鹽酸小檗堿片含量測定方法的改進

2018-03-31 07:19:50張越千

中西醫結合心血管病電子雜志 2017年36期

張越千

【摘要】目的改進鹽酸小檗堿片含量測定的方法。方法用流動相溶解和改變過濾方式的方法處理樣品。結果經過三種方法的對比，改進方法獲得滿意結果。結論改進的兩種方法可靠，可用于鹽酸小檗堿片樣品溶液的制備。

【關鍵詞】鹽酸小檗堿片；高效液相色譜法；含量測定

【中圖分類號】R927.2 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.36..02

鹽酸小檗堿片是一種抗菌藥，臨床上主要用于治療腸道感染、如腸胃炎等。鹽酸小檗堿片的含量測定的方法標準收載于《中國藥典》2015年版二部[1]中，其含量測定的方法采用HPLC方法。在檢驗過程中發現含量測定項下由于對樣品的處理不盡完善，導致測定結果偏低。同時也有相關文獻報道[2]。因此對樣品處理方法進行了相應的改進。分別采用流動相溶解并超聲的方法和增加微孔濾膜

（0.45 μm）過濾棄去初濾液的方法。

1 儀器與試藥

Agilent 1260高效液相色譜儀；電子天平（SARTOROUS CP225D）；鹽酸小檗堿對照品（來源：中國藥品生物制品檢驗所，批號：110713-201613，標示含量：86.8%）；鹽酸小檗堿片樣品（規格：0.1 g；市售品；批號：160613）；色譜純乙腈；水為純化水；其他試劑均為分析純試劑。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：磷酸鹽緩沖液[0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.05 mol/L庚烷磺酸鈉溶液（1：1），含0.2%三乙胺，并用磷酸調節

pH值至3.0]-乙腈（40：60）；流速：1.0 ml/min；檢測波長：263 nm；進樣量：20 μL；柱溫：35℃；理論塔板數不低于3000；小檗堿峰與相鄰雜質峰分離度大于1.5。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱量鹽酸小檗堿對照品20 mg，置于50 mL容量瓶中，加沸水使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取

5 mL，置于50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

2.3.1 藥典法

取供試品20片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于40 mg鹽酸小檗堿），置于100 ml量瓶中，加沸水適量使溶解，放冷后用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液（約8 ml），精密量取續濾液5 ml，置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3.2 改進方法

取供試品20片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于40 mg鹽酸小檗堿），置于100 ml量瓶中，加流動相使溶解，超聲20分鐘，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液約8 ml，精密量取續濾液5 ml，置50 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 測定方法

精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。

2.5 線性范圍

精密稱量鹽酸小檗堿對照品20 mg，置于100 ml容量瓶中，加沸水溶解，并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1 mL、2 mL、4 mL、8 mL、16 mL、32 mL置于50 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。按照2.1色譜條件，精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度C（μg/mL）為橫坐標，峰面積A為縱坐標，進行線性回歸。線性方程為

A=192.9C-154.25（R2=0.9996；n=6），表明濃度在4.07～130.27 μg/mL范圍內，呈良好的線性關系。

2.6 精密度實驗

用線性關系考察中鹽酸小檗堿濃度為32.57 μg/mL的對照品溶液，重復進樣5次，測得的RSD為0.63%。

2.7 重復性實驗

精密稱取同一批號的供試品5份，按2.3項下方法制備供試品溶液，含量測定結果的RSD為0.55%，表明重復性好。

2.8 回收率實驗

精密稱取含量已知的鹽酸小檗堿片細粉（約相當于鹽酸小檗堿30 mg），分別置100 mL容量瓶中，精密加入對照品，按照2.3.1方法配制成溶液。進樣，記錄色譜圖并計算加樣回收率，平均回收率為97.75%，RSD為1.3%。測得結果見表1。

通過對同一批鹽酸小檗堿片采用三種方法同時3次的測定結果見表2。

結果表明，改進方法1略優于藥典法，而改進方法2顯著優于前兩種方法，更接近于檢驗的真實值。

3 討論

三種方法相比較，不同的溶解方法和過濾方式對鹽酸小檗堿片的測定結果影響不盡相同，改進后的方法測得的含量準確性更高。分析在實驗過程中，由于溶解方法和過濾方式的不合理、不完善將導致部分藥品的含量測定的結果達不到國家規定的標準。

因此，建議采用流動相超聲溶解并用微孔濾膜