晚期惡性腫瘤患者化療前后外周血T淋巴細胞亞群監測及臨床意義

袁 博（南陽市第一人民醫院腫瘤血液科，河南473000）

化療是指通過使用化學治療藥物殺滅癌細胞的一種治療方法，對于潛在轉移病灶（癌細胞已經轉移但臨床尚未檢測出）和已經發生臨床轉移的惡性腫瘤具有較好的療效，是大部分惡性腫瘤手術后的重要輔助治療方法，也是部分不適宜采用手術的惡性腫瘤患者的唯一一種治療方法[1]，通過化療不但可以延續患者的生命周期，還能提高患者的生命質量。對外周血T淋巴細胞亞群的監測是觀察化療效果的重要臨床輔助診斷方法，可以通過如免疫熒光法等檢測外周血T淋巴細胞亞群指標值的變化來判斷化療的效果及預后等。為此，作者就晚期惡性腫瘤患者化療前后外周血T淋巴細胞亞群監測及臨床意義進行研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年12月至2016年11月在本院接受化療治療的73例晚期惡性腫瘤患者作為研究對象。其中男41例，女32例；年齡49～76歲，平均（65.8±2.6）歲；其中肺癌晚期21例，胃癌晚期15例，乳腺癌晚期13例，腸癌晚期12例，肝癌晚期8例，其他惡性腫瘤晚期4例。所有患者均經過前期不同方法治療后正接受后期化療。

1.2 方法 73例患者均采用免疫熒光法進行外周血T細胞亞群指標檢測，具體方法如下。

1.2.1 采血 采集患者靜脈血（通常取手臂部位即可，注意在靜脈穿刺部位上方4～6 cm處扎緊止血帶）。在行常規消毒后取血（注意針頭斜面向上與皮膚成15°～30°，通常抽取5 mL即可），取血后注意壓迫止血。

1.2.2 制樣 將獲得血液注入試管內（切勿注入泡沫），并均勻搖晃（可視血液情況添加抗凝劑），并迅速封存待進行熒光法分析。

1.2.3 熒光法分析 （1）確定淋巴細胞區：在前散射（FSC）和側散射（SSC）的二維Dot-plot圖中劃出淋巴細胞區。（2）熒光強度檢測：對淋巴細胞作異硫氰酸熒光素（FITC）和藻紅蛋白（PE）強度檢測。選擇濾過片為（530±10）nm帶通熒光Ⅰ（FL1）為FITC進行檢測，選擇濾光片為（575±10）nm帶通熒光Ⅱ（FL2）為PE進行檢測。

1.2.4 檢查時間 化療前1周及化療結束后的2周。

1.2.5 評價指標 將免疫功能指標值（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD3＋/CD8＋）作為評價指標。

1.3 統計學處理 應用SPSS20.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，計量資料以表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者化療前后的評價指標比較 73例患者化療2周后的CD3＋、CD4＋、CD8＋均較化療前有一定改善，差異均有統計學意義（P＜0.05）；化療前后的CD3＋/CD8＋比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表 1。

表1 兩組患者化療前后的評價指標比較（±s）

表1 兩組患者化療前后的評價指標比較（±s）

階段化療前化療后t P CD3＋（%）55.8±8.7 69.3±9.2 3.17＜0.05 CD4＋（%）28.5±3.7 36.1±4.8 2.25＜0.05 CD8＋（%）23.9±3.1 28.3±3.2 2.38＜0.05 CD3＋/CD8＋2.33±0.32 2.47±0.58 0.94＞0.05

2.2 不同性別患者化療前后的評價指標比較 化療前，男性患者的CD8＋和CD3＋/CD8＋與女性患者比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），化療前男、女性患者CD3＋、CD4＋接近，差異無統計學意義（P＞0.05）；不同性別化療后的 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD3＋/CD8＋評價指標比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表 2、3。

表2 不同性別患者化療前相關評價指標比較（±s）

表2 不同性別患者化療前相關評價指標比較（±s）

性別男性女性t P CD3＋（%）54.3±5.2 56.7±4.9 0.83＞0.05 CD4＋（%）28.3±3.1 31.6±3.2 0.95＞0.05 CD8＋（%）23.8±3.9 19.6±2.2 2.38＜0.05 CD3＋/CD8＋2.28±0.32 2.89±0.58 3.94＜0.05

表3 不同性別患者化療后相關評價指標比較（±s）

表3 不同性別患者化療后相關評價指標比較（±s）

性別男性女性t P CD3＋（%）68.2±4.9 70.5±8.1 0.76＞0.05 CD4＋（%）37.1±3.3 35.9±4.2 0.84＞0.05 CD8＋（%）27.9±3.3 28.3±2.9 0.79＞0.05 CD3＋/CD8＋2.44±0.52 2.49±0.27 0.94＞0.05

3 討 論

有研究表明，T細胞亞群的分布會隨著腫瘤進展發生動態變化[2]。通過外周血T淋巴細胞亞群監測來觀察晚期惡性腫瘤患者化療的效果已經在臨床上得以普遍應用，主要方法有免疫熒光法、橋聯酶免疫檢測法、金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）花環法、流式細胞術等[3]。惡性腫瘤病變間存在著細胞免疫功能的差異[4]。通過對免疫功能指標（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD3＋/CD8＋）的測定不僅可以獲得患者化療后的免疫功能改善情況，還可以為后期的化療提供指導[5]。

本研究中化療前不同性別的CD8＋與CD3＋/CD8＋有一定的差異，這可能與患者的不同腫瘤性質有關系[6]，女性患者以晚期乳腺癌為主要疾癥；而化療后不同性別的指標值基本接近，表明針對不同類型的晚期腫瘤，通過化療其免疫指標均可得到一定改善；通過化療藥物可以提高 CD3＋、CD4＋、CD8＋的細胞陽性率，而CD3＋/CD8＋的變化差異較小仍表明免疫細胞處于抑制狀態，所以改善效果基本接近，說明化療作為晚期腫瘤患者的治療方法其作用基本接近，這與目前已有的研究結果也基本吻合[7]。化療可使調節性T細胞占T淋巴細胞比例降低[8]，從而達到治療腫瘤的效果。有研究表明，時辰化療在解除腫瘤對機體的免疫抑制及改善細胞免疫功能方面明顯優于常規化療，臨床應加強研究[9]。

綜上所述，進行外周血T淋巴細胞亞群監測可及時了解晚期腫瘤患者免疫指標值的改善情況，評估患者免疫功能狀態[10]，對指導治療和判斷預后有極高的輔助監測臨床意義。

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