吉非替尼聯用中藥復方治療非小細胞肺癌的研究

李 楠，李劍男

（1.中國人民解放軍第455醫院，上海 200052；2.長春中醫藥大學藥學院，長春 130117）

肺癌是我國多發性惡性腫瘤之一，具有極高的致死率[1]，肺癌的發病率和病死率位居惡性腫瘤之首。其中小細胞肺癌（NSCLC）約占肺癌總體發病率的80%以上，且大約70%的患者在確診時病情已屬中晚期，失去了手術徹底根治的機會。隨著肺癌發病機制及其生物學特性的研究不斷深入，以吉非替尼為代表的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI）在EGFR基因敏感的晚期NSCLC患者治療上取得了突破性的進展，但同時不可避免地伴隨著不良反應及耐藥情況的發生，阻礙了后續的治療。

1 抗腫瘤實驗研究

1.1 抗腫瘤機制 肖烈鋼等[2]采用MTT法觀察了吉非替尼聯用加味四君固本湯的含藥血清對人非小細胞肺癌細胞系A549和Hcc827增殖情況的影響。加味四君固本湯由人參、白術、茯苓、炙甘草、黃芪等藥物組成，具有扶正固本、活血解毒的功效。結果表明，吉非替尼抑制 A549 和 Hcc827 細胞增殖的半數抑制濃度（IC50）分別為 46.18 μmol/L 和 61.99 μmol/L（P＜0.05）；加味四君固本湯作用于肺癌細胞后，隨著濃度的逐漸增加，其對癌細胞抑制率逐漸增高（P＜0.05）；加味四君固本湯與吉非替尼聯用則加強了吉非替尼對 A549和 Hcc827 細胞增殖抑制作用（P＜0.05）。表明吉非替尼與加味四君固本湯聯合用藥可協同抑制A549 和Hcc827 細胞增殖。馬峰[3]采用流式細胞儀觀察不同劑量的益氣通絡解毒方含藥血清聯用吉非替尼對人肺腺癌 H1975 細胞凋亡情況的影響。用免疫組化法觀察不同劑量組中移植瘤細胞中的凋亡相關蛋白 Caspase-3 表達量的變化。 用Western blotting 法觀察各組移植瘤細胞中血管內皮生長因子（VEGF）表達量的變化。體外實驗結果表明，益氣通絡解毒方聯用吉非替尼可以有效抑制肺癌H1975細胞的增殖和凋亡。其機制可能是通過上調凋亡蛋白Caspase-3的表達。體內實驗結果說明，益氣通絡解毒方聯用吉非替尼能夠有效抑制BALB/c 裸鼠移植瘤的生長，其機制可能是通過上調凋亡蛋白 Caspase-3 的表達量，下調 VEGF表達量，從而發揮抑制腫瘤血管生成的藥理作用。

1.2 逆轉耐藥機制 孫璽媛等[4]取人肺腺癌 PC-9 細胞及人肺腺癌獲得性耐吉非替尼 PC-9R細胞株，以血清藥理學理論為基礎，采用MTT 和 West-Blot 、Realtime PCR 等實驗技術，觀察金復康口服液對非小細胞肺腺癌吉非替尼獲得性耐藥情況的影響。金復康口服液由黃芪、北沙參、麥冬、女貞子（酒制）、山茱萸、絞股藍、淫羊藿、胡蘆巴（鹽炒）、石上柏、石見穿、重樓、天冬等中藥組成。該方具有益氣養陰、清熱解毒的功效。實驗結果表明金復康口服液不僅能有效抑制PC-9 肺腺癌細胞的生長，還能抑制耐吉非替尼 PC-9R細胞的生長，并呈時間及劑量依賴性。金復康聯用吉非替尼后對PC-9R細胞的增殖抑制作用明顯增強，吉非替尼的IC50明顯降低。金復康口服液逆轉PC-9R細胞對吉非替尼的耐藥倍數為 11.3 倍，表明兩藥有協同作用。金復康口服液聯合吉非替尼給藥組的P-EGFR 基因的mRNA 表達量顯著低于吉非替尼組。該實驗表明金復康口服液對抗吉非替尼獲得性耐藥可能與下調 p-EGFR基因的表達有關。

楊小兵[5]通過建立獲得性耐藥非小細胞肺癌裸鼠皮下移植瘤模型來觀察吉非替尼聯合扶正抗癌方對晚期NSCLC增效的作用機制。扶正抗癌方組成，太子參30 g、白術15 g、黃芪30 g、炒薏苡仁30 g、甘草10 g、山慈姑30 g、白花蛇舌草30 g、龍葵30 g、石見穿30 g、八月扎30 g、蛇泡簕30 g、莪術15 g。具有健脾益氣，補肺化痰，清熱解毒，祛瘀散結等功效。先給60只裸鼠右腋下接種對吉非替尼低度耐藥的H1650細胞株。造模成功后進行隨機分組：空白對照組（0.9%生理鹽水）、吉非替尼組（5 g/mL）、中藥低劑量組（6.2 g/mL）、中藥高劑量組（12.4 g/mL）、低劑量聯合藥組，高劑量聯合藥組。每組10只裸鼠。然后每天給裸鼠胃內給藥0.2 mL，共給藥15 d。給藥結束后，測量各組裸鼠轉移瘤體積、抑瘤率，并對瘤體及靶器官進行切片觀察，檢測微管密度、增殖指數，Tnuel法檢測凋亡指數，用免疫組化法檢測EGFR、ERK、AKT及其磷酸化蛋白的表達情況。實驗結果表明，聯合用藥組對裸鼠非小細胞肺癌H1650移植瘤的抑制優于單用吉非替尼組或單用中藥組，且高劑量聯合用藥組作用效果最佳；聯合用藥組誘導H1650移植瘤細胞凋亡情況也優于單用吉非替尼和單用中藥組。聯合用藥組對AKT、ERK及P-ERK表達下調優于單用中藥組和單用吉非替尼組。扶正抗癌方的作用機制是通過下調AKT、ERK及P-ERK等基因表達而增強吉非替尼的療效。實驗證明扶正抗癌方與吉非替尼聯合用藥有協同抑制腫瘤生長，增加抗癌療效。

2 臨床研究

2.1 減毒增效 于文瀚[6]選取99例非小細胞肺癌患者（KPS＞50），根據中醫辨證分為5個類型，肺脾氣虛型（健脾益氣，服用黃芪、黨參、茯苓、白術等）、肺陰虛型（滋陰潤肺，服用沙參、玄參、麥冬、百合等）、氣陰兩虛型（益氣養陰，服用黃芪、黨參，沙參，麥冬、百合等）、瘀熱內結型（祛濕化痰兼化瘀，服用陳皮，半夏，瓜蔞，膽南星等）、氣滯血瘀型（行氣化瘀，服用黃芪，赤芍，丹參，郁金等）。患者每天服用相應中藥湯劑加吉非替尼250 mg/片。15 d為1個療程，共6個療程。結果：6個月存活率94.9%，1年69.7%。痤瘡樣皮疹發生率68.7%，脫皮發生率20.2%，皮膚瘙癢發生率44.8%，腹瀉為62.1%，惡心嘔吐為4.0%，轉氨酶生高率為3.0%，鼻出血為7.1%，無間質性肺炎的發生。表明吉非替尼聯用中藥可以有效改善臨床癥狀，穩定病灶，延緩病情的發展。李新澤等[7]選取206 例中晚期NSCLC患者，隨機平均分為 2 組，對照組 103 例口服替尼 250 mg，1 次/d；觀察組 103 例給予吉非替尼加中藥復方，1次/d。中藥復方組成為人參、天冬、麥冬、杏仁、牡蠣各10 g，生黃芪、沙參各15 g，白花蛇舌草、半枝蓮、夏枯草各 20 g，蜈蚣 2條，咳嗽較重者加浙貝母與半夏，胸痛者加田七與延胡索，咯血者加白及、白茅根、仙鶴草，大便干結者加大黃、玄參。在治療 16 周后統計近期療效。結果：觀察組完全緩解率及臨床總有效率均明顯高于對照組；觀察組治療后KPS評分明顯高于對照組及治療前；觀察組中腹瀉、惡心嘔吐等不良反應發生率明顯低于對照組。表明吉非替尼聯用中藥復方治療晚期非小細胞肺癌可以有效提高治療有效性，延長患者的無進展生存期，并減少毒副反應。

2.2 延緩耐藥 康小紅等[8]觀察40例晚期肺腺癌患者服用肺巖寧方加吉非替尼（或厄洛替尼）后的臨床療效和延緩吉非替尼耐藥現象發生的時間。實驗方法為晚期表皮生長因子受體（EGFR）突變的肺腺癌患者40例，分為2組，對照組18例（吉非替尼或厄洛替尼）；治療組22例（吉非替尼或厄洛替尼加肺巖寧方）。治療直至疾病進展或不能耐受不良反應為止。觀察近期臨床療效、不良反應及疾病進展時間。結果：對照組和治療組的臨床有效率分別為61.11%和68.18%，疾病控制率分別為88.89%和90.91%。與藥物相關主要不良反應為皮疹和輕度腹瀉，2組比較，差異無統計學意義。中位疾病進展時間，對照組和治療組分別為9.5月和12.0月，肺巖寧方延緩吉非替尼（或厄洛替尼）耐藥2.5月。實驗說明肺巖寧方具有一定延緩或阻止吉非替尼（或厄洛替尼）耐藥現象發生的作用。

張慧敏[9]觀察 60 例非小細胞肺癌患者服用益氣通絡解毒方加吉非替尼（或厄洛替尼）的臨床療效及延緩吉非替尼耐藥性出現的時間情況。隨機分為治療組30例（益氣通絡解毒方 +吉非替尼/厄洛替尼），對照組30例（吉非替尼/厄洛替尼）。接受治療4周后進行療效評價。實驗結果表明在生存質量方面：治療組生活質量評分高于對照組。2組 PFS分別為 12.4 個月和 9.5個月，治療組 PFS 延長了2.9個月。表明益氣通絡解毒方有一定的延緩或防治吉非替尼/厄洛替尼耐藥的作用。

3 結語

吉非替尼是一種表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑，其作用效果好，對與癌細胞增殖、生長、存活有關的信號傳導通路有著強烈的拮抗作用。吉非替尼能通過促進癌細胞凋亡、抗癌細胞血管生成、抗癌細胞分化增殖和抗癌細胞遷移等方面實現精準抗癌[10]。吉非替尼療效好，但不良反應大；靶點單一，極易產生耐藥性。中藥復方是根據中醫藥理論，采用辨證施治的方法調配而成。中藥復方注重調節患者整體內環境，能夠促進體內環境平衡穩定。因此中藥復方能夠增強機體免疫力，從而提高患者對吉非替尼的耐受性，減輕其毒副反應。中藥復方含有多種抗癌活性成分[11-15]，具有低毒、安全、多靶點等特點，能多途徑、多階段

地逆轉肺癌細胞對吉非替尼的耐藥性，增強藥物療效。因此吉非替尼聯用中藥復方具有攻、補兼施，標、本兼治的作用，是有效的治療晚期非小細胞肺癌的臨床治療方案。

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