熒光光譜法測定蔬菜中辛硫磷的殘留量

陳晶晶

摘要：在磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖溶液中，H2O2會氧化羅丹明B，當在羅丹明B中加入辛硫磷后，體系的熒光強度明顯降低，且熒光強度降低值與辛硫磷的加入量呈良好的線性關系，據此建立了測定辛硫磷殘留量的新方法。

關鍵詞：熒光光譜法；辛硫磷；羅丹明B；過氧化氫

引言

目前我國使用量最多的農藥是辛硫磷農藥，此類農藥能有效地控制害蟲、雜草及細菌的生長，提高農業產量，但它屬于高毒性農藥，大量使用會造成許多潛在的危害[1]。隨著農藥的無節制用，蔬菜中農藥殘留問題越來越嚴重，這不僅污染環境，而且危害人類身心健康。因此，建立高效、快速、精準的檢測蔬菜中辛硫磷農藥殘留的方法迫在眉睫[2-3]。

本文研究表明：在羅丹明B溶液中加入過氧化氫溶液后，體系的熒光強度明顯降低，當再加入辛硫磷后，熒光強度顯著猝滅，且熒光強度降低的程度與加入辛硫磷的量呈良好的線性關系，據此建立了熒光法測定辛硫磷殘留量的新方法。

一、實驗過程

（一）儀器與試劑

1.儀器：F-7000型熒光光譜儀； KQ3200超聲波清洗器；BS224S型電子分析天平；移液管；比色管；比色皿。

2.試劑：磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉，硫酸，冰醋酸，醋酸鈉，辛硫磷（18.5%），過氧化氫（30%，），羅丹明B，以上所用試劑均為分析純。

3.標準溶液的配制。1.0×10-4mol/L 羅丹明B溶液；6%過氧化氫標準溶液；pH=1的硫酸溶液；pH=4.74的醋酸醋酸鈉溶液； 辛硫磷儲備液7.4mg/L：準確量取18.5%的辛硫磷溶液1.0mL稀釋到250mL的容量瓶，然后取0.1mL稀釋到10mL比色管中；

4.材料：菠菜（市售）；油菜（市售）；生菜（市售）。

（二）實驗方法

在幾支 10 mL 比色管中，用移液管依次準確加入濃度為 1.0×10-4 mol/L 羅丹明B溶液 2.0 mL和一定量的表面活性劑和適量的辛硫磷溶液，然后加入6%過氧化氫溶液2.5mL稀釋至所需刻度線，搖勻，充分反應后，于激發波長264nm，發射波長587nm處測定熒光強度（If），在相同條件下測定試劑空白的熒光強度（If0），計算熒光猝滅值ΔIf（If0-If）。

二、結果與討論

（一）熒光光譜

在熒光光譜上分別掃描羅丹明B-H2O2-磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉-辛硫磷體系的激發光譜和發射光譜，實驗結果表明，體系的λex=264.0nm，λem=587.0nm。當再加入H2O2一定濃度的后，發現熒光強度明顯降低，當加入一定濃度的辛硫磷后，發現熒光強度明顯降低，但峰位置并不發生改變，且熒光強度降低的程度與辛硫磷濃度在一定范圍內成正比。因此，說明辛硫磷可使體系熒光猝滅，基于此，可用熒光光譜法測定辛硫磷。

（二）標準曲線

先取一支比色管中依次加入為羅丹明B溶液2.5mL、磷酸鹽緩沖溶液1.0mL，然后都加入過氧化氫溶液2.5mL時，測定空白值，然后在八支比色管中加入上述溶液后加入辛硫磷溶液0.1mL～2.5mL。用熒光強度差值ΔIf做標準曲線。按實驗方法測定辛硫磷系列標準溶液的熒光強度，以辛硫磷的濃度對對應的ΔIf繪制 標準線。

實驗結果表明，辛硫磷的濃度在7.4mg·L-1～185mg·L-1之間與ΔIf成良好的線性關系。其線性回歸方程為ΔIf=4.7505c+125.02，線性相關系數為r=0.9914。檢出限為0.53mg·L-1。

（三）分析應用

1.樣品處理。用電子天平準確稱取菠菜（9.5220g）、油菜（9.9204g）、生菜（9.5047g）加入250mL錐形瓶中，往錐形瓶中分別加入50 mL超純水，浸泡12小時后，置于超聲波清洗容器中振蕩5 min，取上清液進行測定。

2.加標回收率實驗。分別取三支10mL比色管，然后在優化的實驗條件下，按1.2中實驗方法測定樣品空白和加入了6.0mL的溶液在加了4.0mL樣品溶液，平行測定3次，然后在另外三支10ml比色管中加入待測的0.5mL的辛硫磷農藥溶液，計算熒光強度的差值，同理，然后再分別測定辛硫磷溶液1.0mL，1.5mL時的熒光強度的差值，測完后根據標準曲線上的標準溶液的值，計算加標回收率，優化的實驗條件下，取于3.1中相同量的試樣提取液，向試樣中加入一定量的待測成分標準物質，在587.0nm處的熒光強度If，測定結果如表4所示。

三、結論

在羅丹明B和混合磷酸鹽以及過氧化氫混合溶液中加入農藥辛硫磷后，體系熒光強度明顯下降，結果表明，辛硫磷可使體系熒光猝滅。發現體系的熒光強度降低值與辛硫磷含量在一定濃度范圍內成線性關系，基于此，可建立羅丹明B、混合磷酸鹽和過氧化氫測定辛硫磷的熒光分析法，該方法測定快速、簡便、靈敏度高，可用于蔬菜中辛硫磷殘留量的測定。

參考文獻

[1]程定璽，趙亞鵬，左國強等.熒光光譜法測定有機磷農藥殘留量[J].解放軍藥學學報， 2010，（46）：645-647.

[2]余櫚.長沙市蔬菜有機磷農藥殘留檢測與分析[J].科技與產業，2010.4：20-21.

[3]周睿璐，付大友，郭雪琰等.試紙法快速檢測果蔬中敵敵畏含量的研究[J].2017.46（1）：107-112.