不同硒水平對鱸魚生長性能及抗氧化能力的影響

郭正富,李 軍,楊小琴

(1.四川宜賓職業技術學院,四川宜賓 644003;2.四川省宜賓市高縣水務局,四川宜賓 645150)

硒（Se）是動物維持生命代謝的必需微量元素，是生命體完成清除自身體內不同過氧化物的重要物質（Flatman，1990）；同時它在生命體中起到防止細胞線粒體脂類過氧化，避免脂類代謝物對細胞膜的破壞。目前大量的研究結果表明，在飼料中添加硒鹽在一定程度上對動物機體生長性能和抗氧化能力產生影響（劉康，2010；朱春峰，2009）；如石斑魚（Lin，2005）、大黃魚（曹娟娟等，2015）、軍曹魚（Liu等，2010）、鱸魚（梁萌青等，2006）等水產品種，也在鯉魚（Ashouri等，2015）、大口黑鱸（Zhu等，2012）和革胡子鯰（Abdel等，2007）等水產品種進行硒對脂肪含量及血清脂肪代謝影響的試驗。

鱸魚（Lateolabrax japonicus）是一種廣溫性魚類（適宜水溫3～29 ℃），在我國南方和北方海域均有養殖，也是一種廣鹽性魚類，近幾年是海水養殖發展的重點品種。隨著鱸魚人工養殖技術的成熟和規模的不斷擴大，其對于商品飼料的要求升高。目前除談楓（2014）對中期規格（214.5±1.0）g鱸魚硒元素需要量研究報道外，國內極少見硒對鱸魚的影響研究。因此，本試驗通過研究飼料中硒水平對鱸魚營養生理及抗氧化能力的影響，以期為鱸魚基礎營養需求數據庫的完善及高效配合飼料的研制提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料 在基礎飼料中分別添加0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mg/kg 的 硒 鹽（NaSeSO3），配置成硒水平依次為 0.06、0.37、0.65、0.97、1.28、1.60 mg/kg的6種等氮等脂飼料。試驗飼料基礎配方及營養組成見表1。試驗所需原料均粉碎過80目篩，混合均勻后制成粒徑為2 mm的顆粒飼料，60 ℃干燥后于-20℃保存備用。

1.2 試驗動物及飼養管理 試驗開始前，用0.06 mg/kg組飼料投喂試驗魚2周，分組前饑餓24 h后挑選體態均勻的（12.30±0.04）g鱸魚720尾隨機分組。按每組3個網箱（1.5 m×1.5 m×1 m）、40（尾/箱）的設置平行進行養殖實驗60 d，每天飽食投喂2次（8：10和17：10）。試驗期間水溫穩定在24～29 ℃，溶氧6 mg/L以上。

1.3 樣品采集和指標測定 養殖試驗結束空腹24 h后將各試驗組鱸魚全部用MS-222（40 mg/L）麻醉后稱重計數。然后按10尾/網箱的隨機抽取各組試驗魚，尾靜脈取血置于抗凝管中，4 ℃下5000 r/min離心8 min后，取上層血清48 h內完成檢測。按5尾/網箱選取試驗魚，解剖取其肝臟保存于防凍管內，液氮急凍后保存在-80 ℃超低溫冰箱中，一周內完成相關指標的檢測。

表1 基礎飼料原料組成及營養水平（干重基礎）???%

飼料及全魚常規營養成分測定參照胡靜等（2016）方法。

肝臟和血清谷胱甘肽還原酶（GR）；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）；總超氧化物歧化酶（T-SOD）；丙二醛（MDA）采用試劑盒（南京建成生物工程研究所）測定。

1.4 生產性能 生產性能計算公式為：

成活率/%=試驗期末魚尾數/試驗期初魚尾數×100；

增重率/%=（試驗期末均重－試驗期初均重）/試驗期初均重×100；

特定生長率/（%/d）=（ln試驗期末均重－ln試驗期初均重）/試驗天數×100；

飼料效率/%=（試驗期末總重+死亡魚總重－試驗期初總重）/總攝入飼料量×100。

1.5 統計分析 數據全部采用“平均值±標準誤”表示，用SPSS17.0進行單因子方差分析和多重比較。

2 結果

2.1 飼料不同硒含量對鱸魚幼魚生長性能的影響 不同硒含量飼料對鱸魚幼魚相關生長指標影響見表2，0.97 mg/kg組的鱸魚幼魚增重率（657.86±2.83）% 和特定生長率（3.38±0.11）%/d達到最高，顯著高于除0.65 mg/kg組以外的其他各組（P＜0.05），飼料效率達到（20.01±0.11）%，變化趨勢也與增重率相似（P＜0.05）；各組鱸魚的存活率均保持為100%（P＞0.05）。通過二次回歸分析增重率和特定生長率數據（杜強等，2011）得出，當飼料中硒含量約為0.81 mg/kg時，鱸魚幼魚能達到最大生長性能（圖1和圖2）。

2.2 不同硒含量飼料對鱸魚幼魚體組成的影響0.97 mg/kg組鱸魚幼魚粗蛋白質含量最高，顯著高于0.06和0.65 mg/kg組（P＜0.05）。0.06 mg/kg組鱸魚幼魚的全魚粗脂肪含量顯著低于0.37、1.28和 1.60 mg/kg組（P＜ 0.05），而鱸魚幼魚的全魚水分在0.06 mg/kg組高于其他各組，且與0.37、0.97、1.28、1.60 mg/kg組差異達顯著水平（P＜ 0.05）（表 3）。

表2 飼料不同硒含量對鱸魚幼魚相關生長指標影響

圖1 不同硒含量對鱸魚增重率的影響

圖2 不同硒含量對鱸魚特定生長率的影響

2.3 不同硒含量飼料對鱸魚幼魚肝臟抗氧化指標的影響 由表4可知，飼喂含硒飼料60 d后，隨著飼料硒含量的增加，試驗鱸魚肝臟的谷胱甘肽過氧化物酶活性升高，1.60 mg/kg組顯著高于其他各組（P＜0.05）；肝臟超氧化物歧化酶活性出現先升后降再升高的趨勢，在0.96 mg/kg組達到最大活性，并顯著高于其他各組（P＜0.05）。各試驗組鱸魚幼體的肝臟丙二醛含量差異不顯著（P ＞ 0.05）。

3 討論

動物對營養的需要量均存在一定的適宜區間，對于硒元素也不例外，適宜區間內，硒對動物具有積極有效的作用，而在區間外會導致硒缺乏癥或中毒，這被前人定義為硒的劑量-效應曲線原理（徐輝碧，2014）。通過回歸分析文中用不同硒水平飼料飼喂鱸魚60 d的結果得出，當飼料中硒含量在0.81 mg/kg時，鱸魚能達到最大生長性能。這與以往對軍曹魚（0.788 mg/kg）的研究結果接近（Liu等，2010），高于對鱸魚（0.40～ 0.63 mg/kg）（談 楓，2014；梁 萌 青 等，2006）、草 魚（0.438～ 0.631 mg/kg）（蘇 傳 福，2008）、鯉 魚（0.434 ～ 0.517 mg/kg）（金明昌，2007）、斑點叉尾鮰（0.25 mg/kg）（Gatlin，1984）等的研究結果，但低于軍曹魚（1.29和1.46 mg/kg）（楊原志等，2016）、鮑魚（1.41 mg/kg）（Wang等，2012）的研究結果。原因可能與水產動物品種及其不同生長階段、養殖環境和飼料加工工藝等因素有關。同時鱸魚和軍曹魚同屬鱸形目，具有一定的遺傳學關系，推測這可能是導致二者硒需要量接近的主要原因，有待從分子生物學更深一步的研究論證。

表3 飼喂不同硒含量飼料的鱸魚幼魚的營養組成（全魚）????????????????%

表4 不同硒含量飼料對鱸魚幼魚肝臟抗氧化指標的影響

肝臟是魚類硒蓄積較高的組織（Kim，2014）。肝臟谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽還原酶和超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量常用于機體抗氧化能力判斷的主要指標（Pacin等，2013）。硒作為谷胱甘肽過氧化物酶的活性中心，肝臟谷胱甘肽過氧化物酶的活性也能反面判斷機體硒的效果（胡俊茹等，2016）。本試驗中隨著硒在動物體內的沉積，谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著升高，這與以往對石斑魚（Lin，2005）、黃顙魚（胡俊茹等，2016）及鮑魚（Wang等，2012）的研究結果相似。谷胱甘肽過氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性及兩者間的平衡對于抵抗機體氧化損傷具有重要作用，它們與過氧化氫酶一起被定義為細胞防御功能的首道防線（Gerbhart，2002）。

超氧化物歧化酶是通過捕獲超氧陰離子起到對機體氧化免疫防御的作用（Winston，1991）。而銅作為超氧化物歧化酶的結構中心，對于維持該酶的穩定性十分重要，如Lorentzen等（2015）對大西洋鮭研究發現，肝臟硒和銅的蓄積量呈正效應變化。本試驗中，肝臟超氧化物歧化酶活性隨飼料硒含量增加出現波動變化，推測原因可能是范圍內硒能使超氧化物歧化酶活性表現出正效應關系，當硒水平超出一定范圍則會抑制超氧化物歧化酶活性，然而當含量過高后，機體再次重啟超氧化物歧化酶以降低高硒所引起的氧化應激反應，這一推斷有待進一步地驗證。

Orun等（2005）研究發現，虹鱒飼料中適量硒鹽或有機硒能有效降低魚體血清和肌肉丙二醛含量（Orun等，2005），這有異于本研究中硒對鱸魚及西伯利亞鱘魚（Acipenserbaeri）（Pacini等，2013）和虹鱒（Rider等，2009）中肝臟丙二醛含量的影響。據以往報告推測，出現這一現象的原因可能與試驗檢測方法有關，目前條件下高效液相色譜法靈敏度遠高于試劑盒法（Kucukbay等，2009），這有待技術進一步的提升控制，但在同一實驗模式和檢測方法條件下，本試驗結果仍是鱸魚幼魚營養研究較理想參考。

因此，綜合本試驗結果得出，本試驗條件下飼料硒水平為0.81 mg/kg時，鱸魚可以獲得最大增重率和特定生長率。

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