2016年青海省部分州縣羔羊包蟲免疫抗體檢測

王曉潤

(青海省動物疫病預防控制中心，青海 西寧 810001)

包蟲病(hydatid disease)，又稱細粒棘球絳蟲病，犬為終末宿主、家畜是中間宿主；其傳播途徑主要是犬的小腸寄生的細粒棘球絳蟲發育成熟后排出的大量蟲卵，而被蟲卵污染的土壤、草地、水源、犬的皮毛，被人和家畜食入，在家畜和人體內的臟器中發育成包蟲囊，囊內有無數的原頭蚴，當感染動物屠宰后，含原頭蚴的家畜肝、肺囊被犬生食，囊中的許多原頭蚴在犬的小腸寄生發育，45 d 發育成成蟲，成蟲排出大量蟲卵，周而復始，造成包蟲病的傳播流行。要在傳播途徑上切斷傳播源，主要手段：一是對家畜進行包蟲病疫苗免疫，使之包蟲卵不能在家畜肝、肺、脾等實質器官上寄生，形成包囊，對含有包蟲囊的家畜臟器要嚴禁生食喂犬，切斷包蟲對犬的感染；二是對野犬撲殺，對家犬拴養并采取“犬犬投藥、月月驅蟲”的管理辦法，對排出的犬糞進行焚燒、深埋，控制犬對包蟲病的感染和傳播。

2016年我們對省內8個州(市)、24個縣(市)的960只羔羊，進行了羔羊包蟲免疫抗體檢測試驗。

1 材料與方法

1.1 樣品采集 在省內12個縣，采集3月齡注射了包蟲免疫疫苗的羔羊血清960份，進行羔羊免疫抗體檢測。

1.2 診斷試劑 重慶澳龍生物制品有限公司生產的羊棘球蚴(包蟲)ELISA抗體檢測試劑盒。

1.3 方法 羔羊包蟲病免疫抗體檢測，按常規方法制備血清。

濃縮的洗滌液恢復至室溫(25 ℃左右)，并搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作25倍稀釋。

試劑稀釋和樣品稀釋：在血清稀釋板中按1∶100的體積稀釋待檢血清樣品(198 μL樣品稀釋液中加2 μL待檢血清樣品)。對照稀釋：在血清稀釋板中按1∶100分別稀釋陽性對照和陰性對照血清。 二抗稀釋：用樣品稀釋液按1∶50～100稀釋酶標二抗。取抗原包被板，分別將稀釋好的待檢血清和對照各取100 μL加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰性對照和陽性對照各設2孔，每孔100 μL。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)，置37 ℃溫育60 min。甩掉板中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200 μL，靜置3分鐘倒掉，再在吸水紙上拍干，共洗5次。每孔加入稀釋好的兔抗山羊酶標二抗100 μL，置37 ℃恒溫箱溫育60 min。洗滌5次,方法同前。每次在干凈吸水紙上拍干。每孔先加底物液A50 μL、再加底物液B 50 μL，室溫避光顯色10 min。每孔加終止液50 μL，10 min內測定結果。

結果判定：在酶標儀上測各孔OD450nm值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD450nm值≥0.6，陰性對照孔平均OD450nm值<0.3。樣品OD450nm值>0.6，判為陽性；樣品OD450nm值<0.3，判為陰性；0.3～0.6之間為疑似。

2 結果

2016年本省級動物疫控機構共檢測24個縣(市、區)免疫包蟲羔羊血清960份，合格784份，合格率81.67%，見表1。

表1 2016年青海部分地區羔羊細粒棘球絳蟲疫苗免疫抗體檢測結果 單位：份

3 討論

根據本次羔羊血清檢測，羔羊免疫血清抗體24縣總體達到81.67%，達到國家規定的70%免疫抗體標準要求，總體上西寧、海東市等農區都達到了抗體合格標準，但是牧區海西州都蘭縣、海北州門源縣、海北州剛察縣、玉樹州稱多縣、雜多縣、海南州興海等6縣未達到國家規定免疫抗體合格70%標準，占被檢測24個縣的25%，我們分析原因：一是農業區犬少于牧區，羊感染包蟲機率低；二是牧區犬的控制存在一定困難，特別是流浪犬，無法對其驅蟲，撲殺又有當地牧民阻攔，很不好處理；三是牧區不達標的這6縣，鄉鎮獸醫站歸鄉鎮府管理，對羔羊的包蟲免疫疫苗注射可能不到位，需要對這6個縣的包蟲羔羊免疫加強補免工作，落實責任，不留死角。我們一定要將此項工作做細，早日完成中央和省政府安排部署的包蟲病防控工作，為下一步完全控制青海省內動物包蟲病的流行而努力。

參考文獻：

[1] 李祥瑞.動物寄生蟲病彩色圖譜[M].北京：中國農業出版社，2004：36-38.