油脂氧化日糧添加維生素E和抗氧化劑對肉雞生長性能、肉品質和抗氧化性能的影響

李穎平，耿 丹，楊繼生，郭春燕，聶存喜，程發祥

（1.晉中職業技術學院生物工程系,山西晉中 030600；2.石河子大學動物科技學院,新疆石河子 832003；3.威海經濟技術開發區農業經濟發展局,山東威海 264205）

肉雞飼料中添加脂肪或油能夠實現最佳生長性能和飼料報酬，但植物油富含不飽和脂肪酸，特別容易氧化。油脂氧化過程會產生自由基，自由基與分子氧結合引起脂質過氧化反應，產生過氧化自由基，進而導致日糧的能量和脂溶性營養物質利用率下降，影響肉雞健康和生長（Fellenberg等，2006）。此外，氧化產物引起肉雞發生氧化應激，對雞肉的品質產生負面影響，特別是風味、顏色和滴水損失等方面（蔣守群等，2011）。人工合成抗氧化劑如乙氧基喹啉、沒食子酸等通常被用在飼料中防止脂質過氧化，同時乙氧基喹啉還能促進動物生長性能，維持肉脂穩定性（Wang等，1997）。研究表明，復合抗氧化劑（乙氧基喹啉、沒食子酸）能提高植物油穩定性及對肉雞生長具有

促進作用（Tavarez等，2011）。此外，關于維生素E（VE）對油脂抗氧化作用已有大量研究（趙貴興等，2002；魯志成等，2003）。因此本試驗在玉米—豆粕型日糧中添加氧化豆油，探討維生素E和抗氧化劑對1～42 d嶺南黃雞生長性能、肉品質和抗氧化性能的影響，為維生素E和抗氧化劑在油脂氧化日糧中的應用提供基礎資料。

1　材料與方法

1.1試驗材料 抗氧化劑（主要成分為乙氧基喹啉、丁基羥基茴香醚、檸檬酸和磷酸）購自建民工業（珠海）有限公司，VE購自帝斯曼中國有限公司。

1.2試驗動物及分組 試驗選取健康、體重一致的1 d雌性嶺南黃雞500羽，隨機分為5組，每組5個重復，每個重復20羽。試驗日糧參考《中國雞飼養標準2004》和NRC（1994）肉雞飼養標準配制，對照組飼喂以玉米—豆粕為主的基礎日糧（VE含量10 IU/kg）；油脂氧化組飼喂加入3%氧化豆油的日糧，氧化豆油制作參考Lu等（2014）的試驗方法；VE組、抗氧化劑組和VE+抗氧化劑組飼喂分別在油脂氧化日糧中添加200 IU/kg VE、100 mg/kg抗氧化劑和100 IU/kg+50 mg/kg抗氧化劑的日糧。1～21 d和22～42 d基礎日糧和油脂氧化日糧組成及營養水平見表1。

表1　1～21 d和22～42 d嶺南黃雞基礎日糧和油脂氧化日糧組成及營養水平

1.3飼養管理 雞只采用網上平養，舍內第一周溫度控制在33 ℃，之后每周調節溫度直至溫度控制在20 ℃左右，舍內相對濕度控制在65%，光照采用人工光照和自然光照結合，光照強度控制在30 lx。試驗雞只全期自有采食、飲水，按照常規程序進行免疫和消毒。試驗期42 d。

1.4測定指標

1.4.1生長性能 肉雞試驗期間每周按重復記錄采食量，在試驗當天、22 d、43 d清晨對試驗雞只按重復進行稱重，記錄期末體重，計算1～21 d和22～42 d各組雞只平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2血漿抗氧化指標 在試驗第43 d清晨飼喂前，各重復隨機選取4只雞進行屠宰，采集肝臟和胸肌，稱重后，-80 ℃保存。分別于試驗第22和43 d對試驗雞只翅下靜脈采血5 mL于肝素鈉抗凝管，用于制備血漿。血漿α-1酸性糖蛋白（α-1 acid glycoprotein，AGP）、尿酸（uric acid，UA）和硫代巴比妥酸反應物（Thiobarbituric Acid Reactive Substances，TBARS）采用試劑盒法測定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所有限公司。1.4.3 肝臟抗氧化基因mRNA表達水平 肝臟過氧化氫酶（Catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）和甘油醛-3-磷酸脫氫酶（Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase，GAPDH）引物系列、cDNA合成和熒光定量PCR操作參考Lu等（2014）研究結果。

1.4.4胸肌中VE和VA含量 采用高效液相色譜法測定胸肌中VA和VE含量，具有操作方法參考GB 5009.82-2016《食品中維生素A、D、E的測定》。

1.5數據統計與分析 試驗數據采用SPSS18.0單因子方差分析進行分析，用Tukey氏多重比較對各處理組均值進行差異顯著性檢驗，以P＜0.05作為差異顯著準，結果以“平均值±標準差”表示。

2　結果與分析

2.1油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對1～42 d肉雞生長性能的影響 油脂氧化日糧中添加VE和抗氧化劑對1～21 d、22～42 d和1～42 d嶺南黃雞生長性能的影響見表2。與對照組相比，油脂氧化組和各處理組顯著提高21 d肉雞體重、平均日增重和平均日采食量（P＜0.05），但22～42 d肉雞生長性能并未表現出同樣的生長趨勢。油脂氧化組和VE組肉雞42 d末重顯著高于其他各組（P＜0.05）。與其他各組相比，VE組肉雞生長后期（22～42 d）平均日增重和平均日采食量顯著低于其他各組（P＜0.05），料重比顯著高于其他各組（P＜0.05）。抗氧化劑組和VE+抗氧化劑組肉雞生長全期（1～42 d）料重比顯著低于其他各組（P＜0.05）。

表2　油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞生長性能的影響

2.2油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞血漿抗氧化指標的影響 由表3可知，VE+抗氧化劑組對21 d嶺南黃雞血漿AGP水平影響顯著，較對照組提高70.11%（P＜0.05），而各組對42 d肉雞血漿AGP水平無顯著影響（P＞0.05）。對照組與各處理對21 d和42 d肉雞血漿UA水平無顯著影響（P＞0.05）。與其他各組相比，油脂氧化組21 d肉雞血漿TBARS水平表現為最低（P＜0.05），而VE組42 d肉雞血漿TBARS水平表現為最高（P＜0.05）。

表3　油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞血漿抗氧化指標的影響

2.3油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞肝臟抗氧化基因表達的影響 由表4可知，各處理組之間肝臟CAT和GSH-Px基因mRNA表達水平并無顯著差異（P＞0.05），但對照組肝臟GSH-Px基因mRNA表達水平表現為最高。對照組SOD基因mRNA表達水平表現為最高，較油脂氧化組提高6.38%（P＜0.05）。

表4　油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞肝臟抗氧化基因表達的影響

2.4 油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞胸肌肉質的影響 由表5可知，VE組和抗氧化劑組胸肌滴水損失顯著低于油脂氧化組，分別降低22.58%（P＜0.05）和23.39%（P＜0.05）。與油脂氧化組相比，VE+抗氧化劑組胸肌pH顯著提高了4.53%（P＜0.05），乳酸含量顯著降低了22.12%（P＜0.05）。日糧油脂氧化及添加VE或抗氧化劑對胸肌VA含量并無顯著影響（P＞0.05），但油脂氧化日糧添加VE顯著提高了胸肌VE含量（P＜ 0.05）。

表5　油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對肉雞胸肌肉質的影響

3　討論

3.1油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對1～42 d嶺南黃雞生長性能的影響 動物日糧中的多不飽和脂肪和油脂容易氧化，大量研究表明，日糧加入氧化的油脂會對肉雞生長性能產生負面影響，如增重和飼料轉化率降低等（Ajum等，2004；Tavarez等，2011）。在本試驗中，油脂氧化組及VE、抗氧化劑、VE+抗氧化劑組肉雞生長性能高于對照日糧組，這可能與添加的玉米油中富含多不飽和脂肪酸有關，因為肉雞更容易消化利用多不飽和脂肪酸（Ferrini等，2008；陳文等，2011）。有研究發現，肉雞日糧中添加2%～4%的魚油可以顯著提高1～38 d肉雞日增重，說明多不飽和脂肪酸能促進肉雞生長前期的生長性能（Lopez-Ferrer等，2001），這與本研究結果一致。本研究中抗氧化劑組提高肉雞生長性能與日糧中油脂氧化與否并無一定聯系，因為氧化劑中的成分乙氧基喹啉能提高生長性能（Wang等，1997；Tavarez等，2011）。本試驗中，在油脂氧化日糧中加入200 IU/kg的VE，肉雞后期生長性能較其他組差，Englmaierova等（2011）同樣發現，在非應激狀態下日糧中過量的VE水平會降低肉雞生長性能，其原因可能與過量VE作為促氧化劑影響其本身的功能有關。

3.2油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對1～42 d嶺南黃雞血漿抗氧化指標的影響 在應激條件下，急性蛋白反應可以通過動物自身的抗體達到生理平衡狀態，同時限制有害微生物的繁殖（Murata等，2004）。AGP是存在于鳥類中的一種急性蛋白，能參與應激狀態下的炎癥反應和免疫促進作用（Hochepied等，2003）。本試驗中，所有含油脂氧化的日糧組AGP含量均高于對照組，說明肉雞在生長早期是處于應激狀態。氧化應激誘導脂質過氧化，脂質雙擊破裂后形成過氧化物（高晶，2008）。血液中TBARS含量常作為評判氧化應激和脂質過氧化水平的生理指標，本試驗中VE組42 d肉雞血漿TBARS含量表現為最高，說明在本試驗條件下，高水平的VE提高了脂質氧化水平。UA是大多數動物的排泄產物，是人和鳥類的非酶性抗氧化物質，能降低氧化應激造成的組織損傷和活性氧的生成（Carro等，2010；陳強等，2012）。本研究發現，各組血漿UA含量并無顯著差異，但對照組和VE+抗氧化劑組血漿UA含量表現為最高，說明在生長后期，油脂氧化日糧中添加VE和抗氧化劑復合物能加強機體非酶性抗氧化系統的激活。

3.3油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對1～42 d嶺南黃雞肝臟抗氧化基因表達的影響

本試驗中通過熒光定量PCR來檢測肉雞肝臟中SOD、CAT和GSH-Px的mRNA表達水平，結果發現各處理對CAT和GSH-Px基因mRNA表達水平并無顯著影響。但對照組肝臟SOD基因mRNA表達水平顯著高于油脂氧化日糧組，這與對照組肉雞后期生長性能高于油脂氧化組結果一致。

3.4油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑對1～42 d嶺南黃雞胸肌肉質的影響 肌肉細胞膜受到自由基攻擊，細胞破裂，細胞中水分流失，從而造成肌肉滴水損失（Mahan，2001）。與油脂氧化組相比，本研究發現，油脂氧化日糧添加VE和抗氧化劑能降低胸肌滴水損失，說明VE和抗氧化劑能維持肌肉細胞膜的完整性，避免氧化物造成的損傷。在肉形成的過程中，肌肉收縮產生乳酸，從而使肉的pH降低（安榮榮等，2017）。油脂氧化組肌肉乳酸含量顯著高于VE+抗氧化劑組，同時pH也表現為最低。當pH下降至蛋白質的等電點（5.4）時，肌肉系水力變弱，維持肌纖維空間的靜電也減弱（Huff-Lonergan等，2007），這也是油脂氧化組肉雞胸肌乳酸含量最高、pH最低、滴水損失最高的原因。本研究發現，VE組肉雞胸肌中VE含量顯著高于其他各組，而與對照組相比，油脂氧化日糧中添加抗氧化劑或VE+抗氧化劑對肉雞胸肌VE含量影響不顯著，這與Tavarez等（2011）研究結果一致。Bartov等（1972）報道，日糧添加抗氧化劑可以降低機體對VA的利用，從而使組織中VA含量增加。然而本試驗中各處理組胸肌VA的含量并無顯著影響，這可能與試驗雞只品種、日糧和抗氧化劑成分不同有關，具體差異還有待進一步研究。

4　結論

油脂氧化日糧中添加VE、抗氧化劑或VE和抗氧化復合物一定程度提高肉雞抗氧化性能，單獨添加抗氧化劑和VE能降低胸肌滴水損失，但高水平的VE會降低1～42 d嶺南黃雞生長后期的生長性能。

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