五種不同種類消毒劑殺菌效果評估*

吳蕾,沈志勇,崔雪志,魯守偉,許傳田

(1.山東新希望六和集團有限公司，山東 濟南 250100；2.臨沂市臨港區壯崗鎮獸醫站，山東 臨沂 276615；3.山東省農業科學院畜牧獸醫研究所，山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室，山東 濟南 250100）

雞場消毒是做好生物安全措施最關鍵的一個環節，消毒效果好壞直接關系到場外微生物能否傳入到雞場，雞場外消毒保證場外病原進入雞場機會大大降低，雞舍內消毒能保證雞舍內已經存在的病原微生物控制在一定范圍內，不致引起疾病爆發。因此消毒預防和控制畜禽傳染病的重要措施之一[1-5]。

由于市場上消毒劑種類繁多，消毒效果各異，如何選擇適合自己養殖場的消毒劑是養殖場在生產過程經常遇到的一個實際問題。本研究擬通過定量殺菌試驗比較過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液、復方戊二醛溶液、10%聚維酮碘、火堿對細菌的殺菌效果，并結合消毒劑的價格，以及這5種消毒劑的消毒特點進行綜合分析，為養殖戶篩選消毒劑提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料 8.5%的生理鹽水、營養肉湯（陸橋）、平板計數瓊脂（陸橋）、過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液、復方戊二醛溶液、10%聚維酮碘、火堿（純度99%）、棉簽、18mm×180mm 試管（帶塞子）、250ml錐形瓶、100μl吸頭、1ml吸頭、10～100μl單道移液器、100～1000μl單道移液器、蘇凈牌超凈工作臺、一恒牌37℃恒溫培養箱、酒精燈、申安牌高壓滅菌鍋等。

1.2 方法

1.2.1 細菌的培養 使用滅菌棉簽在種雞養殖場的舍內墻壁上采集細菌，立即將棉簽放入滅菌的營養肉湯中，放入37℃恒溫培養箱中培養24h。

1.2.2 計算營養肉湯中的細菌的含量 室溫條件下（25℃），將培養24h的肉湯在超凈工作臺中用滅菌的生理鹽水進行10倍系列稀釋，稀釋到107倍。分別從104～107的稀釋肉湯中，依次取0.1ml菌懸液，加入平板計數瓊脂，搖勻，凝固后倒置放入37℃恒溫培養箱培養24h，計數菌落總數。

1.2.3 五種消毒劑對細菌的殺菌效果 室溫條件下（25℃），根據廠家推薦濃度設置消毒劑稀釋比例（見表1）。將過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液、復方戊二醛溶液用蒸餾水分別進行1:200、1:400、1:600、1:800、1:1000 倍稀釋；10%聚維酮碘稀釋至0.5%、1%、2%、4%、5%（以碘含量計算）；火堿稀釋至1%、2%、4%、5%、6%。震蕩混勻后，取系列稀釋的不同種類的消毒劑與菌懸液按25:1（5m l消毒劑：0.2ml菌液）比例混合，經不同時間反應后（30min、1、3、5、10、12、24h），將 0.1m l的細菌消毒劑混合液加入滅菌平皿中，倒入滅菌平板計數瓊脂，混勻，凝固后倒置放入37℃恒溫培養箱培養24h，觀察結果，計算菌落總數（整個處理過程在超凈工作臺中無菌進行）。實驗過程中設置滅菌蒸餾水陽性對照（滅菌蒸餾水：菌懸液=25:1）和陰性對照（滅菌蒸餾水）。

表1 廠家推薦消毒劑使用濃度

2 結果

2.1 營養肉湯中細菌含量的結果 由表2計算出，菌懸液中含菌量為3.1×107CFU/ml。

表2 菌懸液中細菌含量

2.2 五種消毒劑對細菌的殺菌效果 菌落計數結果表明：復方戊二醛溶液稀釋至1000倍、火堿稀釋至1%、10%聚維酮碘稀釋至0.5%、過硫酸鉀復合粉稀釋至800倍、復方酚溶液稀釋至600倍，反應30min殺菌率可達100%；陽性對照菌落多不可計，陰性對照細菌為0（見表3）。在實驗室條件下，復方戊二醛溶液、火堿、10%聚維酮碘、過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液推薦比例分別是1:1000、1%、0.5%、1:800、1:600。

2.3 五種消毒劑使用成本 根據本實驗得出的五種消毒劑的推薦比例和市場價格計算其使用成本，成本由低到高：火堿＜復方戊二醛溶液＜復方酚溶液＜過硫酸鉀復合粉＜10%聚維酮碘，見表4。

表4 五種消毒劑使用成本

3 討論

試驗的五種消毒劑中最經濟實惠的是火堿，對病毒和細菌的殺滅作用均較強，高濃度可殺滅芽孢，但具有腐蝕性，主要用于養殖場地面、墻壁等的消毒；復方戊二醛為醛類消毒劑，無腐蝕性，高效廣譜[6]，作用迅速，但有芳香氣味，不易受環境酸堿度及有機物影響，對細菌和真菌均有殺滅作用，對芽孢和無囊膜病毒作用弱，其抗菌活性不受低溫影響，化學性質穩定，主要用于雞舍、器具、噴霧等消毒；復方酚為酚類消毒劑，對皮膚和粘膜具有刺激性和腐蝕性，對大多數不產生芽孢的繁殖型細菌和真菌均有殺滅作用，但對芽孢和無囊膜病毒作用不強，其抗菌活性不受低溫影響，化學性質穩定，主要用于禽舍表面、外部環境、器具、設備等消毒；過硫酸鉀復合粉為過氧化物類消毒劑，可以殺滅各種病原微生物，并不受有機物影響，其代謝產物不會對人類和環境帶來影響，主要用于禽舍、空氣、飲水、畜禽等消毒；聚維酮碘為碘制劑類消毒劑，對細菌、病毒、真菌具有良好的殺菌效果，具有高效廣譜的特點，但使用成本較高，主要用于帶雞消毒、飲用水、雞舍、場地、皮膚、粘膜等消毒[7-10]。

表3 五種消毒劑不同反應時間后菌落計數

本實驗結果是在實驗室條件下得出的數據，而在畜禽養殖場使用消毒劑消毒會受到消毒對象、有機物、溫度、作用時間、生物膜、污染物等因素的影響，因此畜禽養殖場使用消毒劑消毒時需根據消毒對象選擇適宜類型的消毒劑并適當調整消毒濃度，以期達到較好的消毒效果。

本研究為養殖場正確篩選消毒劑種類以及消毒劑的使用濃度提供了理論數據。

[1] 陳呂華，沈明亮，云麟.重視畜禽圈舍及環境消毒是畜牧業健康發展的關鍵[J].中國獸醫雜志，2010，46(1)：86-87.

[2] 匡偉.畜禽養殖消毒劑的科學使用[J].家禽科學，2014，(4)：38-40.

[3] 袁正東.大型養禽場生物安全體系的建立與保障[J].中國家禽，2012，18(4)：1-4.

[4] 孫秀如,盧永勝,張梅芳,等.如何建立種雞場的生物安全體系[J].中國家禽，2008,11(2)：43-44.

[5] 楊丁.規模化養禽場生物安全措施[J]. 中國家禽,2005,27(19):30-31.

[6] 徐利平，陳小萍.戊二醛消毒劑的安全性與臨床應用[J].中國消毒學志，2005，22(1)：96-98.

[7] 王安,范偉杰,趙慶楓,等.不同消毒方法對胚蛋消毒效果和孵化成績的影響[J].畜牧與獸醫，2013，45(7)：52-54.

[8] 任景樂,肖靜靜,焦洪超,等.不同消毒方式對蛋雞場消毒效果的影響[J].中國家禽，2012，34(22)：44-46.

[9] 肖愛歡,覃國喜,盧劍,等.多種常用消毒劑有效消毒濃度的確定試驗 [J].廣西畜牧獸醫，2012，28(6):329-331.

[10] 薛文青.季銨鹽類陽離子表面活性消毒劑研究進展[J].中華醫院感染學雜志,2002,12(8):634-636.