乳腺癌手術前后，cd44+/cd24—，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量變化與臨床相關性分析

徐延森 馬紅艷 楊明月 王平 李秀清 鞠英博 孫杰 杜文雅

[摘要] 目的 觀察正常人，乳腺癌患者手術前后cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞變化情況，分析其與乳腺癌的臨床相關性。 方法 方便選取該院30名健康醫護人員以及自2016年1月—2017年6月收治的30例乳腺癌患者作為該次研究對象，檢測健康人員與乳腺癌患者手術前后的cd44+/cd24-，并將aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量，分析數據。 結果 健康人員與乳腺癌患者的aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物，兩組人員的血漿細胞含量差異無統計學意義（P>0.05），采用乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物時，乳腺癌患者的血漿細胞含量（5.3±2.1）%明顯高于健康人組（0.0±0.0）%，兩組對比差異有統計學意義（P<0.05），且手術后，乳腺癌患者cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量均有降低，手術后cd44+/cd24-作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（0.7±0.3）%明顯小于手術前（5.3±2.1）%，手術后aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（0.8±0.3）%明顯小于手術前（3.7±1.2）%，各組數據對比均差異有統計學意義（P<0.05）。結論 cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量與乳腺癌疾病的發生和發展具有正相關關系。

[關鍵詞] 乳腺癌手術；cd44+/cd24-；aldh1+；血漿含量；臨床相關性

[中圖分類號] R5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）01（b）-0019-03

[Abstract] Objective To observe the correlation between the Plasma cell content changes and human breast cancer tumor stem cell marker using cd44+/cd24-， aldh1+ before and after breast cancer surgery. Methods 30 cases of healthy medical staff in our department and 30 cases of breast cancer patients admitted and treated in our hospital from January 2016 to June 2017 were conveniently selected as the research objects and the cd44+/cd24- of healthy staff and breast cancer patients before and after surgery was tested and the aldh1+ was used as the plasma cell content of the human breast cancer tumor stem cell marker， and the data were analyzed. Results There was no obvious difference in the plasma cell content between the two groups（P>0.05）， and the cd44+/cd24-was used as the human breast cancer tumor stem cell marker in the peripheral blood of breast cancer， and the plasma cell content of the breast cancer patients was obviously higher than that of healthy group， [（5.3±2.1）% vs （0.0±0.0）%]， and the difference was obvious（P<0.05）， after surgery， the cd44+/cd24-，aldh1+ of breast cancer patients decreased， and the content of cd44+/cd24- after surgery was obviously lower than that before surgery， [（0.7±0.3）% vs （5.3±2.1）%]， after surgery， the aldh1+ was obviously lower than that before surgery[（0.8±0.3）% vs （3.7±1.2）%]， and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The cd44+/cd24-， aldh1+ as the human breast cancer tumor stem cell marker plasma cell content is positively correlated with the occurrence and development of breast cancer.

[Key words] Breast cancer surgery； cd44+/cd24-； aldh1+； Plasma content； Clinical correlation

LDH1屬于功能型干細胞標志物，可對干細胞進行分離和鑒定[1-2]。因此，當前發現的2種不同類型的乳腺癌干細胞標志為ALDH1活性高和cd44+/cd24-表型。但是，目前關于腫瘤干細胞的血漿含量變化以及對ALDH1+和cd44+/cd24-表型的乳腺癌干細胞之間生物學特性的差異研究報道尚不多見[3-4]。為此該文特方便選取該院自2016年1月—2017年6月收治的30例乳腺癌患者和該科30名健康醫護人員進行研究，旨在探究乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量變化與臨床相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該院收治的30例乳腺癌患者（設為研究組）和該科自愿加入該研究的30名健康女性醫護人員（設為對照組）作為研究對象，研究組患者年齡分布為33～45歲，平均年齡為（35.3±1.8）歲，對照組醫護人員的年齡分布為31～46歲，平均年齡為（34.7±1.6）歲，兩組應試者的年齡、性別差異無統計學意義，可進行對比。

1.2 方法

研究者均行外周血中以cd44+/cd24-，aldh1+為表型的干細胞細胞檢測，首先利用EDTA抗凝管采集應試者肘正中2 mL靜脈血，并對血樣標本進行離心處理，去除最上層的血漿層，取單個核細胞層制備細胞懸液（3.3×105.5/mL），然后將5 μL ALDH1特定抑制物溶液加入到對照組制備的細胞懸液中，研究組細胞懸液中加入5 μL激活的ALDH1底物溶液，使兩組患者的細胞懸液發生乙醛脫氫酶1反應，待反應完全后，兩組各取100 μL細胞液，加入CD44-PE-CY5、CD24-PE，然后采用流式細胞儀對細胞液進行檢測，并記錄兩組應試者的cd44+/cd24-，aldh1+血漿細胞含量，并采用CELL QUEST軟件對檢測所獲取的數據進行分析。

1.3 觀察指標

比較健康人員及乳腺癌患者手術前后外周血中的cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞變化情況[5-7]。

1.4 統計方法

采用SPSS 22.0統計學軟件和CELL QUEST軟件對該次研究所得數據進行分析和統計，用（x±s）表示計量資料，采用t檢驗，用（%）表示計數資料，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 健康者及乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量對比

研究示正常人與乳腺癌患者的aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量差異無統計學意義（P>0.05），乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-，作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（5.3±2.1）%明顯高于健康人組（0.0±0.0）%，兩組對比差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 乳腺癌組患者手術前后的各項血漿細胞含量變化情況對比

手術后，乳腺癌患者cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量均有降低，手術后cd44+/cd24-，作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（0.7±0.3）%明顯小于手術前（5.3±2.1）%，手術后aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（0.8±0.3）%明顯小于手術前（3.7±1.2）%，兩組對比差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

該研究中，對健康應試者和乳腺癌患者分別采用流式細胞儀外周血中以ALDH1為標志物干細胞檢測，檢測結果顯示，健康人員與乳腺癌患者的aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物，兩組人員的血漿細胞含量差異無統計學意義，采用乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物時，乳腺癌患者的血漿細胞含量（5.3±2.1）%明顯高于健康人組（0.0±0.0）%，兩組對比差異有統計學意義（P<0.05），且手術后，乳腺癌患者cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量均有降低，手術后cd44+/cd24-作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（0.7±0.3）%明顯小于手術前（5.3±2.1）%，手術后aldh1+作為人乳腺癌腫瘤干細胞標志物血漿細胞含量（0.8±0.3）%明顯小于手術前（3.7±1.2）%，說明了以cd44+/cd24-，aldh1+為表型的干細胞與乳腺癌疾病的發生和發展具有正相關關系，這與郭呈芳等人[8]研究的健康對照組的aldh1+細胞含量（3.12～4.95），cd44+/cd24-細胞含量（0.00～0.00）基本一致。

綜上所述，為了改善乳腺癌患者的預后質量，需對腫瘤干細胞相關知識進行深入研究，并采用有效的治療方式阻礙干細胞的增殖和分化。

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（收稿日期：2017-10-10）