北大、華科研發出超靈敏結構光超高分辨率顯微鏡

北京大學陳良怡團隊聯合華中科技大學譚山團隊發明了一種超靈敏結構光超高分辨率顯微鏡--海森結構光顯微鏡 (Hessian SIM)。此項成果近日以全文形式在線發表于Nature Biotechnology。第一作者為北京大學黃小帥、華中科技大學范駿超和北京大學李柳菊，通訊作者為北京大學陳良怡、華中科技大學譚山。

在每秒鐘得到188張超高分辨率圖像時，海森結構光顯微鏡的空間分辨率可以達到85納米，能夠分辨單根頭發的1/600到1/800大小結構，而所需要的光照度小于常用的共聚焦顯微鏡光照度三個數量級。由于極低的光漂白以及光毒性，實現了100 Hz超高分辨率成像下連續采樣10分鐘得到18萬張超高分辨率圖像，或者是在1 Hz超高分辨率成像下連續1小時超高分辨率成像基本無光漂白。

與獲得2014年Nobel化學獎的受激輻射損耗超高分辨率顯微鏡(STED)相比，海森結構光顯微成像以極高的時間分辨率、極低的光毒性在活細胞超高分辨率成像方面占顯著優勢。此項突破一方面是基于硬件自主設計的新偏振旋轉玻片陣列、高精度的時序控制程序以及高數值孔徑物鏡的應用；另一方面是創新的重構算法，借鑒了人眼區分信號和噪聲的機制，首次提出將生物樣本在多維時空上連續、而噪聲是完全隨機分布的先驗知識用于構建海森矩陣，指導超高分辨率熒光圖像的重建。超靈敏海森結構光顯微鏡是目前活細胞成像時間最長、時間分辨率最高的超高分辨率顯微鏡，適用于各種細胞、不同探針的熒光成像 - 可以說，所有應用掃描共聚焦顯微鏡的場景都可以使用海森結構光顯微鏡，因而具有廣泛的應用前景。(學術幫)