血涂片法復核在血小板計數減少的應用價值

楊良，楊斌

(銅仁市人民醫院檢驗科，貴州 銅仁 554300)

血細胞分析儀計數血小板，是各實驗室常用和必不可少的快速檢測方法，作為血常規檢查項目之一的血小板計數，其檢查結果的準確性越來越受臨床醫生和患者關注。目前所有計數血小板的方法對于血小板減少的標本，都存在不少缺陷，影響因素也較多，其準確性都比較差，血細胞分析儀需雖可以用低值血小板計數模式計數，對低值血小板計數來說，這種計數模式計數的結果準確性是否可靠值得探討[1]。特別對極低血小板來說，血涂片法其價值更大[2]，本文采用血涂片間接計數血小板的方法，探討血涂片法計數血小板減少的復核作用[3]。

1 材料與方法

1材料

1.1 標本采集 收集2016年10月至2017年4月在本院住院及門診病人標本，共147例，本次實驗血小板低組（50～100）×109/L 組 60例；血小板較低組 （20～50）×109/L 52 例； 血小板極低組＜20×109/L 35例；以同期血液分析儀所作質控結果為標準，所有標本均為EDTA-K2抗凝靜脈血。

1.2 儀器 Sysmex-XN1000血液分析儀、奧林巴斯顯微鏡、血細胞計數板。

1.3 試劑 Sysmex-XN1000血液分析儀及其配套試劑，瑞吉氏染液、10ɡ/L草酸銨稀釋液。

2 方法

2.1 血液分析儀法 Sysmex XN1000全自動血液分析儀檢測血小板，血液中的血細胞成分通過檢測通道時產生脈沖信號，根據白細胞、紅細胞和血小板的脈沖信號強弱歸類收集，計數2～20fl的脈沖信號數值為血小板數值。每日進行高中低3個水平質控且在控。所有標本采集后于1h內完成檢測。

2.2 手工法計數 顯微鏡手工血小板計數，利用草酸銨稀釋液，按《全國臨床檢驗操作規程》第4版操作。

2.3 血涂片法 取抗凝血10μl涂片，經瑞氏染色后計數血涂片中的血小板數。在油鏡下選擇血涂片上細胞分布均勻且細胞間無重疊的區域，在計數1000個紅細胞的同時計數血小板數，求得血小板與紅細胞比值，將此比值乘以同一份標本經血細胞分析儀測定所得的紅細胞數，得到該血涂片法計數的血小板數。

2.4 統計 實驗數據采用SPSS軟件配對t檢驗比較及和P值判斷。

2 結果

見表1。

表1 47例血小板計數減少3種計數方法的比較（x±s）

3 討論

血細胞分析儀計數血小板，是各實驗室常用和必不可少的快速檢測方法，作為目前臨床常用的自動化血液分析儀，其檢測標本的數量及速度是手工法所無法比擬的[4]。雖然血細胞分析儀具有速度快和批量大的優點，但也有血涂片法不可替代的，尤其在近年來對血涂片的復核要求更為突出。國際血液學組織提出了顯微鏡復檢的41條建議性標準，得到中國血液檢驗學界的密切關注，同時也是很多實驗室作為血涂片復核的參考標準。

目前所有的血小板計數方法，都存在不少缺陷，尤其對低值血小板計數來說，體現得更為重要。血液分析儀對血小板計數減少，尤其是極低值血小板標本，不能很好地反映血小板的實際數量，此時往往需要依靠顯微鏡血涂片觀察輔助診斷血小板減少癥。文獻報道血涂片法血小板計數與血細胞分析儀計數結果差別不大，國內也有相關文獻報道[5]，認為儀器法對檢測血小板低值標本的準確性較差，應以血小板手工計數法復檢，以保證可靠性[6]。本次實驗采用血涂片方法來計數血小板數量，經在顯微鏡下仔細辨認與識別血小板的形態與大小，從而進行間接計數。我們對147例血小板減少標本進行計數，血小板低組和較低組，血涂片法分別與血液分析儀法及手工法比較，P值均＞0.05。血小板極低組，血涂片法分別與血液分析儀法及手工法比較，P值＜0.01，差異有統計學意義，與文獻報道基本吻合[7]；血涂片法計數血小板，不僅可以對血液分析儀計數進行復核，還可以觀察血小板形態及大小，區別和判斷所謂“非血小板顆粒”對計數的影響。血涂片鏡檢的另一優點是可直觀地觀察到巨大血小板、纖維蛋白絲、血小板假性聚集等，進而采取其它方法及時校正血小板計數，得到真實的血小板結果[8]。這些情況僅通過儀器重新復做血小板是無法解決的。此外，對血小板減低的標本進行血涂片血小板計數，可在一定程度減少標本的復做頻率，降低檢驗成本，提高了準確率。

采用血涂片可以直觀地間接計數血小板，對血液分析儀結果進行復核，這對血小板減少者來說尤為重要[9]。對于血小板減少癥以及需要輸注血小板的患者來說，輸注血小板的療效評價，主要是觀察臨床癥狀是否得到改善，輸入的血小板進入患者循環血液后，血小板計數在短期內可能會升高明顯，但可能很快游離到出血部位參與止血而被消耗，因此，計數輸注血小板后的血小板數量有十分重要的臨床意義。同時血涂片法還具有很好的保存性，當血小板數量正常，而形態不正常時，有利于辨認血小板形態，同時更加有助于臨床疾病的診斷治療。總之，血涂片計數血小板可以用于對血液分析儀的復核[10]，是值得推廣應用、快速、簡便之方法，具有較高的臨床應用價值。

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[4]呂泰霞，付行才，張益紅.Bayer2120血液分析儀與血涂片結果相關性研究[J].實驗與檢驗醫學，2009，27（5）：557-557.

[5]陳軍浩，王以立，顧光煜，等.血小板計數儀器法與手工法測定低血小板樣品的評價[J].臨床檢驗雜志，1997，15(6)：364-365.

[6]戴宏斌，李強.血涂片法對血球儀計數血小板的復核探討[J].臨床輸血與檢驗雜志，2012，14（1）：79-80.

[7]蘇麗莎.血涂片在血細胞計數血小板異常結果中的作用[J].實用醫技雜志，2015，1（22）：55-56.

[8]沙學明，范廣智，趙天才.觀察血涂片對血液分析儀血小板計數復核作用的探討[J].中國醫學檢驗雜志，2009，10（3）：161-161.

[9]車軼群，沈迪，董瑩瑩，等.3種方法檢測血小板的對比分析[J].北京醫學，2011，7（3）：593-594.

[10]黎紅.血涂片法對血液分析儀的血小板計數復核作用[J].基層醫學論壇，2011，35（3）：1145-1146.