晚期糖化終末產(chǎn)物在乳腺癌中表達及其臨床意義

彭偉 陳津 崔兆磊 蘇光建 肖振洲 陳燕

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，而轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因。了解乳腺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)機制對于預(yù)防和治療乳腺癌轉(zhuǎn)移具有重要作用。新近研究發(fā)現(xiàn)糖尿病在腸癌、肝癌、前列腺癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[1-2]，AGEs高表達于糖尿病患者體內(nèi)，但有關(guān)AGEs與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的研究甚少。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測乳腺癌患者治療前血清AGEs的表達，分析其與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系，探討其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機制及其在腫瘤治療方面的臨床意義。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2016年7—11月在福建省腫瘤醫(yī)院新入院且接受正規(guī)治療的160例乳腺癌患者，同時選擇已確診的纖維腺瘤、腺病伴導(dǎo)管擴張等乳腺良性疾病患者（30例）和健康人群（30例）。入組條件：（1） 首次發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者； （2） 細胞學或病理學診斷的浸潤性乳腺癌患者； （3） KPS評分≥60分；（4）未合并其它腫瘤。排除標準：合并糖尿病病史、糖耐量受損及空腹受損的患者。按照以上標準，收集患者的姓名、性別、年齡、原發(fā)腫瘤大小狀態(tài)、區(qū)域淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)[1988年美國癌癥研究委員會（AJCC）和國際抗癌聯(lián)盟（UICC）聯(lián)合制定的乳腺癌分期標準]、組織病理類型、治療前血清標志物水平等臨床資料。

1.2 研究方法

血清AGEs水平檢測：所有患者入院空腹靜脈采血3～4 ml，靜置30 min，3 000 r/min離心5分鐘，分離血清，-80℃冰箱保存待測；采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司試劑盒，酶聯(lián)免疫吸附法檢測AGEs。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌患者血清AGEs水平

160例新入院的乳腺癌患者包括浸潤性導(dǎo)管癌（invasive ductal carcinoma，IDC）156例和浸潤性小葉癌（invasive lobular carcinoma，ILC）4例，平均年齡為 （51.01±10.58）歲；30例乳腺良性疾病患者和30例健康對照人群平均年齡分別為（48.32±12.66）歲和（50.46±11.45）歲，與乳腺癌組均差異無統(tǒng)計學意義；三組每例患者均進行血清AGEs檢測，乳腺癌組平均表達水平分別為（124.84±74.86）μg/ml，明顯高于乳腺良性疾病組[（102.11±42.83）μg/ml，P=0.039）]及健康對照組[（97.85±37.87）μg/ml，P=0.020）]，差異具有統(tǒng)計學意義。

2.2 血清AGEs水平與各臨床病理特征的關(guān)系

根據(jù)不同病理特征分組分析發(fā)現(xiàn)：不同的患者年齡、病理類型間AGEs表達水平?jīng)]有明顯差異；AGEs表達水平與原始腫瘤大小（T）、雌激素受體（estrogen receptors，ER）、孕激素受體（progesterone receptors，PR）及原癌基因人類表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，Her-2）的表達水平?jīng)]有明顯關(guān)聯(lián)。在平衡年齡因素后發(fā)現(xiàn)，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況（N）2-3級患者（137.72±86.65）μg/ml AGEs表達水平明顯高于N0-1級患者（117.51±66.76）μg/ml，差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.025）；臨床分期Ⅲ～Ⅳ期患者（136.56±85.27）μg/ml AGEs表達水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者（117.81±67.49）μg/ml，差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.045）。見表1。

3 討論

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，而轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因。新近研究發(fā)現(xiàn)糖尿病在腸癌、肝癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[1-2]，AGEs高表達于糖尿病患者體內(nèi)，但有關(guān)其與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的研究甚少。本研究檢測乳腺癌患者治療前血清AGEs表達水平，發(fā)現(xiàn)血清AGEs的表達與區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、臨床分期相關(guān)，提示AGEs在乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中起作用。

AGEs是還原糖如葡萄糖的羰基與蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子通過非酶糖基化作用形成可逆產(chǎn)物Schiff堿和Amadori產(chǎn)物，后者再經(jīng)過一系列分子重排形成不可逆的聚合物，所產(chǎn)生的系列聚合物。已有研究發(fā)現(xiàn)AGEs在糖尿病及其并發(fā)癥、腎臟疾病等慢性疾病及衰老的病理機制中有重要的作用[3]。近年，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)糖尿病在腸癌、肝癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[1-2]。DE等發(fā)現(xiàn)合并糖尿病的乳腺癌患者區(qū)域治療失敗時間（DFS）和總生存時間（OS）明顯短于未合并糖尿病的患者[4]；Hou等發(fā)現(xiàn)糖尿病是乳腺癌預(yù)后差的獨立危險因子[5]，表明糖尿病參與了乳腺癌的病情進展。

AGEs高表達于糖尿病患者體內(nèi)，而糖尿病在乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中起作用，但有關(guān)AGEs在乳腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移中作用的研究鮮有報道。有研究[6]發(fā)現(xiàn)：AGEs促進乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖，并通過上調(diào)表達基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-9，使乳腺癌細胞侵襲和遷移能力增強；同時，Stratigoula等[7]的研究發(fā)現(xiàn)AGEs高表達于腸癌組織中，并且與腫瘤的病理分級相關(guān)，本研究結(jié)果顯示：在平衡年齡等因素后，160例新入院的乳腺癌患者平均表達水平分別為（124.84±74.86）μg/ml，明顯高于乳腺良性疾病組（102.11±42.83）μg/ml及健康對照組（97.85±37.87）μg/ml；進一步分析發(fā)現(xiàn)血清AGEs水平與患者區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期密切相關(guān)，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況（N）2-3級患者（137.72±86.65）μg/ml AGEs表達水平明顯高于N0-1級患者（117.51±66.76）μg/ml，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；臨床分期Ⅲ-Ⅳ期患者（136.56±85.27μg/ml）表達水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者（117.81±67.49）μg/ml，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與Stratigoula等的研究結(jié)果一致。

表1 血清AGEs水平與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示AGEs在乳腺癌患者體內(nèi)表達增高，同時與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分級、臨床分期密切相關(guān)。AGEs在乳腺癌轉(zhuǎn)移中起作用的機制可能與其受體晚期糖化終末產(chǎn)物受體（RAGE，receptor of advanced glycation endproducts）有關(guān)。RAGE是細胞表面表達的免疫球蛋白超家族成員之一，表達于多種腫瘤細胞表面，通過與多種配體結(jié)合，參與腫瘤的分裂增殖、浸潤、轉(zhuǎn)移等多種生物學效應(yīng)[8-9]。Fuentes等[10]發(fā)現(xiàn)S100P/RAGE通過ERK磷酸化和NF-κB活化促進腸癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移；Chen等發(fā)現(xiàn)[11]HMGB1/RAGE通過ERK/c-Myc 通路下調(diào)P21表達，使肝癌細胞表達基質(zhì)金屬蛋白酶MMM-2增多，參與肝癌進展。

總之，AGEs在乳腺癌患者體內(nèi)表達增高，同時與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分級、臨床分期密切相關(guān)，可能在乳腺癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移中起作用，有可能成為乳腺癌治療的新靶點。同時，AGEs高表達于糖尿病患者體內(nèi)，對于治療合并糖尿病的乳腺癌患者具有一定的臨床指導(dǎo)意義。在以后的研究中，我們將進一步深入研究AGEs參與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的機制，以期為乳腺癌的臨床診斷、預(yù)后評估及治療等奠定實驗及理論基礎(chǔ)。

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