豬瘟高致病性豬藍耳病和口蹄疫母源抗體的測定及3種疫苗首免日齡的確定

李建玲 ， 趙 慶 ， 蔡擴軍 ， 王 濤 ， 任 皓 ， 蒲敬偉 ， 蘇 艷

(1.新疆農業大學動物醫學學院 ， 新疆 烏魯木齊 830052 ； 2.新疆烏魯木齊市動物疾病控制與診斷中心 ， 新疆 烏魯木齊 830063 ； 3.烏魯木齊市畜牧水產草原技術推廣中心 , 新疆 烏魯木齊 830063 ;4.新疆生產建設兵團第十二師畜牧獸醫工作站 ， 新疆 烏魯木齊 830009)

豬瘟(CSF)、高致病性豬藍耳病(HP-PRRS)和豬口蹄疫(FMD)3種疫病是威脅我國養豬業的主要疫病，疫苗接種是控制這3種疫病流行的主要措施。通過吮吸母豬的初乳，仔豬可獲得對CSF、HP-PRRS、FMD病毒的被動免疫保護，使仔豬在獲得疫苗免疫之前，免受這3種病毒的感染，然而母源抗體的存在會干擾仔豬首次免疫，母源抗體會中和疫苗病毒，影響免疫應答和抗體上升，導致空窗期的出現，不利于疫病預防[1]。因此，仔豬后期獲得堅強抗體保護力的關鍵在于確定3種疫苗的首免日齡，消除母源抗體干擾。一些養殖戶盲目照搬現有的免疫方案，根本不考慮自己豬場的實際情況，也不經過嚴格試驗來確定首免時間，豬群免疫抗體水平不能得到保證。為了減少免疫失敗，有效防控這3種豬病的發生，對初生哺乳仔豬進行了母源抗體消長的測定，確定3種疫苗的最佳首免日齡，以制定符合生產實際的免疫程序提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 在米東區三道壩鎮某養豬場選取4頭母豬剛剛生產的30頭仔豬進行試驗，4頭母豬在配種前1周分別免疫過CSF活疫苗(脾淋源)、HP-PRRS活疫苗(JXAI-R株)和豬O型FMD滅活疫苗(O/MYA98/XJ/2010株+O/GX/09-7株)。

1.2 檢測試劑 韓國金諾豬瘟病毒抗體(CSFV-Ab)C-ELISA檢測試劑盒，北京金諾百特科技有限公司總代理，批號：107HS479。

韓國金諾豬繁殖和呼吸綜合征病毒抗體(PRRSV-Ab)間接ELISA檢測試劑盒，由北京金諾百特科技有限公司總代理，批號：107HS483。

口蹄疫 0 型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，由中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產，批號：2014092301。

1.3 方法 在第0、1、7、14、21、28、35、42日齡，分別采集豬血液，離心、制備血清，將所有血清保存在-20 ℃冰箱中，集中檢測CSF、HP-PRRS和O型FMD的母源抗體。

1.3.1 CSF抗體檢測 用ELISA法(參照試劑盒說明書進行操作)檢測CSF母源抗體水平。試驗成立條件為：[陰性對照血清]OD450平均值>0.5；[陽性對照血清]OD450平均值<0.2。結果判定：樣品百分率PC≥40%，判為陽性；樣品百分率PC<40%，判為陰性。樣品阻斷率(%PC)=([陰性對照血清]OD450平均值-樣品OD450值)×100%/([陰性對照血清]OD450平均值-[陽性對照血清]OD450平均值)。

1.3.2 HP-PRRS抗體檢測 用ELISA法(參照試劑盒說明書進行操作)檢測HP-PRRS母源抗體水平。試驗成立條件為：[陽性對照血清]OD450平均值≥0.5；[陰性對照血清]OD450平均值≤0.3。結果判定：S/P值≥0.4，判為陽性；S/P值<0.3，判為陰性；0.3≤S/P值<0.4，判為可疑。S/P值=(樣品OD450值-[陰性對照血清]OD450平均值)/([陽性對照血清]OD450平均值-[陰性對照血清]OD450平均值)。

1.3.3 O型FMD抗體檢測 用液相阻斷ELISA法(參照試劑盒說明書進行操作)檢測O型FMD母源抗體水平。試驗成立條件為：病毒抗原對照平均OD492值在1.0～2.0范圍內；陽性對照血清抗體效價在1∶1 024 ±1 滴度；陰性對照血清抗體效價<1∶8。臨界值=病毒抗原對照平均OD492值×50%。樣品抗體效價≥1∶64為O型FMD抗體合格。

2 結果與分析

在第0、1、7、14、21、28、35、42日齡，分別對30頭仔豬采集血清，進行CSF、HP-PRRS和O型FMD母源抗體檢測，結果見表1、圖1～圖3。

表1 3種豬病母源抗體檢測結果統計

圖1 仔豬CSF母源抗體群體保護率趨勢

圖2 仔豬HP-PRRS母源抗體群體保護率趨勢

圖3 仔豬O型FMD母源抗體群體保護率趨勢

2.1 按照農業部重大動物疫病免疫方案的要求：CSF和HP-PRRS抗體ELISA檢測試驗抗體陽性判定為合格；O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試驗抗體效價在1∶64以上(含1∶64 )為合格；抗體合格，即認為免疫達到了保護要求，整體免疫抗體群體保護率≥70%為合格。從表1可以看出：試驗仔豬在28日齡時，CSF、HP-PRRS和FMD抗體陽性率分別是70%、73.3%和73.3%，隨后35日齡已經下降到63.3%、70%和66.7%，CSF和FMD母源抗體的保護率已低于臨界值70%，不能達到有效保護，而HP-PRRS母源抗體仍有保護，到42日齡突然驟減到46.7%。

2.2 通過圖1～圖3可知，仔豬在吃到初乳之前并沒有CSF、HP-PRRS和O型FMD抗體。其母源抗體全部來自母豬乳汁，試驗仔豬在1～7日齡時，母源抗體保護率迅速達到峰值；之后，隨著仔豬的生長，母源抗體水平逐漸呈現緩慢下降趨勢；35日齡以后，母源抗體水平下降速度加快。

2.3 從仔豬母源抗體群體保護率趨勢圖可以看出：CSF的母源抗體的持續期為28～32 d、HP-PRRS為30～35 d、豬FMD為29～34 d。

3 討論

3.1 本研究結果說明：仔豬的母源抗體主要通過母乳獲得，母豬并不能通過胎盤傳遞母源抗體；如果泌乳期母豬血清中有抗體水平，分析其與仔豬抗體的相關性更有意義；仔豬的母源抗體水平與仔豬的生長呈負相關；仔豬的母源抗體持續時間與母豬自身的抗體水平和仔豬是否吃初乳有關，因此要使仔豬獲得較高的母源抗體，應提高母豬的自身抗體并讓仔豬及時吃到初乳。

3.2 在確保不發病的情況下，根據3種疫病母源抗體的持續期，確定3種疫苗聯合免疫時的最佳首免日齡為28～35日齡。

3.3 在本試驗中，仔豬的母源抗體水平1～7日齡達到最高峰，7日齡之后，母源抗體逐漸衰減，并與日齡呈負相關。這與王波等認為的產后 1 日齡達到最高有一定差異，與姚俊庸等報道的7日齡仔豬母源抗體最高一致[2-3]。

3.4 保證母豬在泌乳前維持有高效的母源抗體是本研究成立的關鍵因素，因此生產實踐中應在母豬配種前對母豬的抗體進行血清學監測，對沒有產生抗體或產生抗體較弱的母豬應及時采取補免。其次，產生抗體較好的母豬在分娩后，要保證所有仔豬都能獲得母源抗體，先天性體格較大的仔豬更有優勢吃到初乳。對未吃到初乳的仔豬可以單獨飼喂以保證獲得母源抗體。

3.5 本文著重分析了母源抗體水平對首免日齡的影響，疫苗首免時間除了考慮母源抗體水平外，還應考慮發病的時間，受試驗條件限制，未做深入的研究分析。

參考文獻：

[1] 孟曉琴，曹世禎，卓春花，等．母源抗體對豬瘟疫苗免疫效果的影響[J].中國獸醫雜志，2013，49(1)：40-41.

[2] 王波，陳靜，王敏，等．仔豬豬瘟母源抗體消長規律[J].中國獸醫學報，2010，30(4)：453-455.

[3] 吳云飛，高寒松，鄺從明，等．豬瘟、藍耳病及豬O型口蹄疫母源抗體消長規律[J].畜牧獸醫雜志，2016，35(1)：29-32.