三七皂苷對硫化氫致豚鼠急性肺損傷的治病機制的研究

陶政華 劉洪銓

[摘要] 目的 觀察三七皂苷（SAT）對豚鼠肺損傷的治療作用并研究其作用機制。 方法 120只豚鼠隨機分為T0組、TS組、SAT組、FS組。采用硫化氫制備豚鼠肺損傷模型，構模8 h后停止給藥，乙醚麻醉動物，分別于7 h、14 h、21 h及24 h時間點觀測其肺損傷程度及病理變化。 結果 在各時間點觀察：SAT能有效降低SWW濃度及肺靜脈高壓，與T0組、TS組比較差異具有統計學意義（P<0.05）；但SAT與激素聯合治療效果差異并不明顯，與FS組比較差異無統計學意義（P>0.05）。 結論 SAT能有效抑制硫化氫引起的肺損傷進程。

[關鍵詞] 三七總皂苷；硫化氫；急性肺損傷；肺靜脈壓

[中圖分類號] R285.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）08-0032-03

Mechanism of panax notoginseng saponins on acute lung injury caused by hydrogen sulfide in guinea pigs

TAO Zhenghua LIU Hongquan

Hun'nan District Central Hospital of Shenyang City， Shenyang 110000， China

[Abstract] Objective To investigate the effective and mechanism of panax notoginseng saponins（SAT） on acute lung injury（ALI） caused by hydrogen sulfide in guinea pigs. Methods 120 guinea pigs were randomized into group T0， group TS， group SAT and group FS. The ALI model of guinea pigs was established by hydrogen sulfide. The drug was removed 8 hours after the model was established. The animals were anaesthetized by aether. The degree of lung injury and pathological changes were observed at 7th， 14th， 21st and 24th hour. Results Compared with group T0 and TS， SAT could decrease the level of SWW and high pulmonary venous pressure significantly at every time point（P<0.05）. However， compared with group FS， the effectiveness of SAT was not significantly different from that of combined treatment of hormone（P>0.05）. Conclusion SAT could inhibit the process of lung injury caused by hydrogen sulfide effectively.

[Key words] Total saponins of panax notoginseng； Hydrogen sulfide； Acute lung injury； Pulmonary venous pressure

三七（Pseudo-ginseng）作為一種重要中藥材，得到臨床廣泛的應用，對其藥理研究也被現在的中外學者不斷論述，但是多都停留在分子前水平，通常為三七總皂苷（SAT）[1]。本實驗即在此基礎上探尋SAT對阻止一些急性損傷因素中所起的關鍵作用[2]。肺水腫常是某些損傷性疾病的前期癥狀，盡管病因多種，但病理基礎基本相同[3]，實驗中以硫化氫作為致模藥物，選擇豚鼠構造肺水腫模型[4]，實驗前經過反復測試得出標準構模時間、標本重量、藥物濃度等重要參數，實驗證實三七皂苷應用于急性肺損傷治療，能夠有效降低肺靜脈高壓及SWW濃度，阻止急性肺水腫發展，為臨床應用提供重要依據。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1動物 健康雄性豚鼠：沈陽醫學院動物模型中心Sy1703-S003組120只，體重310～350 g，平均340 g。

1.1.2構模材料 硫化氫（沈陽景泉特種氣體廠，H2S，Q1000～07號）。

1.1.3實驗藥品、儀器、設備 見表1。

1.2 實驗方法

①動物模型的構建：硫化氫（50 mL/L）密室200 m3，將豚鼠全部投放密室經8 h取出，進行乙醚罩吸麻醉，1.5%戊巴比妥鈉注射液靜脈加強麻醉。②分組：將120只構型豚鼠隨機分成四組，每組30只，置于實驗臺連接實驗設備、儀器。Ⅰ組對照組（T0組）：100 mL生理鹽水肺靜脈連續滴注；Ⅱ組（TS組）：5 mg地塞米松加生理鹽水100 mL肺靜脈連續滴注；Ⅲ組（SAT組）：生理鹽水100 mL加三七皂苷0.25 g配制成濃度0.25%肺靜脈連續滴注；Ⅳ組（FS組）：在SAT組基礎上聯合地塞米松5 mg肺靜脈連續滴注，測量肺毛細血管靜脈壓（PCWP）值，記錄肺毛細血管靜脈壓值、血氧飽和度（FIO2）值，各組于造模后7 h、14 h、21 h、24 h觀察記錄實驗數據。

1.3指標檢測及方法

觀測體重變化，肺靜脈壓檢壓計測量PCWP，采用高效液相色譜泵測得硫化顆粒濃度，血生化儀測定FIO2濃度。

1.4統計學處理

應用Statistical Program for Social 17進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

2.1各組豚鼠不同時間觀測點肺組織硫化顆粒濃度的情況

觀察每個時間觀測點，SAT組降低SWW濃度作用明顯，與T0組比較差異具有統計學意義（P<0.05）。SAT加入地塞米松SWW濃度變化并不明顯，與FS組比較差異無統計學意義（P>0.05），TS組與T0組比較降低SWW濃度明顯，兩組比較差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.2三七皂苷對急性肺損傷的影響

實驗24 h時，對四組動物比較體重變化，SWW、PCWP、FIO2等指標綜合比較，SAT組抗損傷作用明顯，與T0、TS組比較差異具有統計學意義（P<0.01）。SAT加入地塞米松效果并無明顯差異，與FS組比較差異無統計學意義（P>0.05）。見表3。

3 討論

急性肺損傷是包括肺組織損傷、黏膜滲出、炎性顆粒沉積、基底膜充血等一系列病理綜合性反應[5]。臨床上每年都會有很多誤吸，或中毒患者就診，如何快速緩解呼吸窘迫癥狀成為治療的關鍵。產生肺損傷機制如下：（1）外部因素，由于組織損傷，炎性滲出，發生低氧、缺血情況，進而肺靜脈壓增高[6]，在此基礎上極易發生心功能下降，結果造成損傷區域的供血障礙。（2）內部因素，由于凝血因子受到SWW對造血系統的影響，凝血因子明顯減少，誘發出凝血時的延長，極易發生DIC[7]。（3）介子因素，金屬蛋白酶-2是分解-SS-鍵的關鍵酶，早期損傷，該酶活性降低，隨著SWW濃度增加，炎性顆粒易于沉積肺間質結構中，同時SWW也可以直接破壞肺部的組織結構，炎性顆粒與SWW共同加重組織的損傷[8]。所以，肺毛細血管靜脈壓增高，SWW濃度增加是產生肺損傷的兩個關鍵因素[9]，對于阻斷這兩個因素在肺損傷中所起的作用在臨床被廣泛研究，但主要是停留在激素對抗機體應激反應的方面，雖然激素有一定的治療作用，但總得效果并不滿意。基于這種情況，此次研究以豚鼠為實驗対像，探尋三七皂苷治療急性肺損傷上取得的進展。實驗中SAT具有降低硫化顆粒濃度、阻止肺損傷加重作用，與T0組比較有統計學意義（P<0.01）。同時對各組動物模型體重變化、SSW濃度、PCWP、FIO2等綜合指標進行觀察，SAT除具有明顯抗損傷、降低SWW濃度作用，同時也具有類激素作用。其抗水腫作用與地塞米松基本相似，能抑制水腫特定因子的產生[10]，同時激活 TGF-β1[11]，并通過TGF-β1表達抑制炎性細胞進入氣道上皮[12]。當阻斷因素SAT介入[13]，可避免細胞凋亡因子失衡[14]，損傷減輕，達到治療目的。

結論，SAT中保留三七生藥中多種有效成分單體皂苷[15]，在中醫領域三七皂苷多應用于損傷性疾病的治療，其有活血化瘀作用，可以明顯消除組織水腫。三七皂苷除抗水腫外，亦可以抑制SWW形成，減輕其對肺上皮細胞基底膜的損傷，SAT有較強的活化血小板作用，如果早期應用可以使血小板活性增加，對損傷區毛細血管早期凝血有很好的作用，使出凝血時維持在一個平衡的水平。同時SAT 存在類內源性抗凝活性，使損傷區域微毛細血管開放形成有效循環，降低肺靜脈高壓，肺部微循環得到有效改善，加速機體組織對損傷的修復，增強機體抗損傷的作用，綜合效果優于激素。所以三七皂苷在急性肺損傷治療方面起著重要作用。

[參考文獻]

[1] 李華，譚炳仁.三七粉防治損傷性疾病中的作用機制探討[J].職業與健康，2015，（12）： 1611-1613.

[2] Sehgal I，Thompson TC. Novel regulation of type Ⅳ collagenase（matrix metalloproteinase-9 and-2）activities by transforming growth factor-β1 in human prostate cancer cell lines[J]. Molecular Biology of the Cell，2016，10（2）：407-416.

[3] 陳軼群，李軍.各種動物模型的構模與實驗研究進展[J].中國中醫急癥，2015，21（4）： 605-607.

[4] 張震宇，陳明.三七總皂苷改善大鼠損傷模型氧化應激的研究[J].中國醫藥雜志，2014，34（1）：56-61.

[5] 陳英. 三七總甙的藥理研究及臨床應用進展[J]. 廣西醫學，2016，20（6）： 1109-1112.

[6] 朱鵬程，黃楚泉.急性肺水腫36例臨床分析[J].嶺南急診醫學雜志，2007，12（6）：101-103.

[7] 徐衛華，金丹群，沈楊.32例小兒急性肺水腫臨床分析[J].安徽醫學，2010，6（31）：53-54.

[8] 馮益真，張瑞鳳，謝榮銀，等. 實用小兒呼吸病學[M].北京：北京醫科大學中國協和醫科大學聯合出版社，2015：63-64.

[9] 蔡栩栩，劉春峰.神經源性肺水腫[J]. 山東醫學，2017， 14（2）：106-108.

[10] 楊藻宸.藥理學總論[M].北京：人民衛生出版社，2015：43-47.

[11] 楊宗梅，趙曉霞.妊娠期急性肺水腫的臨床探討[J]. 疑難病雜志，2017，5（8）：12-15.

[12] 周淑佩，鄭振輝. 人類疾病動物模型的管理要點[J].中華醫學科研管理雜志，2015，25（2）：129-130.

[13] 王耀宏，趙金垣，崔書杰，等.急性硫化氫中毒遲發性腦病的動物模型制備研究[J].中國職業醫學，2015，31（1）：5-10.

[14] 郭曉紅，張肇玖，張曉冬，等.大鼠急性肺損傷模型建立的實驗研究[J].中國藥物濫用防治雜志，2016，18（1）：32-35.

[15] 徐萍.現代毒理醫學[M].上海：上海醫科大學出版社，2017：25-42.

（收稿日期：2017-12-10）