斑鳩菊的化學(xué)成分研究

彭彩暾 陳新 史茹茹

摘要[目的]研究斑鳩菊的化學(xué)成分。[方法]利用硅膠層析、樹脂層析、Sephadex LH-20凝膠層析和ODS反相層析等技術(shù)，對(duì)斑鳩菊乙醇提取物進(jìn)行分離純化，通過波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行化學(xué)成分鑒定。[結(jié)果]從斑鳩菊中共分離得到7個(gè)化合物，分別鑒定為山奈酚、木犀草素、芹菜素、槲皮素、2（S）-7，3′，5′ -三羥基二氫黃酮、谷甾醇、豆甾醇。[結(jié)論]7個(gè)化合物均為首次從該植物中分離得到。

關(guān)鍵詞斑鳩菊屬；斑鳩菊；化學(xué)成分；分離；純化

中圖分類號(hào)R284.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2018）05-0191-02

Abstract[Objective]The research aimed to study the chemical constituents of Vernonia esculenta.[Method]Silica gel chromatography， resin chromatography， Sephadex LH20 gel chromatography and ODS reverse phase chromatography were used to isolate and purify ethanol extract of Vernonia esculenta. The chemical constituents were identified by spectral data.[Result]Seven compounds were isolated from Vernonia esculenta， and they were identified as kaempferol， luteolin， apigenin， quercetin， 2（S）7，3′，5′trihydroxyflavanone，sitosterol，stigmasterol. [Conclusion]Seven compounds were isolated from Vernonia esculenta for the first time.

Key wordsVernonia；Vernonia esculenta；Chemical constituents；Separation；Purification

斑鳩菊（Vernonia esculenta）是菊科斑鳩菊屬的植物，該屬植物約1 000種，主產(chǎn)熱帶地區(qū)；我國有30余種，分布在西南至東南部和臺(tái)灣[1]。我國民間作為草藥入藥，全草藥用，清熱解毒、生肌斂瘡，主治闌尾炎、瘡癤、燙火傷[2]。該屬植物在美洲被用作驅(qū)蟲、抗瘧植物藥，療效顯著。國內(nèi)外學(xué)者曾對(duì)該屬植物的化學(xué)成分有較多研究，發(fā)現(xiàn)主要成分為倍半萜類、三萜、黃酮、甾體、揮發(fā)油等，這些成分展現(xiàn)了多方面的藥理活性，如抗腫瘤、抗真菌、抗瘧等[3]。為了發(fā)現(xiàn)抗腫瘤活性物質(zhì)，筆者對(duì)斑鳩菊乙醇提取物活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)該植物全草乙醇提取物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，因此對(duì)斑鳩菊乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

斑鳩菊全草采集于我國貴州，由福建省亞熱帶植物研究所陳華良博士鑒定為Vernonia esculenta，藥材標(biāo)本保存于武漢輕工大學(xué)天然產(chǎn)物資源開發(fā)與利用研究室。

1.2試驗(yàn)儀器

Bruker AV 400型核磁共振波譜儀（瑞士布魯克公司）；十萬分之一分析天平（日本島津公司，AUWl20D）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州丹瑞實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司，HH-D4）；柱層析硅膠（100～200目，青島海洋化工廠）；MCI GEL CHP 20P（日本三菱化學(xué)公司）；D101大孔吸附樹脂（天津興南允能高分子技術(shù)有限公司）；ODS中壓色譜柱填料（日本YMC公司）；Sephadex LH-20（Pharmacia 公司）；化學(xué)試劑均為分析純（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.3試驗(yàn)方法

斑鳩菊全草5 kg，粉碎，以95%乙醇加熱回流提取3次，將提取液合并濃縮至無醇味。濃縮液石油醚萃取后乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液蒸干，得浸膏82 g。

將浸膏少量硅膠拌樣，經(jīng)硅膠層析柱層析，氯仿-甲醇梯度洗脫，通過TLC檢測，并合并得到4個(gè)部分Fr I～I(xiàn)V。Fr I經(jīng)硅膠層析，石油醚-丙酮梯度洗脫，得化合物6（14.2 mg）和化合物7（10.5 mg）。Fr II經(jīng)過MCI樹脂（甲醇-水梯度洗脫），硅膠柱層析（氯仿-甲醇洗脫）、反相柱層析（甲醇-水梯度洗脫）以及凝膠柱層析（甲醇洗脫）進(jìn)行分離純化，得化合物3（8.8 mg）、化合物5（12.8 mg）。Fr III經(jīng)MCI樹脂（甲醇-水梯度洗脫），硅膠柱層析（氯仿-甲醇梯度洗脫）、MPLC以及凝膠柱層析（甲醇洗脫）進(jìn)行分離純化，得化合物1（19.6 mg）和化合物2（20.4 mg）。第三部分Fr IV，經(jīng)硅膠柱層析（氯仿-甲醇洗脫）、MPLC以及凝膠柱層析（甲醇洗脫）進(jìn)行分離純化，得化合物4（25.2 mg）。

2結(jié)果與分析

試驗(yàn)分離得到的7個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)見圖1，化合物1～7經(jīng)過核磁共振波譜技術(shù)測定，與參考文獻(xiàn)進(jìn)行對(duì)比，其中5個(gè)黃酮類化合物，2個(gè)甾體類化合物，7個(gè)化合物均為首次從斑鳩菊中分離得到。

2.1化合物1黃色粉末，紫外燈 254 nm下有暗紅色熒光，茴香醛-濃硫酸顯色呈黃色，AlCl3顯色呈黃色熒光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.51（s，1H，OH-5），8.18（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，H-6′），7.04（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，H-5′），6.56（1H，d，J=2.0Hz，H-8），6.29（1H，d，J=2.0Hz，H-6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：178.0（C-4），166.5（C-7），161.6（C-5），160.9（C-4′），159.8（C-2），159.1（C-9），137.5（C-3），132.0（C-2′），132.0（C-6′），124.8（C-1′），117.8（C-3′），117.8（C-5′），105.4（C-10），99.98（C-6），96.0（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道的化合物山奈酚基本一致。

2.2化合物2

黃色粉末，紫外燈 254 nm下有暗紅色熒光，茴香醛-濃硫酸顯色呈黃色，AlCl3顯色呈黃色熒光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.97（s，1H，OH-5），7.47（1H，d，J=8.5 Hz，H-6′），7.37（1H，s，H-2′），6.87（1H，dd，J=8.5 Hz，H-5′），6.66（1H，s，H-3），6.65（1H，s，H-8）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：183.5（C-4），165.4（C-2），164.9（C-7），162.9（C-9），158.0（C-5），151.3（C-4′），147.9（C-3′），123.1（C-1′），120.4（C-6′），117.6（C-5′），114.7（C-2′），104.5（C-3），104.2（C-10），98.4（C-6），95.7（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道的化合物木犀草素基本一致。

2.3化合物3

黃色粉末，紫外燈 254 nm下有暗紅色熒光，茴香醛-濃硫酸顯色呈黃色，AlCl3顯色呈黃色熒光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.98（s，1H，OH-5），7.89（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′、H-6′），6.92（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′、 H-5′），6.73（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.43（1H，s，H-3），6.15（1H，d，J=2.0 Hz，H-6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：182.3（C-4），165.4（C-2），164.1（C-7），1628（C-5），162.3（C-4′），158.1（C-9），128.5（C-2′），128.5（C-6′），121.9（C-1′），116.4（C-3′），116.4（C-5′），104.6（C-10），103.5（C-3），99.5（C-6），94.4（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道的化合物芹菜素基本一致。

2.4化合物4

黃色粉末，紫外燈 254 nm下有暗紅色熒光，茴香醛-濃硫酸顯色呈黃色，AlCl3顯色呈黃色熒光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.98（s，1H，OH-5），7.70（1H，d，J=2.5 Hz，H-2′），7.56（1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6′），6.91（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），6.43（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），6.21（1H，d，J=2.5 Hz，H-6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：176.9（C-4），165.0（C-7），161.8（C-9），157.2（C-5），148.7（C-4′），147.9（C-2），146.1（C-3′），136.8（C-3），123.0（C-1′），121.0（C-6′），116.7（C-5′），116.1（C-2′），104.0（C-10），99.2（C-8），94.4（C-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的化合物槲皮素基本一致。

2.5化合物5

黃色粉末，茴香醛-濃硫酸顯色呈黃色，AlCl3顯色呈黃色熒光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：763（1H，d，J=6.4 Hz，H-5），6.89（1H，s，H-4′），6.75（1H，s，H-6′），6.75（1H，s，H-2′），6.49（1H，dd，J=6.4，2.4 Hz，H-6），6.32（1H，d，J=2.4 Hz，H-8），5.37（1H，dd，J=12.6，3.0 Hz，H-2），3.03（1H，dd，J=16.8，12.6 Hz，H-3a），2.62（1H，dd，J=16.8，3.0 Hz，H-3b）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：190.8（C-4），169.2（C-9），164.1（C-7），146.5（C-3′），146.1（C-5′），130.9（C-1′），129.3（C-5），118.8（C-2′），116.3（C-6′），116.2（C-10），115.2（C-4′），103.5（C-8），111.5（C-6），79.9（C-2），44.2（C-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道的化合物2（S）-7，3′，5′ -三羥基二氫黃酮基本一致。

2.6化合物6

白色粉末，茴香醛-濃硫酸顯色呈紅色。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：5.37（1H，brs，H-6），3.53（1H，m，H-3），1.00～0.60（6 × CH3）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：141.7（C-5），122.7（C-6），72.8（C-3），57.8（C-14），57.0（C-17），51.1（C-9），46.9（C-24），43.3（C-13），43.2（C-4），40.8（C-12），38.2（C-1），37.5（C-10），37.1（C-20），34.9（C-22），32.9（C-7），32.8（C-8），32.6（C-2），30.1（C-25），29.2（C-16），27.0（C-23），253（C-15），24.2（C-28），22.1（C-11），20.9（C-26），20.4（C-19），20.1（C-27），19.8（C-21），13.1（C-29），12.8（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的化合物谷甾醇基本一致。

2.7化合物7

白色粉末，茴香醛-濃硫酸顯色呈紅色。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：5.31（1H，brd，J=4.5 Hz，H-6），5.10（ 1H，dd，J=8.4，15.0 Hz，H-22），4.90（ 1H，dd，J= 8.4，15.0 Hz，H-23），3.53（ 1H，m，H-3），1.00-0.75（5 × CH3），0.69（3H，d，J=7.4 Hz，CH3）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：141.8（C-5），140.3（C-22），130.3（C-23），122.7（C-6），72.8（C-3），57.7（C-14），57.0（C-17），522（C-24），51.2（C-9），43.3（C-13），43.3（C-4），41.5（C-20），40.8（C-12），38.2（C-1），37.5（C-10），32.9（C-7），32.7（C-8），32.5（C-25），32.3（C-2），29.9（C-16），26.4（C-28），25.3（C-15），22.2（C-26），22.2（C-21），22.1（C-11），20.4（C-19），20.1（C-27），13.4（C-18），13.1（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道的化合物豆甾醇基本一致。

3結(jié)論

斑鳩菊屬于菊科斑鳩菊屬的植物，目前對(duì)該植物地上全草化學(xué)成分的研究鮮見報(bào)道。該研究成果豐富了對(duì)該植物化學(xué)成分的認(rèn)知。通過系統(tǒng)分離純化，從該植物全草乙醇提取物中分離鑒定了7個(gè)化合物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定分別為山奈酚、木犀草素、芹菜素、槲皮素、2（S）-7，3′，5′-三羥基二氫黃酮、谷甾醇、豆甾醇，其中5個(gè)黃酮類化合物，2個(gè)甾體類化合物，7個(gè)化合物均為首次從該植物中分離得到。

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