大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)中的影響因素

楊玉潔，王克柱，董黎明，姜 寧，范琳犀，張宏霞，呂靜薇，陳善廣，劉新民，王 瓊*

(1.西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院中葡中醫(yī)藥國(guó)際合作中心，四川 瀘州 646000； 2.西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，四川 瀘州 646000；3.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193； 4.廣東東陽光藥業(yè)有限公司，廣東 東莞 523808；5.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)沙 410208； 6.中國(guó)航天員科研訓(xùn)練中心，北京 100193)

19世紀(jì)末到20世紀(jì)初，伊萬·巴甫洛夫和桑代克分別提出了經(jīng)典條件反射理論和動(dòng)物學(xué)習(xí)定律，到20世紀(jì)30年代后期B. F. 斯金納在前人的基礎(chǔ)上提出了操作性條件反射理論，并研制出斯金納箱，成為操作式條件反射理論的奠基者。隨著神經(jīng)科學(xué)研究的深入，國(guó)內(nèi)外眾多研究者將經(jīng)典條件反射理論廣泛應(yīng)用于研究認(rèn)知行為。本實(shí)驗(yàn)室在此基礎(chǔ)上研制了國(guó)內(nèi)首臺(tái)獎(jiǎng)勵(lì)性操作式條件反射檢測(cè)分析處理系統(tǒng)，通過條件性刺激(stimulus，S)、踏板操作(response，R)、物質(zhì)獎(jiǎng)勵(lì)(outcome，O)建立了一種關(guān)聯(lián)性的認(rèn)知檢測(cè)模式，先在條件刺激下訓(xùn)練動(dòng)物獲得獎(jiǎng)賞，建立條件反射(S-O)聯(lián)系，再利用踏板和條件刺激的關(guān)聯(lián)獲得獎(jiǎng)賞，建立操作條件反射(S-R-O)聯(lián)系。與傳統(tǒng)的認(rèn)知行為評(píng)價(jià)方法(如：跳臺(tái)、穿梭、避暗等)單一的學(xué)習(xí)記憶能力檢測(cè)相比，該檢測(cè)系統(tǒng)可用于多方面考察動(dòng)物的聯(lián)合性學(xué)習(xí)記憶能力，包括進(jìn)行復(fù)雜任務(wù)時(shí)的興趣、動(dòng)機(jī)、反應(yīng)力、執(zhí)行力、信號(hào)辨識(shí)力、決策力和記憶力等相關(guān)認(rèn)知能力表現(xiàn)。目前，獎(jiǎng)勵(lì)性操作式條件反射檢測(cè)分析處理系統(tǒng)正在成為一種在評(píng)價(jià)動(dòng)物認(rèn)知功能領(lǐng)域中新起的無傷害刺激且準(zhǔn)確可靠的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法。

獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射理論在國(guó)際上運(yùn)用廣泛，但至今對(duì)其所涉及到的一些實(shí)驗(yàn)因素?zé)o明確比較和研究，因此本研究通過探討不同顏色光刺激、不同刺激時(shí)長(zhǎng)和晝/夜訓(xùn)練三種實(shí)驗(yàn)因素對(duì)大鼠獎(jiǎng)賞性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響，為規(guī)范獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)方法學(xué)提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)一：SPF級(jí)雄性Wistar大鼠30只，8周齡，體重(290±10) g。實(shí)驗(yàn)二：SPF級(jí)雄性Wistar大鼠32只，8周齡，體重(290±10) g。實(shí)驗(yàn)三：SPF級(jí)雄性Wistar大鼠16只，8周齡，體重(290±10) g。均購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司[SCXK (京) 2016-0011]。實(shí)驗(yàn)室安靜，溫度恒溫保持在22℃～25℃，濕度條件為(55±10)%，12 h照明/12 h黑暗環(huán)境(8:30～20:30亮燈)[SYXK (京) 2013-0023]，飼養(yǎng)期間給予標(biāo)準(zhǔn)飼料及潔凈自來水。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵守國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理學(xué)要求，實(shí)驗(yàn)過程中按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R原則給予人道主義關(guān)懷。

1.2 主要儀器

獎(jiǎng)勵(lì)性操作式條件反射檢測(cè)分析處理系統(tǒng)，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所與中國(guó)航天員科研訓(xùn)練中心聯(lián)合研制。測(cè)試系統(tǒng)包括4個(gè)測(cè)試箱，每個(gè)測(cè)試箱的內(nèi)側(cè)壁安裝有兩套蔗糖水獎(jiǎng)賞裝置、踏板裝置以及三色信號(hào)燈，左右對(duì)稱。獎(jiǎng)賞裝置下方安裝寬度為4 cm的踏板裝置，踏板上方各有一個(gè)三色信號(hào)燈(紅、黃、藍(lán))。內(nèi)箱的頂部安裝有攝像裝置和環(huán)境光源，可以實(shí)時(shí)監(jiān)控動(dòng)物在測(cè)試箱內(nèi)暗環(huán)境下的行為活動(dòng)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 不同顏色光刺激對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響

(1)飲食限制與雙瓶喂養(yǎng)：30只大鼠隨機(jī)分為3組，適應(yīng)環(huán)境3天后，開始飲食限制。采用雙瓶喂養(yǎng)的方法，給予動(dòng)物兩瓶飲水，每只大鼠每天給予30 mL的8%蔗糖水或純凈水。兩瓶飲水每天位置對(duì)換，以免動(dòng)物偏愛其中某一方位。飲水控制的同時(shí)，每只大鼠每天給予鼠糧14～17 g，連續(xù)飲食限制10 d，目的是使限食后的動(dòng)物體重減輕到正常進(jìn)食動(dòng)物體重的80%～85%[1]，此時(shí)動(dòng)物對(duì)食物的渴求動(dòng)機(jī)最大，同時(shí)不影響動(dòng)物正常的生理需求。

圖1 獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)操作流程Fig.1 Operational process of the reward conditioned reflex experiment

(2)經(jīng)典的獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射：三組動(dòng)物第9天開始，按照?qǐng)D1操作流程進(jìn)行為期1 d的適應(yīng)訓(xùn)練，即動(dòng)物自由適應(yīng)模式，獎(jiǎng)賞裝置每(60±10) s自動(dòng)給予一滴0.2 mL 20%蔗糖水，實(shí)驗(yàn)時(shí)間30 min。第10天動(dòng)物開始進(jìn)行為期7 d的獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射的訓(xùn)練階段。在獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射訓(xùn)練期中，踏板縮回，紅色光刺激信號(hào)組給予紅燈刺激，黃色光刺激信號(hào)組給予黃燈刺激，藍(lán)色光刺激信號(hào)組給予藍(lán)燈刺激，周期性亮燈，每次亮燈10 s，此時(shí)動(dòng)物探索飲水盒時(shí)自動(dòng)促發(fā)紅外感應(yīng)裝置，發(fā)出信號(hào)至計(jì)算機(jī)，并反饋到獎(jiǎng)賞裝置自動(dòng)給予一滴獎(jiǎng)賞物質(zhì)(0.2 mL)，我們將此定義為正確鼻觸反應(yīng)，鼻觸次數(shù)被記為正確鼻觸次數(shù)(correct nose pokes，CNPs)；10 s之后信號(hào)燈熄滅，實(shí)驗(yàn)進(jìn)入間隔期(30±5) s，若此時(shí)動(dòng)物進(jìn)行探索飲水盒，將沒有獎(jiǎng)賞物質(zhì)的獲得，同樣系統(tǒng)也會(huì)記錄其鼻觸反應(yīng)，我們將其定義為錯(cuò)誤鼻觸反應(yīng)，鼻觸次數(shù)被記為錯(cuò)誤鼻觸次數(shù)(incorrect nose pokes，INPs)。每天訓(xùn)練20 min，連續(xù)訓(xùn)練7 d。記錄正確鼻觸次數(shù)、錯(cuò)誤鼻觸次數(shù)等，動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力及獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射獲得能力通過比較正確鼻觸次數(shù)和鼻觸正確率[CNPs/(CNPs + INPs)]表現(xiàn)出來。

1.3.2 不同刺激時(shí)長(zhǎng)對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響

(1)飲食限制與雙瓶喂養(yǎng)：實(shí)驗(yàn)方法同1.3.1中(1)所述。

(2)經(jīng)典的獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射：實(shí)驗(yàn)方法同1.3.1中(2)所述，但在獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射訓(xùn)練模式中，實(shí)驗(yàn)參數(shù)為：Ⅰ組：燈亮持續(xù)時(shí)間10 s，實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)20 min；Ⅱ組：燈亮持續(xù)時(shí)間30 s，實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)22.5 min；Ⅲ組：燈亮持續(xù)時(shí)間60 s，實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)30 min。三組均將藍(lán)燈作為刺激信號(hào)，周期次亮燈，亮燈次數(shù)均為15次，其他參數(shù)相同。記錄正確鼻觸次數(shù)、鼻觸正確率等指標(biāo)。

1.3.3 晝/夜訓(xùn)練對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響

(1)飲食限制與雙瓶喂養(yǎng)：實(shí)驗(yàn)方法同1.3.1中(1)所述。

(2)經(jīng)典的獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射：實(shí)驗(yàn)方法同1.3.1中(2)所述，每組連續(xù)訓(xùn)練7 d，每天一次，每次實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)20 min，記錄正確鼻觸次數(shù)、鼻觸正確率等指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

注：紅光刺激與藍(lán)光刺激比較，* P< 0.05，**P< 0.01，***P< 0.001；黃光刺激與藍(lán)光刺激比較，# P< 0.05，## P< 0.01。圖2 三種光刺激對(duì)Wistar大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響Note. Right light stimulus compared with blue light stimulus,*P< 0.05,**P< 0.01,***P< 0.001. Yellow light stimulus compared with blue light stimulus,#P< 0.05,##P< 0.01.Fig.2 Effects of light stimulation with three different color on the reward conditioned reflex of Wistar rats

2.1 三種顏色光刺激對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響

如圖2可以看出，隨著訓(xùn)練天數(shù)的增加，三個(gè)組別的大鼠的正確鼻觸次數(shù)、鼻觸正確率均逐漸上升，到第5天基本達(dá)到穩(wěn)定值。鼻觸潛伏期代表動(dòng)物首次進(jìn)行鼻觸反應(yīng)的時(shí)間，反映出動(dòng)物對(duì)S-O關(guān)聯(lián)的記憶程度，圖中看出三個(gè)組別的鼻觸潛伏期隨著訓(xùn)練的延長(zhǎng)均呈現(xiàn)大幅度下降趨勢(shì)。在訓(xùn)練第1天、第2天三組大鼠的正確鼻觸次數(shù)和錯(cuò)誤鼻觸次數(shù)即差異有顯著性，可能是由于大鼠對(duì)新環(huán)境的熟悉程度不一致導(dǎo)致的，由于學(xué)習(xí)是一個(gè)循序漸進(jìn)的過程，所以不能說明其學(xué)習(xí)能力有差異。對(duì)獎(jiǎng)賞訓(xùn)練中的運(yùn)動(dòng)路程與平均速度比較發(fā)現(xiàn)(圖3)，動(dòng)物在三種不同顏色光刺激下的運(yùn)動(dòng)路程與平均速度相似，差異無顯著性。

2.2 不同光刺激時(shí)長(zhǎng)對(duì)獎(jiǎng)賞條件反射記憶獲得的影響

如圖4顯示，與刺激持續(xù)時(shí)間10 s比較，30 s和60 s組大鼠的正確鼻觸次數(shù)顯著升高。同樣鼻觸正確率也在緩慢提高。獎(jiǎng)賞訓(xùn)練前3 d，10 s組大鼠的潛伏期最長(zhǎng)，說明大鼠對(duì)獎(jiǎng)賞的記憶能力最差。

2.3 晝/夜訓(xùn)練對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響

如圖5所示，白天訓(xùn)練組與夜晚訓(xùn)練組二者間的正確鼻觸次數(shù)、鼻觸潛伏期和鼻觸正確率差異均無顯著性。

圖3 三種顏色光刺激對(duì)Wistar大鼠運(yùn)動(dòng)路程和平均速度的影響Fig.3 Effect of light stimulation with three different color on the movement distance and average speed of Wistar rats in the reward conditioned reflex test

注：與10 s組比較，* P< 0.05，**P< 0.01，***P< 0.001；與30 s組比較，# P< 0.05，## P< 0.01，### P< 0.001。圖4 光刺激時(shí)長(zhǎng)對(duì)大鼠獎(jiǎng)賞條件反射實(shí)驗(yàn)的影響Note. Compared with the 10 s group,*P< 0.05,**P< 0.01,***P< 0.001. Compared with the 30 s group,#P< 0.05,##P< 0.01,###P< 0.001.Fig.4 Effect of time duration of conditioned stimulus on reward conditioned reflex of the rats

3 討論

經(jīng)典條件反射理論長(zhǎng)久以來被應(yīng)用于認(rèn)知行為學(xué)研究，包括獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射和懲罰性條件反射。目前常用的評(píng)價(jià)認(rèn)知行為的實(shí)驗(yàn)方法中穿梭、避暗、跳臺(tái)、Y迷宮等均是建立在條件反射理論的基礎(chǔ)上，但這些給予厭惡條件和懲罰刺激的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)會(huì)對(duì)動(dòng)物的心理和生理產(chǎn)生一定影響，而獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射理論的應(yīng)用減小了對(duì)動(dòng)物本身的傷害，更加符合國(guó)際上對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的3R原則[2]，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。課題組研究團(tuán)隊(duì)研發(fā)的獎(jiǎng)勵(lì)性操作條件反射實(shí)時(shí)測(cè)試系統(tǒng)是一種精細(xì)敏感的的認(rèn)知功能評(píng)測(cè)系統(tǒng)，利用計(jì)算機(jī)對(duì)信號(hào)資源進(jìn)行綜合分析、優(yōu)化重組，建立了針對(duì)不同認(rèn)知功能與操作方式的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑约搬槍?duì)不同操作任務(wù)與學(xué)習(xí)記憶評(píng)價(jià)的敏感行為評(píng)價(jià)指標(biāo)體系[3]，是國(guó)內(nèi)首臺(tái)應(yīng)用于大鼠的獎(jiǎng)勵(lì)性操作條件反射檢測(cè)系統(tǒng)。國(guó)外有大量文獻(xiàn)報(bào)道獎(jiǎng)勵(lì)性操作條件反射實(shí)驗(yàn)方法，研究對(duì)象主要為昆蟲[4-5]、斑馬魚[6]、軟體動(dòng)物[7]，檢測(cè)指標(biāo)主要為探頭潛伏期[8]，而此獎(jiǎng)勵(lì)性操作條件反射檢測(cè)系統(tǒng)不僅能記錄動(dòng)物軌跡，還能自動(dòng)統(tǒng)計(jì)動(dòng)物的鼻觸次數(shù)、鼻觸潛伏期、正確鼻觸次數(shù)、運(yùn)動(dòng)路程與速度等，該系統(tǒng)還能進(jìn)行信號(hào)識(shí)別辨識(shí)，位置信號(hào)識(shí)別等實(shí)驗(yàn)，可多方面評(píng)價(jià)動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶、判斷與執(zhí)行能力。

本課題組前期研究了動(dòng)物品系對(duì)獎(jiǎng)賞條件反射和操作式條件反射的行為學(xué)差異，發(fā)現(xiàn)雄性SD大鼠對(duì)獎(jiǎng)賞條件反射經(jīng)典條件反射階段對(duì)飲水盒的探索能力強(qiáng)，表現(xiàn)出對(duì)獎(jiǎng)賞物質(zhì)較強(qiáng)的興趣；而在獎(jiǎng)賞操作條件反射階段雄性Wistar大鼠的表現(xiàn)優(yōu)于雄性SD大鼠[9]。故本研究選擇雄性Wistar大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，綜合探討不同實(shí)驗(yàn)因素對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射獲得的影響，為獎(jiǎng)勵(lì)性操作條件反射實(shí)驗(yàn)做鋪墊。

圖5 晝/夜訓(xùn)練對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響Fig.5 Effect of day/night training on reward conditioned reflex of the rats

獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射在巴浦洛夫[10]經(jīng)典條件反射基礎(chǔ)上，條件刺激可為光刺激或聲音刺激[11]，獎(jiǎng)賞物質(zhì)可為固體食物或糖水，建立動(dòng)物自主獲得獎(jiǎng)賞物的條件反射。在獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射中，動(dòng)物將條件刺激與獎(jiǎng)賞物結(jié)合在一起，產(chǎn)生正性作用，起到預(yù)測(cè)獎(jiǎng)勵(lì)的作用[12]。為研究不同光刺激對(duì)大鼠條件反射建立的影響，本實(shí)驗(yàn)選取三種光作為條件刺激，紅色、藍(lán)色和黃色，同時(shí)也考察大鼠的視覺識(shí)別能力。嚙齒類動(dòng)物的視覺辨別能力是由其體內(nèi)的SWS1(shortwavelengthsensitivetype1)和LWS(longwavelengthsensitivetype)基因家族控制[13]，且大、小鼠的SWS1色素只能接收紫外光(400 nm)，LWS色素可接收光波長(zhǎng)為510～540 nm的光[14]。而紅光波長(zhǎng)為620～750 nm，藍(lán)光波長(zhǎng)為460～480 nm[15]，黃光波長(zhǎng)為570～590 nm，因此，大鼠對(duì)藍(lán)光較其他兩光源更敏感[16]。但從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出，三組動(dòng)物的鼻觸次數(shù)、正確鼻觸率、鼻觸潛伏期、運(yùn)動(dòng)路程及速度差異均無顯著性。說明三組運(yùn)功能力相當(dāng)，不存在由于運(yùn)動(dòng)功能缺陷導(dǎo)致的條件反射記憶獲得的差異，所以紅、黃、藍(lán)三種光刺激對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射的獲得無影響。

大量研究表明，訓(xùn)練次數(shù)的增加對(duì)條件反射的建立有促進(jìn)作用，可形成長(zhǎng)期的條件反射記憶[5, 17]。要建立穩(wěn)定的條件反射，條件刺激信號(hào)須反復(fù)出現(xiàn)，且經(jīng)不斷訓(xùn)練，動(dòng)物才能逐漸習(xí)得信號(hào)與獎(jiǎng)勵(lì)間的關(guān)聯(lián)。條件刺激在條件反射習(xí)得過程中充當(dāng)了一種強(qiáng)有效的條件強(qiáng)化物，能加固非條件刺激與獎(jiǎng)賞物之間的聯(lián)系[18]。故本研究考察條件刺激持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)條件反射獲得的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)訓(xùn)練天數(shù)及其他參數(shù)一致時(shí)，前3 d條件刺激時(shí)間為10 s時(shí)，動(dòng)物對(duì)獎(jiǎng)勵(lì)條件的記憶力最差，而當(dāng)條件刺激作用30 s或60 s時(shí)，動(dòng)物表現(xiàn)出對(duì)獎(jiǎng)勵(lì)物有很強(qiáng)的興趣，且鼻觸正確率顯著提高。本實(shí)驗(yàn)室前期研究者石哲[19]選擇給予藍(lán)光條件刺激持續(xù)10 s[20]，每天訓(xùn)練一次，共訓(xùn)練10 d，動(dòng)物對(duì)獎(jiǎng)勵(lì)物也表現(xiàn)出強(qiáng)烈的探索興趣，條件反射形成。結(jié)合本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以說明適當(dāng)延長(zhǎng)條件強(qiáng)化物的持續(xù)時(shí)間有利于在短時(shí)間內(nèi)建立良好的條件反射，提高動(dòng)物記憶效率。

幾個(gè)世紀(jì)以來關(guān)于植物[21]和動(dòng)物[22]的晝夜節(jié)律的研究眾多，機(jī)體的一切生理活動(dòng)均受晝夜節(jié)律的控制，如睡眠、激素分泌和行為等[23]，晝夜節(jié)律對(duì)認(rèn)知功能的影響也有大量報(bào)道[24-27]。幾項(xiàng)研究表明，生物鐘對(duì)學(xué)習(xí)和記憶的影響可能是不相同的。在某些情況下，形成記憶的能力可能與晝夜節(jié)律相獨(dú)立，但時(shí)間戳作為聯(lián)系回憶與表現(xiàn)的線索，在倉鼠[28]和大鼠[29]學(xué)習(xí)后間隔24 h內(nèi)會(huì)更好。在其他情況下，回憶可能很大程度上與檢測(cè)階段無關(guān)，但記憶的獲取或整合可能取決于訓(xùn)練的晝夜節(jié)律，如軟體動(dòng)物[30-31]、昆蟲[27,32-33]、魚[34]和小鼠[35]。Cain等人[36]研究了Wistar大鼠與Long Evans大鼠兩種大鼠的條件位置偏好的時(shí)間節(jié)律，發(fā)現(xiàn)大鼠品系對(duì)學(xué)習(xí)記憶任務(wù)的表現(xiàn)有很大影響，一天中某個(gè)特定時(shí)間點(diǎn)的學(xué)習(xí)任務(wù)作為一個(gè)變量對(duì)Wistar大鼠的影響更大。目前，大多數(shù)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)是在白天進(jìn)行，而嚙齒類動(dòng)物屬夜行性動(dòng)物，在研究晝/夜訓(xùn)練對(duì)獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響時(shí)，結(jié)果顯示白天訓(xùn)練組與夜晚訓(xùn)練組大鼠的正確鼻觸次數(shù)和鼻觸正確率沒有明顯差異，說明晝/夜訓(xùn)練不影響大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射的習(xí)得。但對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性操作條件反射是否受晝夜節(jié)律影響，還需深入研究。

此次研究首次探討了三種因素對(duì)大鼠獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射實(shí)驗(yàn)的影響，結(jié)果說明了三種不同顏色的光刺激對(duì)大鼠條件反射的習(xí)得無影響，但光刺激時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)其學(xué)習(xí)成績(jī)有影響，適當(dāng)增長(zhǎng)光刺激時(shí)間有利于條件反射的形成。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明晝/夜訓(xùn)練對(duì)大鼠訓(xùn)練成績(jī)無影響，可在白天進(jìn)行與獎(jiǎng)勵(lì)性條件反射相關(guān)的訓(xùn)練。

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