臍血血細胞參數生物參考區間的建立與研究

陳小燕 杜琪

【摘要】目的 建立魯南蘇北地區新生兒臍血血細胞參數的生物參考區間，研究新生兒性別、胎齡、分娩方式與產婦年齡對臍血血細胞參數的影響。方法 收集2016年1月～2016年12月在臨沂市婦兒童醫院出生的新生兒臍血共2280例，標本采用EDTA-K2抗凝。用Beckman公司的DXH800全血動血細胞分析儀檢測白細胞計數、紅細胞計數、網織紅細胞計數、有核紅細胞計數等24項血細胞參數。各參數的生物區間統計采用均值與標準差表示或百分位數法來建立。不同組間的比較采用Mann-Whitney U檢驗。結果 共有2280例臍血標本納入研究，建立了臍血24項血細胞參數的生物區間。性別、分娩方式、胎齡是臍血全血細胞分析參數的影響因素。不同的產婦年齡組對臍血血細胞參數沒有顯著差異。結論 建立了魯南地區臍血24項血細胞參數的生物區間。新生兒性別、分娩方式與胎齡是影響臍血血細胞參數的重要因素。

【關鍵詞】臍血；生物區間

【中圖分類號】R722 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.6..02

【Abstract】Objective To build the reference ranges of umbilical cord blood cell parameters among healthy newborns， to investigate the effects of sex， gestational age，mode of delivery and mother age on umbilical cord blood cell counting.Methods Umbilical cord blood samples of 2280 nowborns were collected from January 2016 to December 2016 in Linyi Maternity and Childrens Hospital.24 parameters were tested by an automated hematologic analyzer（Beckman DXH800）.The reference ranges were built with mean and standard deviation or percentile.Mann-Whitney U were used to compare the difference between two groups.Results 2280 umbilical cord blood were enrolled in this study and the reference value of 24 parameters were built. Sex of newborns，the mode of delivery， gestational age had an effect the reference range.The maternal age had no effect on umbilical cord blood cell parameters.Conclusion 24 reference values of umbilical cord blood cell parameters were built for newborns of South Shandong Province.Newborn sex， the mode of delivery，gestational age influenced umbilical cord blood cell parameters. But maternal age had no effect on it.

【Key Word】Umbilical cord blood； biological interval

1 簡 介

胎兒娩出后，及時進行臍帶結扎并離斷，將殘留在臍帶內以及胎盤近胎兒側血管內的血液收集，可作為新生兒最早的血液標本，臍帶血在新生兒諸多常見疾病中起到良好的預測作用，因而近年來被科研工作者廣泛重視。對新生兒來說，順利進行靜脈穿刺并采集足夠多的標本是一件非常困難的事，對健康狀況較差的患兒或早產兒來說更是如此。采血對新生兒的健康產生影響，發生血栓栓塞、動脈痙攣甚至局部壞死等[1]。而臍血為剛出生的新生兒的血液檢測提供了可替代的選擇[2]。

臍血全血細胞計數是最為廣泛應用于評估新生兒臨床狀況的實驗室檢查之一。可對全身狀況進行初步的評估，有利于疾病的診斷和鑒別診斷。可以為新生兒疾病的早期診斷提供及時有效、創傷性小的檢查方式。臍帶血全血細胞分析的各個檢測指標往往會因為孕婦和嬰兒的生理狀態不同而發生變化。因此建立一個全面而準確的生物參考區間是合理利用臍血全血細胞計數對新生兒狀況進行評估的前提。因此建立本地區本實驗室臍血全血細胞分類計數的生物參考區間具有重要的臨床意義。

2 方法與材料

2.1 臍血采集

2.1.1 研究對象的選擇

選擇在2016年1月～2016年12月在臨沂市婦婦兒童醫院出生的健康新生兒共2280例，產婦年齡22～45歲。

2.1.2 臍血采集

采用臍靜脈穿刺法，采集前先準備含EDTA-K2抗凝劑的BD公司生產的抗凝管一支，放在無菌臺，待新生兒娩出后，在距離臍輪約5～8 cm處用止血鉗夾住臍帶的兩端，于兩鉗之間剪斷臍帶，兩分鐘內在胎盤的一端選擇臍靜脈，消毒后用采血針向著胎盤最粗臍靜脈的方向穿刺，約采集2 mL的臍帶血，注入含有EDTA-K2抗凝劑的試管中，立即顛倒混勻5～8次，1小時內送至實驗室。肉眼觀察標本是否有凝塊、溶血等標本不合格的現象，剔除不合格的標本。于2小時內完成血細胞計數與分類。

2.2 臍血血細胞檢測

2.2.1 檢測儀器與試劑

用Beckman公司生產的DXH800全血動血細胞分析儀進行血液常規檢測，試劑為該公司配套產品。利用上述試劑與儀器對臍血進行血細胞自動計數，并自動進行白細胞分類，完全按照儀器與試劑生產廠家的操作說明進行。

2.2.2 檢測項目

白細胞、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比、中性粒細胞百分比、嗜酸粒細胞百分比、嗜堿粒細胞百分比、淋巴細胞絕對值、單核細胞絕對值、中性粒細胞絕對值、嗜酸粒細胞絕對值、嗜堿粒細胞絕對值、紅細胞、血紅蛋白、紅細胞壓積、紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白濃度、紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞體積分布寬度、有核紅細胞計數、網織紅細胞計數、血小板、血小板分布寬度、血小板壓積、大血小板比例共24個指標。

2.3 判斷生物區間的建立是否需要分組

按新生兒性別將標本分為男性組和女性組；按分娩方式將標本分為剖宮產組和經陰分娩組；按出生時新生兒的胎齡，將標本分為早產、足月、過期產三組。按產婦年齡將標本分為≥35歲和<35歲組。統計分析各組之間臍帶血全血細胞分析24項指標是否有顯著差異。有顯著差異的項目分別建立生物參考區間，無顯著差異的項目則不再進行分組，建立一個通用的生物參考區間。

2.4 統計學方法

檢測數據中是否有離群值，對各項指標進行正態性檢驗，采用SPSS 18.0統計學軟件分析。如果服從正態分布，則各項指標的參考值范圍用均值與標準差來進行估計，雙側采用x±1.96s確定參考區間，單側則采用x±1.64s。如果為偏態分布，則用百分位數法，雙側采用P2.5-P97.5。單側則采用小于P5或大于P95。

3 結 果

3.1 男性新生兒與女性新生兒臍血血細胞參數的比較

根據新生兒性別，將所有標本分為男、女兩組。對臍血全血細胞分析各項指標進行分析，其中紅細胞（P=0.005）、血紅蛋白（P=0.002）、白細胞（P=0.011）、血小板（P=0.021）、血小板壓積（P=0.032）在男女新生兒之間具有顯著性差異，其他項目之間沒有顯著性差異。

3.2 分娩方式對臍血全血細胞分析各項參數的影響

根據分娩方式的不同，臍血被分為經陰分娩組與剖宮產組，將臍血全血細胞分析各項指標進行分析，其中紅細胞（P=0.009）、血紅蛋白（P<0.001）、紅細胞壓積（P<0.001）、有核紅細胞（P<0.001）、血小板（P=0.009）在經陰分娩組與剖宮產組之間具有顯著性差異，其他項目之間沒有顯著性差異。

3.3 不同胎齡新生兒臍血全血細胞分析比較表

根據分娩胎齡的不同，將臍血標本分為早產組與足月產組和過期產組，對臍血全血細胞分析各項指標進行分析，其中紅細胞（P=0.020）、血紅蛋白（P=0.030）、紅細胞壓積（P=0.041）、紅細胞平均體積（P=0.001）、有核紅細胞（P=0.032）、網織紅細胞（P=0.011）、血小板（P=0.031）、血小板壓積（P=0.035）在三組之間具有顯著性差異，其他項目之間沒有顯著性差異。

4 討 論

臍血對于剛出生的新生兒來說，是理想的實驗室檢查的標本來源。它不僅能反映胎兒造血系統的狀況，也能反映新生兒在圍生期的狀況，如圍生期窒息，胎糞污染、絨毛膜羊膜炎等[4]。臍血全血細胞分析與諸多因素有關，以往的研究表明，新生兒在宮內發生的情況，如宮內窒息、感染、新生兒溶血均會影響全血細胞分析的結果。有研究表明，胎兒的分娩方式、新生兒體重、胎盤娩出方式均可影響臍血采集質和量。宮內感染時，新生兒臍血與正常新生兒的白細胞等參數有顯著差異[5]。臍血與成人或兒童期的血液標本有很大不同，白細胞、網織紅細胞、白蛋白、免疫球蛋白、尿素氮等都存在顯著差異[6]，因此不能用成人的血細胞檢測的生物參考區間來評估新生兒的臍血標本。臍血與兒童期血液標本也存在很大差異[7]。因此，需要單獨建立臍血的生物參考區間，才能在臨床上進行更好的應用。

Yu Hsun Chang等研究發現，新生兒性別對臍帶血有核紅細胞計數、MCHC的影響有統計學意義[8]。Lee等[4]進行的研究中，性別對臍帶血中嗜堿性粒細胞百分比和有核紅細胞比例有明顯影響。我們的研究發現除紅細胞、白細胞、血小板、血小板壓積與性別有關外，血紅蛋白濃度也與性別有關，但MCV、MCH、MCHC與性別無關。

Lee等進行的研究中，分娩方式對單核細胞、嗜堿性粒細胞有一定的影響[4]。而Yu-Hsun Chang等進行的研究發現，剖腹產影響臍血中紅細胞、血紅蛋白、紅細胞壓積、和血小板計數、白細胞計數及部分白細胞分類結果，但對MCV、MCH、MCHC沒有顯著影響[8]。在我們的研究中，剖腹產的新生兒臍血中紅細胞、血紅蛋白、紅細胞壓積、有核紅細胞計數、血小板計數都較經陰分娩的新生兒低。

毛維玉等研究了孕20-24周的臍靜脈穿刺標本的白細胞、紅細胞等血細胞參數，與成人相比，具有顯著性差異[11]。我們的研究中，早產兒與足月兒及過期產的新生兒相比，紅細胞計數、血紅蛋白、紅細胞壓積增高，而MCV，有核紅細胞、網織紅細胞計數、血小板、血小板壓積有所下降。

參考文獻

[1] Ramasethu J.Complications of vascular catheters in the neonatal intensive care unit[J].Clin Perinatol， 2008，35（1）：199-222.

[2] Lee J C，Ahern T P，Chaves F P，et al.Utility of hematologic and volume，conductivity，and scatter parameters from umbilical cord blood in predicting chorioamnionitis[J].Int J Lab Hematol，2010，32（3）：351-359.

[3] Walka M M，Sonntag J，Kage A，et al.Complete blood counts from umbilical cords of healthy term newborns by two automated cytometers[J].Acta Haematol，1998，100（4）：167-173.

[4] Lee H R，Shin S，Yoon J H，et al.[Complete blood count reference values of donated cord blood from Korean neonates][J]. Korean J Lab Med，2009，29（3）：179-184.

[5] 毛維玉.581例臍帶血細胞各參數結果分析[J].中國優生與遺傳雜志， 2005（07）：75-76.