原發性干燥綜合征相關間質性肺病患者血清ROS水平變化及意義

白淑榮　沈　樂　吳　源　段學波　楊　朝　楊　靜　王　艷

(寧夏回族自治區人民醫院　西北民族大學第一附屬醫院呼吸內科，寧夏　銀川　750002)

1寧夏回族自治區人民醫院西北民族大學第一附屬醫院心血管內科

原發性干燥綜合征(PSS)為自身免疫性疾病中最常見的類型，主要累及淚腺、唾液腺等外分泌腺體，容易出現肺臟受累，表現為間質性肺疾病(ILD)，PSS-ILD早期呼吸癥狀不明顯，一旦發生肺纖維化，病情逆轉困難，是導致該病高致殘率和高死亡率的主要原因〔1〕，目前對PSS-ILD的發病過程尚未完全闡明。活性氧(ROS)是機體內重要的信號轉導分子，在肺間質纖維化的發病及形成過程中有重要作用，有研究顯示博來霉素誘導的肺纖維化模型大鼠的肺組織內ROS水平明顯升高，而用抗氧化藥物N乙酰半胱氨酸干預能明顯降低ROS水平，減輕肺上皮細胞損傷及肺纖維化程度〔2〕。前期研究結果顯示〔3〕核轉錄因子(NF)-κB及轉化生長因子(TGF)-β1可能參與了PSS-ILD的發病過程。本研究擬分析血清ROS水平與PSS-ILD臨床指標的相關性。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇2015年6月至2016年12月醫院收治的94例PSS患者，其中單純PSS組46例〔單純涎腺和(或)淚腺受累PSS患者〕，PSS-ILD組48例(僅伴肺間質損害PSS患者)，均符合2010年中華醫學會風濕病學分會制定的干燥綜合征診斷及治療指南〔4〕，均為初治患者；排除標準：既往肺結核患者，接受過免疫抑制劑和糖皮質激素等藥物治療，不符合診斷標準者，慢性支氣管炎、肺氣腫、支氣管哮喘、支氣管擴張、肺部腫瘤等呼吸系統疾病患者，慢性心、肝、腎功能不全者，長期吸煙者。94例患者均為女性，年齡60～70〔平均(65.4±3.2)〕歲，單純PSS組平均年齡(64.7±3.3)歲，PSS-ILD組平均年齡(66.0±3.5)歲。另外選取醫院同期健康體檢者50人為對照組，平均年齡(65.7±3.4)歲。各組基本臨床資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法患者入院后次日采集5 ml肘靜脈血液置于5 ml分離膠-促凝管中(操作過程中避免溶血)，室溫靜置30 min，3 000 r/min離心15 min，將上層血清裝入1.5 ml EP管中，每個EP管中分裝200 μl血清，做好標記后，行酶聯免疫吸附法(ELISA)測定。對照組：采集符合入組條件的健康志愿者5 ml肘靜脈血液，置于5 ml分離膠-促凝管中，后續處理同上。ELISA測定血清中ROS水平，結果以3次均值計算，與450 nm處測定吸光度計算ROS水平，并分析血清ROS水平與PSS-ILD臨床指標的相關性。記錄指標包括：免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM，C反應蛋白(CRP)，紅細胞沉降率(ESR)，補體C3、C4，類風濕因子(RF)，用力肺活量(FVC)，一口氣彌散量(TLCOSB)，動脈氧分壓PaO2，二氧化碳分壓(PaCO2)。

1.3統計學方法應用SPSS19.0軟件進行單因素方差分析、LSD檢驗、t檢驗和Pearson相關分析。

2　結　果

2.1單純PSS組及PSS-ILD組臨床指標比較PSS-ILD組血清CRP、FVC、TLCOSB、PaO2水平〔(14.5±4.7)mg/L、(1.45±0.95)L、(7.11±1.12)mmol·min-1·kPa-1、(81.21±5.87)mmHg〕明顯高于單純PSS組〔(7.8±3.6)mg/L、(0.96±0.35)L、(5.61±1.34)mmol·min-1·kPa-1、(55.12±4.19)mmHg，P<0.05〕，其余指標差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　單純PSS組及PSS-ILD組臨床指標比較

與單純PSS組比較：1)P<0.05

2.2各組血清ROS水平比較單純PSS組及PSS-ILD組血清ROS水平〔(768.59±117.89.69)pg/ml，(1 136.89±174.35) pg/ml〕均顯著高于對照組〔(420.56±87.69) pg/ml，P<0.05〕，PSS-ILD組顯著高于單純PSS組(P<0.05)。

2.3血清ROS水平與臨床指標的相關性分析單純PSS組及PSS-ILD組血清ROS水平與CRP水平呈正相關(r=0.44,0.55,P<0.05)；PSS-ILD組血清ROS與PaO2、FVC、TLCOB呈負相關(r=-0.54,-0.51,-0.48；均P<0.05)，與其余指標無相關性(P>0.05)。

3　討　論

生理條件機體抗氧化系統與ROS產生保持動態平衡，病理條件狀態下，機體抗氧化能力下降，自由基產生過多，導致氧化應激損傷〔5〕。ROS可由細胞正常代謝產生，也可由外源因素誘導產生，生理范圍內ROS在調節人體的正常生理功能如細胞凋亡、基因表達、信號轉導等方面起重要作用，但當ROS持續高濃度存在，極易與周圍生物大分子物質產生氧化反應，損害細胞的結構和功能，導致肺纖維化、癲癇、高血壓等發生〔6，7〕。研究發現〔8〕，ROS在博來霉素誘導的大鼠中肺組織內水平明顯升高，ROS可能參與了肺纖維化的形成過程，促進肺纖維化的發展，ROS水平在矽肺患者血清及其肺泡巨噬細胞中明顯增高。研究發現〔9〕，肺纖維化過程中可能存在ROS通過激活NF-κB途徑上調纖溶酶原激活物抑制劑基因表達，引起特發性肺間質纖維化患者肺組織中纖溶酶原激活物抑制劑活性增高，抑制纖溶蛋白酶的活性，導致細胞外膠原物質降解不及時，出現細胞外基質沉積，導致肺纖維化發生，提示ROS在矽肺及特發性肺間質纖維化等ILD的肺纖維化過程中發揮重要作用。

本研究結果提示ROS可能在PSS-TLD的發生發展中可能起重要作用，血清ROS水平與PSS繼發的ILD相關。另外，ROS可能與肺間質性炎癥密切相關，且血清ROS水平對于評估PSS患者肺間質嚴重程度有一定參考價值。

目前ROS-NF-κB-TGF-β1信號通路在人PSS-ILD的肺間質病變過程中是否起作用在國內未見報道，NF-κB在炎癥性疾病的病理過程中起信號轉導作用，當被激活后進入胞核中,在受到氧自由基、內毒素及紫外線等刺激時NF-κB可被激活,活化的NF-κB又可誘導細胞因子、生長因子如TGF-β1從而導致一些疾病的發生，有研究顯示〔10〕ROS可能通過激活NF-κB，活化的NF-κB誘導TGF-β1釋放，進而導致肺間質纖維化的形成，而TGF-β1是一種致纖維化的效應因子，它在組織損傷早期和組織修復期都促進肺纖維化的發生。本研究結果結合前期研究結果推測ROS-NF-κB-TGF-β1信號通路可能在人PSS-ILD的肺間質病變過程中具有重要作用，關于其具體的作用機制尚有待于深入研究。

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3白淑榮,王艷,楊靜,等.原發性干燥綜合征伴間質性肺病患者血清NF-κB和TGF-β1水平及其臨床意義的研究〔J〕.重慶醫學,2016;45(29):4056-8.

4中華醫學會風濕病學分會.干燥綜合征診斷及治療指南〔J〕.中華風濕病學雜志,2010;14(11):766-8.

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8何艷玲,姚三巧,張林，等.肌醇需求激酶1抑制劑對染矽塵大鼠肺纖維化干預作用研究〔J〕.中國職業醫學,2015;42(2):147-52.

9董潤,劉敏,黃驍舾，等.富勒烯C60對博來霉素誘導的小鼠肺纖維化的影響〔J〕.中華醫學雜志,2017;97(22):1740-4.

10張芮君,何菁.2015年歐洲抗風濕聯盟關于原發性干燥綜合征腺外系統累及的專家建議〔J〕.中華風濕病學雜志,2016;20(2):144.