動物飼料化學污染物含量的監測及實驗分析

祖祥凱，岳文喜，彭金云

（1.川北幼兒師范高等專科學校,四川廣元 628017；2.四川工商職業技術學院,四川都江堰 611830；3.廣西民族師范學院,廣西崇左 532200）

1　材料和方法

1.1材料 犬飼料、豚鼠飼料、鼠飼料和家兔飼料都來自廣東和湖南的動物飼料生產單位，3年的長期實驗中，其飼料來源均保持不變。

1.2檢測指標 通過具有資質的第三方機構分別在2012年，2013年和2014年連續3年對4種飼料進行監測，飼料分別是飼料中隨機抽取，每年一次。對飼料中的六六六、滴滴涕、黃曲霉毒素B1、鉛、砷、汞、鎘的含量進行監測。

1.3監測的方法 檢測方法根據國家標準進行，

各種化學污染物的檢測方法見表1。

表1　各種化學污染物的檢測方法

1.3.1六六六和滴滴涕的檢測方法 首先，稱取30 g飼料樣本放到100 mL的燒杯中，添加30 mL的丙酮和30 mL的石油醚，高速分散器中提取2 min，將提取液抽濾，使濾液轉移到250 mL的分液漏斗中，添加100 mL的硫酸鈉溶液中，充分搖勻，靜置進行分層，將下層溶液轉移到另外250 mL的分液漏斗中，使用20 mL的石油醚進行萃取，將3次萃取得到的石油醚層合并，過無水硫酸鎂層，在旋轉蒸發儀中濃縮到2 mL。

凈化，制備層折柱，在玻璃層折柱中添加5 cm的無水硫酸鎂，添加5%水脫活弗羅里硅土，最后添加1 cm高的無水硫酸鎂輕輕敲實，使用20 mL石油醚對凈化柱進行淋洗，將淋洗液丟去，柱面中留下少量液體。將2 mL濃縮液添加到淋洗之后的凈化柱中，并且使用少量石油醚將瓶子清洗，一起放到凈化柱中，使用石油醚和乙酸乙酯進行洗脫，在蒸餾瓶中收集洗脫液，并且在旋轉蒸發儀中濃縮，使用少量石油醚在離心管中進行多次溶解，直到剩下1 mL，通過氣相色譜進行分析。將0.5 μl的試樣液注入到氣相色譜儀中，根據標準曲線使用外標法進行定量。進樣口將六六六和滴滴涕瞬間氣化，所以要適當的降低樣口溫度（季海霞等，2015）。

1.3.2黃曲霉毒素的檢測方法 首先，稱取30 g磨細的樣品和5 g氯化鈉放置到攪拌杯中，添加125 mL的甲醇和水，比例為60：40，將攪拌杯蓋子蓋住，高速攪拌1 min。將蓋子取下，將提取物放入到折疊濾紙中，在干凈的容器中收集濾液。稱取20 mL濾液放置到干凈容器中，使用20 mL純水將其稀釋和混勻，將稀釋液使用玻璃纖維進行過濾，之后在玻璃注射器筒中進行收集。

將濾液以1～2滴/s的速度全部通過親和柱，直到空氣進入親和柱中。將10 mL的純水以1～2滴/s的速度通過親和柱，直到空氣進入親和柱中。使用1 mL色譜級甲醇以1～2滴/s的速度淋洗親和柱，將全部樣品淋洗液收集到玻璃試管中。然后在試管中的淋洗液中添加1 mL的顯色液，攪拌均勻后將試管放置到已經標定好的熒光劑中進行測量（周鵬等，2014）。

1.3.3重金屬的測定

鎘：測試方法為EN1122。首先，將樣品放入到燒杯中，添加濃硫酸，加熱樣品。之后將燒杯移走并且冷卻，再添加雙氧水。重復上述步驟，使反應溶液不再產生氣泡并且澄清之后取走燒杯冷卻。過濾溶液，使用離子水進行定量，之后使用感應耦合放射光譜儀進行檢測。

鉛：測試方法為US EPA3050B。將樣品放入到燒杯中添加HNO3加熱，在室溫中冷卻，添加H2O2之后加熱，直到反應完畢。重復以上步驟，在室溫中冷卻，之后添加HCl并且加熱，將冷卻液過濾并添加去離子水定量，使用感應耦合電機原離子放射光譜儀進行檢測。

汞：測試方法為 US EPA3052。將樣品放入到微波消化瓶中，添加硝酸和氫氟酸，將小花瓶放進微波消化器中直到完全溶解，之后過濾去離子水定量，使用感應耦合電機原離子放射光譜儀進行檢測射光譜儀進行檢測。

1.4飼料中化學污染物的含量判斷 飼料中化學污染物含量的判斷主要根據國家標準實現，見表2。

表2　飼料中化學污染物含量的判斷

2　結果和分析

2.1鼠飼料的監測結果 由表3可以看出，鼠飼料中2013年的砷含量為3.41 mg/kg，超過了國際標準的388.5%；其中汞含量在2012年和2014年分別為0.03 mg/kg和0.47 mg/kg，都超過了國際標準。其他化學污染物含量都達到國際要求。3年連續性檢測過程中化學污染物超標的發生概率為14.28%，并且超過國際標準的污染物均為重金屬。

2.2兔飼料的檢測結果 由表4可以看出，兔飼料在檢測過程中的2013年砷、鎘和鉛的含量分別為 1.61、1.62、1.11 mg/kg，均超過國際標準的界定。其中2012年的汞含量為0.05 mg/kg，也超過了國際標準，其他的均達到國際要求。3年檢測過程中的兔飼料化學污染物的超標發生率為19.06%，超過國際標準的污染物均為重金屬。

表3　鼠飼料的檢測結果

2.3豚鼠飼料的檢測結果 由表5可以看出，豚鼠飼料在2013年的鎘、鉛、砷含量分別為1.41、1.62、5.01 mg/kg，均超過了國際標準含量，其中2012年的汞含量為0.05 mg/kg，超過國際標準的50%，其他化學污染物均達到國際標準。豚鼠飼料在3年檢測過程中的化學污染物超標的發生概率為19.06%，超過國際標準的化學污染物均為重金屬。

2.4犬飼料的檢測結果 由表6可以看出，犬飼料在2013和2014檢測過程中的鎘含量分別為1.21 mg/kg、0.65 mg/kg，均超過國家標準規定，其他的均達到國際標準規定。3年中犬飼料化學污染物超標的發生概率為9.53%，其中均是重金屬類化學污染物超過了國際標準。

表4　兔飼料的檢測結果

2.53年檢測中動物飼料化學污染物的超標數量

由表7可以看出，六六六、滴滴涕和黃曲霉毒素B1并沒有超過國際標準，其中超過國際標準數量最多的是汞和鎘，其次為砷和鉛。

2.6化學污染物在2012年～2014年中的超標總次數 化學污染物在2012年～2014年中的超標總次數見表8。

表5　豚鼠飼料的檢測結果

表6　犬飼料的檢測結果

表7　動物飼料化學污染物在3年檢測中的超標數量

由表8可以看出，超標總次數數量最高的年份為2013年，一共超標8次，其次分別為2012年和2014年。

表8　化學污染物在2012年～2014年中的超標總次數

2.7四種飼料在2012年～2014年的化學污染物超標次數

4種飼料在2014年～2014年的化學污染物超標次數見表9。

由表9可以看出，家兔飼料和豚鼠飼料的總超標次數最高，次數為4次，其次分別鼠飼料和犬飼料（閔凡貴等，2014）。

表9　4種飼料在2012年～2014年的化學污染物超標次數

3　飼料中化學污染物的主要原因分析

3.1農藥污染 在動物飼料化學污染物檢測中，六六六和滴滴涕的主要來源為植物飼料中農藥殘留，比如玉米等。其在農作物和生長環境中的消化較為緩慢，一部擴散在大氣、土壤和水中，一部分被植物吸收導致農藥殘留情況，通過飼料進入到動物體內。通過本文檢測結果表示，六六六、滴滴涕的農藥殘留量比較少。

3.2礦物質污染 礦物質污染的主要途徑包括3種，第一種為工業廢水、廢棄的排放和具有較高毒性和殘留的重金屬通過化肥和農藥的使用，從而使這些礦物質和重金屬進入環境中，且長時間殘留，之后轉移到飼料中；第二種飼料加工過程中有毒礦物質對飼料造成污染；第三種為在養殖過程中使用砷制劑，大部分砷能通過動物糞便排泄滲入水和土壤中，從而導致環境污染，之后轉移到牧草、飼料及糧食中（張瑞云等，2016）。

4　飼料中化學污染物的控制途徑

4.1飼料配方的管理 飼料配方設計過程中，要科學的設計重金屬、化學污染物較高的原料，飼料配方中不使用驅蟲劑、激素、抗生素和防腐劑等一系列藥物添加劑，盡量避免使用天然有害物質，要使用清潔飼料原料，比如不使用骨粉、肉骨粉、血粉等。

4.2飼料原料的管理 飼料原料采購過程中要盡量選擇無公害的綠色農產品，密切關注土壤農藥殘留和農藥使用情況，和原料供應商簽訂質量保障協議。在對原料進行接收過程中，認真查看包裝是否完好，關注原料保質期和生產日期，嚴格對原料水分、衛生、污染和質量進行全面檢查，拒絕使用已經被污染的原料。有條件的還能創建飼料營養監測實驗室，配備相應常規分析裝備，必要時抽樣檢查。在對原料進行儲藏過程中要定期對其檢查，及時發現問題并進行解決。原料分門別類的存放到通風且濕度小于65%的環境中。在庫房的重點位置安裝濕度計和溫度計。保持環境衛生，防止蟲害和鼠害。

4.3飼料加工的管理 使用高質量的篩片和錘片對原料進行粉碎，保證設備正常磨損，安裝強力除鐵裝置，避免出現重金屬傷害。使用不銹鋼制粒機，使用合金鋼制造壓錕和壓膜，通過特殊的熱處理提高耐磨性能。在對飼料進行包裝過程中使用已消毒的袋子，避免包裝物品出現化學污染。在對成品管理過程中，要根據品種、規格和生產日期進行存放，并且保證物品的清潔和通風，還要保證飼料沒有蟲害危險，使飼料的新鮮度得到保障（郭中坤等，2015）。

5　討論

實驗動物的使用目的和普通家禽并不相同，所以對飼料中化學污染物的要求不同。通過本文檢測數據可以看出，六六六、黃曲霉毒素B1和滴滴涕并沒有超標，表示在動物飼料中的污染含量控制良好，這方面和我國一直以來禁止使用農藥具有密切關系。其中超標的化學污染物主要為重金屬，其主要是因為實驗動物配合飼料衛生標準中的含量限值較低，因此出現嚴重超標情況。實驗動物飼料的主要目的就是保證動物質量及實驗結果，所以就要對飼料中化學污染物的控制進行重視，不能只考慮成本及經濟效益，還要有效落實對飼料中化學污染物的控制，提高飼料質量。

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[4]閔凡貴，張譜華，趙維波，等.影響飼料中總磷含量測定準確度的因素分析[A].中南地區實驗動物科技交流會[C].2014：126.

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[6]郭中坤，王可洲，李志彥. 2012～2013年山東省部分實驗動物配合飼料的檢測分析[J]. 實驗動物與比較醫學，2015，35（1）：32～36.