料系數為考察指標,蛋白質的的含量對養殖效果影響最大,其次是蛋氨酸含量,而脂肪含量的養殖效果影響差異不顯著;以形態學指標為考察指標,3種飼料中主要營養成分均對大刺鰍幼魚肥滿度、腸系膜脂肪比重影響不顯著,這與奧尼羅非魚(林仕梅等,2008)、大菱鲆(魏玉婷,2010)等研究結果一致。在9種飼料配方中,養殖生長性能各項指標最好的是G7處理組,即50%蛋白質、4%脂肪和3%蛋氨酸,而餌料系數最低的為G9處理組,即50%蛋白質、8%脂肪和1.7%蛋氨酸,這表明在一定范圍內,提高脂肪含量有利于節約蛋白質。但此含量是否已達“上限”,繼續提高蛋白質和脂肪含量,大刺鰍幼魚生長性能是否會更好,還有待于進一步研究。本研究馴食轉料的幼鰻配合飼料3種主要營養成分分別為粗蛋白質45%,蛋氨酸1.4%,粗脂肪4%,與正交試驗粗蛋白質50%,蛋氨酸1.7%,粗脂肪8%的優化組合相比,粗蛋白質、蛋氨酸和粗脂肪水平均有所降低。飼喂結果顯示投喂幼鰻飼料大刺鰍幼魚生長速度、餌料系數等指標較優化組合飼料差,表明大刺鰍幼魚對蛋白、蛋氨酸和脂肪需求量大于幼鰻。
研發優質配合飼料的基礎之一是營養需求的研究,魚類的營養需求包括蛋白質、脂質、碳水化合物、維生素和礦物質等多種因子,且各營養成分的種類和含量及各因子間的相互作用均對水產動物產生影響,只有將多種飼料成分相配合才能滿足水產動物的生理需求 (王曉娟等,2010)。良好的大刺鰍配合飼料配方,一方面要以大刺鰍營養標準為理論依據,運用大刺鰍營養調控理論與技術,提高飼料的誘食性及其消化吸收率,增進大刺鰍免疫力,充分滿足大刺鰍生長與繁殖的需要,另一方面又要考慮大刺鰍養殖模式及季節和地區的差異,并根據大刺鰍種類、規格及養殖過程出現的各種具體情況作出適當地調整,以開發出安全高效環境友好型大刺鰍配合飼料(何志剛等,2010)。本研究僅設計蛋白質、蛋氨酸和脂肪3因素3水平正交試驗,且經方差分析表明3種因素間存在交互作用,因此開展維生素、礦物鹽及不同種類、質量蛋白源等對魚體的影響研究,對大刺鰍飼料配方的進一步優化具有積極意義。
本試驗應用平均體質量為(8.63±0.23)g的大刺鰍幼魚,采用正交表L9(34)設計9組不同蛋白質、蛋氨酸及脂肪含量水平的配合飼料,以增重率和餌料系數作為生長評定指標,結果表明,飼料中蛋白質水平、蛋氨酸及脂肪含量水平對大刺鰍幼魚的WGR和FCR影響顯著;對肥滿度、臟體比、肝體比和腸系膜脂肪比影響不顯著。大刺鰍幼魚配合飼料中適宜蛋白質、蛋氨酸及脂肪含量分別為50%、1.7%和8%。
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