劍川青花雞球蟲病流行病學調查與防控現(xiàn)狀

徐家付 許紅秦 趙 琴 鄭紹紅 白文順 戴劍濤 姜 夢 楊亮宇**

（1.云南省曲靖市馬龍縣畜牧獸醫(yī)局，云南馬龍 655199；2.云南農業(yè)大學動物科學技術學院，云南昆明 650201；3.云南農業(yè)大學動物醫(yī)學院，云南昆明 650201）

雞球蟲病是由艾美耳屬的多種球蟲寄生于雞腸道引起的疾病，給養(yǎng)雞業(yè)造成了巨大的經濟損失[1]。此病是一種分布廣泛，嚴重危害雞生長發(fā)育的腸道原蟲病[2]。目前防治禽球蟲病仍以抗球蟲藥為主[3]。青花雞原產于劍川自然條件復雜的少數(shù)民族集中邊遠鄉(xiāng)村，由于其體格中等、肉質風味好、抗病力強、適應性好等優(yōu)點備受當?shù)厝嗣裣矏踇4]。調查了解劍川地區(qū)雞球蟲病發(fā)生因素、發(fā)展規(guī)律和感染狀況及目前防控現(xiàn)狀，對發(fā)展地方特色產業(yè)具有重要意義。

藥物防治本病是目前規(guī)模化雞場普遍采用的一種方法，在我國養(yǎng)雞生產過程中，大部分雛雞飼料中都會添加抗球蟲病藥物，每年投入預防本病藥費占雞病防治費用的1/5～1/3[4]。隨著抗生素類球蟲藥物廣泛應用，球蟲耐藥性突出并且嚴重，多重耐藥性現(xiàn)象加上交叉耐藥性問題使得藥物使用年限大大縮短。雖然人們對雞球蟲病免疫預防進行了一些研究，但目前及今后相當長一段時間內，藥物防治仍是控制雞球蟲病的主要手段[4]。了解地方品種青花雞球蟲感染狀況及目前人們對此病防控探索，對科學防控球蟲類疾病和降低養(yǎng)殖成本具有重要意義。

1 實驗材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

選取劍川縣金華鎮(zhèn)、甸南鎮(zhèn)、沙溪鎮(zhèn)、馬登鎮(zhèn)、羊岑鄉(xiāng)34個自然村青花雞散養(yǎng)戶和5個青花雞養(yǎng)殖場中10～65日齡青花雞作為采樣對象。

1.1.2 試驗試劑

重鉻酸鉀（K2Cr2O72.5%），瓊脂粉，蒸餾水、飽和鹽水、生理鹽水（云南農業(yè)大學動物醫(yī)學院公共實驗室提供）。

1.1.3 主要儀器

無菌6寸自封塑料袋2000個，40目的銅網3個、燒杯10個、載玻片100片、260目的尼龍網3個、鐵絲圈5個（由云南農業(yè)大學公共實驗室提供）。冰箱（海爾集團）、低速離心機（上海珂淮儀器有限公司）、顯微鏡（北京世紀科信科學儀器有限公司）。

2 實驗方法

2.1 糞樣采集

2016年1月至2017年6月從劍川縣“四鎮(zhèn)一鄉(xiāng)”共34個自然村散養(yǎng)戶和5個養(yǎng)殖場作為調查采樣點。對每個自然村散養(yǎng)戶隨機采取糞樣20份，集中養(yǎng)殖場隨機采取新鮮糞樣724份，病死雞盲腸病樣14份，共計1418份。糞樣每份20～50g分別裝入無菌6寸自封袋，擠壓出袋內空氣，并且編號、標注日齡、地區(qū)，養(yǎng)殖方式及地址代碼等，并且放入4℃冰箱進行保存待檢。分階段進行實驗室檢測并統(tǒng)計。

2.2 球蟲卵囊收集和觀察

糞樣采用飽和鹽水漂浮法檢查蟲卵，收集陽性糞樣置并于4℃冰箱內待進一步分離和觀察卵囊。

2.3 卵囊分離培養(yǎng)及鑒定

2.3.1 卵囊分離培養(yǎng)

使用飽和鹽水和離心沉淀法進行沉浮，分離糞內卵囊。保存最底層沉渣（含卵囊）等待培養(yǎng)。

2.3.2 卵囊鑒定

根據卵囊形狀特征，參照有關文獻、圖譜進行種類鑒定。分析感染蟲卵、陽性率、地方主要蟲卵。

3 結果與分析

3.1 自然村散養(yǎng)戶情況

表1結果表明：通過調查自然村散養(yǎng)戶，結果查出了柔嫩艾美爾球蟲感染且平均陽性率為14.00%，死亡率為1.06%。

3.2 中小規(guī)模養(yǎng)殖場情況

表1 自然村散養(yǎng)戶感染情況

表2 養(yǎng)殖場感染情況

表2結果表明：通過調查規(guī)模養(yǎng)殖場，發(fā)現(xiàn)青花雞球蟲感染源為柔嫩艾美爾球蟲和毒害艾美爾球且平均陽性率分別為22.34%、5.59%，死亡率為0.90%。

3.3 采用不同養(yǎng)殖方式感染情況

表3 不同養(yǎng)殖方式感染情況

表3結果表明：青花雞采用林間放養(yǎng)陽性率12.78%；林間圈養(yǎng)陽性率15.7%；地面籠養(yǎng)29.07%；立體網養(yǎng)陽性率28.51%。

3.4 不同日齡感染情況

表4 不同日齡感染情況

表4結果表明：青花雞被球蟲病感染日齡集中在15～45日齡，其中15～30日齡感染陽性率最高為38.82%。46～65日齡的陽性率為6.64%。

3.5 不同季節(jié)感染情況

表5 不同季節(jié)感染情況

表5結果表明：青花雞感染球蟲集中在夏秋季且陽性率分別為37.50%、37.01%。

4 討論

4.1 球蟲感染情況

調查發(fā)現(xiàn)，自然村散養(yǎng)戶球蟲感染蟲株為柔嫩艾美爾球蟲，規(guī)模養(yǎng)殖場以柔嫩艾美爾球蟲為主，同時還兼有毒害艾美爾球蟲感染；林間放養(yǎng)感染最低，地面籠養(yǎng)和立體網養(yǎng)最高；球蟲病感染日齡集中在15～45日齡，雞只在夏秋季易被感染。

球蟲卵囊抵抗力強且在土壤中生活周期長，可達15～18個月，當氣溫適宜時一般只需要18～26小時，就可能成為感染性卵囊[5]。通過病死雞臨床解剖和實驗室檢測，發(fā)現(xiàn)球蟲主要寄生于雞只盲腸和鄰近腸道組織，通過鑒定出在當?shù)馗腥鞠x源是柔嫩艾美爾球蟲，在感染發(fā)病急性型病例中，解剖時表現(xiàn)典型臨床癥狀：兩側盲腸顯著腫大數(shù)倍，充滿凝固新鮮暗紅色血液，盲腸上皮變厚或脫落為主。可能因為地方品種青花雞在15～30日齡還處于育雛階段，在脫溫舍內生長時溫度、光照、濕度以及飼養(yǎng)管理水平、飼料污染等條件影響，導致陽性率普遍較高；46～65日齡是育成階段，此時在農村散養(yǎng)戶和小型養(yǎng)殖企業(yè)中進行育成，可能普遍采用林下圈養(yǎng)、林下放養(yǎng)和有規(guī)律藥物預防，導致陽性率偏低。

雞球蟲卵囊本身無感染性，但條件適宜（最適溫度在22℃～30℃；最適濕度在60%～75%；有充足氧氣等）具備孢子化條件即可完成孢子生殖，就能形成具有感染力的孢子化卵囊。這種卵囊被雞只食入，就可能造成球蟲病發(fā)作。因為夏秋季節(jié)，溫度、濕度具備卵囊孢子化增殖條件，所以夏秋季是雞只球蟲病多發(fā)、易發(fā)季節(jié)。青花雞是地方品種土雞，生活于大山深處，覓食奔跑于鄉(xiāng)間林地，肌肉骨骼健壯，與本地其他品種土雜雞外來肉雞相比本身抗病力強，所以對球蟲感染抵抗力較強，即使感染球蟲而發(fā)病，死亡率也普遍偏低。

4.2 飼養(yǎng)管理情況

在當?shù)剞r村區(qū)域，飼養(yǎng)管理仍處于粗放狀態(tài)，人們對雞球蟲病意識普遍淡薄，甚至忽視家禽寄生蟲類疾病。經基層畜牧獸醫(yī)技術推廣人員長期科普宣傳，狀況有所好轉。雖然青花雞抗病力強，抗感染強且平均陽性率僅為14.00%，平均死亡率僅為1.06%，但外來帶蟲雞只引進混合飼養(yǎng)，還是會讓蟲源持續(xù)存在于自然環(huán)境中而持續(xù)感染。青花雞球蟲病在中小養(yǎng)殖場感染發(fā)病狀況和相關配套設施完善度、預防程序和飼養(yǎng)管理水平高低、外來帶蟲雞只引進混合飼養(yǎng)等有關，這些條件都可能為柔嫩艾美耳球蟲持續(xù)感染發(fā)病創(chuàng)造條件。即使場內長期存在感染性蟲源，只要在飼養(yǎng)管理上面面俱到，也可能控制雞群發(fā)病。

規(guī)模化養(yǎng)殖時對雞只采用網養(yǎng)或者籠養(yǎng)方式可以減少球蟲病發(fā)生概率。在集約化養(yǎng)殖中雛雞飼料配方設計上要注重營養(yǎng)全面，必須保證蛋白質和維生素供給。平時養(yǎng)殖中注重及時除糞除污物，防止其對飲水、飼料、養(yǎng)殖場地環(huán)境污染。雞只時常接觸料槽、飲水設施，必須持續(xù)堅持使用消毒液清洗，而后即刻擦拭干凈。每天能持續(xù)消毒，對廄舍地面采用 3%的火堿水噴灑。目前本地主要感染蟲株還比較單一，所以飼養(yǎng)管理水平在規(guī)模化養(yǎng)殖業(yè)中防控此類疾病顯得尤為重要。

5 球蟲病藥物防控現(xiàn)狀

5.1 抗生素使用情況

規(guī)模化雞場防治雞球蟲病藥物自2 0世紀3 0年代，GrumblesLC[5]首先用磺胺類藥物防治雞球蟲病以來，采用化學藥物防治雞球蟲病，逐漸成為控制該病的主要手段。目前，很多規(guī)模化雞場在使用藥物來防治禽類球蟲病時，多數(shù)選擇化學合成類、聚醚類、離子載體類藥物，少數(shù)選擇含有中草藥成分和中西復合劑類藥物。隨著抗球蟲病抗生素類藥物廣泛應用，球蟲疾病中某些蟲株對抗生素類藥物敏感性呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。

1974年已發(fā)現(xiàn)巨型艾美耳球蟲對抗生素類藥物產生了耐藥性；孔繁瑤等[7]分別對采自我國部分地區(qū)柔嫩艾美耳球蟲進行調查研究，發(fā)現(xiàn)對莫能菌素、鹽霉素和拉沙菌素具有不同程度的抗藥性；黃兵等[8]對上海地區(qū)部分雞場雞球蟲抗藥程度進行調查，發(fā)現(xiàn)分離球蟲株對莫能菌素出現(xiàn)完全耐藥性比例高達67%～80%，對馬杜霉素出現(xiàn)中度耐藥和完全耐藥比例也高達50%。所以抗球蟲類抗生素藥物目前出現(xiàn)普遍耐藥現(xiàn)象。

劍川部分養(yǎng)殖場，青花雞和外來土雜雞混合飼養(yǎng)，目前感染蟲株主要為柔嫩艾美爾球蟲及少數(shù)毒害艾美爾球。不發(fā)病情況下多數(shù)采用抗生素間斷飼喂預防。調查發(fā)現(xiàn)：在中小規(guī)模化雞場中存在使用抗球蟲藥物時比較注重合理應用且重視藥物療效的現(xiàn)象。一些養(yǎng)殖場采取抗生素聯(lián)合用藥、穿梭用藥和輪換用藥方式進行預防且取得了一定效果，但是抗生素耐藥性的出現(xiàn)確實提高了養(yǎng)殖成本，也出現(xiàn)相同蟲株在短時間內重復感染狀況。這些現(xiàn)象的出現(xiàn)迫使人們在實踐中不斷探索。

5.2 新型藥物使用情況

目前，在養(yǎng)禽業(yè)中不斷探索抗生素替代藥，以減少耐藥性和降低養(yǎng)殖成本。楊桂連等人[7]使用乳酸菌等益生菌在雛雞抗柔嫩艾美耳球蟲感染中的作用研究，于攻蟲前后檢測細胞因子IFN-γ和IL-2、IgG和SIgA水平，結果表明了乳酸菌能顯著提高IFN-γ、IL-2、IgG、SIgA水平和外周血中T淋巴細胞數(shù)量，從而增強了機體細胞和體液免疫水平（P〈0.05）。此外，其研究還證實了乳酸菌能顯著性減輕雛雞對球蟲感染，對球蟲發(fā)病導致的雛雞增重也能顯著性降低，還能降低球蟲卵囊排出量和對雛雞盲腸病理損傷率（P〈0.05），同時ACI值也達到了中等抗球蟲水平，乳酸菌類產品在養(yǎng)殖業(yè)中不斷實踐應用且有望成為養(yǎng)雞業(yè)中球蟲病防治新手段。

張濤[10]使用復合乳酸菌飼喂雛雞，研究乳酸菌抗球蟲效果，結果表明飼喂復合乳酸菌組腸道上皮細胞內球蟲含量變得最少。其研究還表明給雛雞口服復合乳酸菌后，雞只在感染球蟲后CD4+T和CD8+T細胞亞群與其他組相比顯著增高；在雛雞飲水或者飼料中添加復合乳酸菌制劑飼喂后能對雞只易感的柔嫩艾美耳球蟲有一定抑制作用，復合型乳酸菌制劑有望成為抗球蟲藥物的替代產品。復合乳酸菌、復合微生態(tài)制劑在抗雛雞球蟲病實踐應用研究中逐步取得成效。

在本次調查中發(fā)現(xiàn)一些青花雞養(yǎng)殖場在預防球蟲有新方法：一是利用堆糞發(fā)酵殺蟲卵來控制感染源；二是利用離子酸化劑在育雛階段（15～35日齡）分批次有計劃適量投于飲水中飼喂控制球蟲病；三是利用復合微生態(tài)制劑（乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌等）活菌劑量為2.75×107cfu/ml，在育雛階段分別于7日齡、15日齡、23日齡、35日齡添加于飲水中投喂，采用每次連續(xù)使用兩天的方法來控制球蟲病。

總之，新型替代藥物的應用和有效防控措施是未來預防球蟲病的趨勢。

6 小結

通過本次調查結果發(fā)現(xiàn)地方品種青花雞球蟲病平均感染率約為21.5%，平均死亡率為1.50%，感染源為柔嫩艾美爾球蟲和毒害艾美爾球蟲。其中主要以柔嫩艾美爾球蟲感染15～45日齡雞只，感染發(fā)病季節(jié)集中在夏秋季節(jié)。在用藥防控實踐中，養(yǎng)殖戶根據實際情況不斷探索新方法控制球蟲病。這次調查結果為發(fā)展高原地方特色產業(yè)提供參考。

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