尿多酸肽注射液中大孔樹脂用量與上樣量的研究

王 剛

（泰凌生物制藥江蘇有限公司，江蘇泰州225300）

0 引言

尿多酸肽注射液常與化療聯合應用，可用于晚期乳腺癌、非小細胞肺癌的輔助治療，近年還用于骨髓增生異常綜合征的治療。在尿多酸肽注射液合成過程中，使用了大孔樹脂吸附工藝，樹脂吸附后的藥液中含有多種活性成分。

經研究，其主要成分為有機酸（馬尿酸、苯乙酰谷氨酰胺）和多肽。通過查閱相關參考文獻[1-2]，我們分別采用靜態吸附和動態吸附兩種方式對樹脂吸附的上樣量進行了考察，檢測靜態吸附后的藥液及動態吸附后的流穿液中的多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。根據檢測結果來確定樹脂吸附達到飽和的量，并得出可上柱藥液量與樹脂用量的比值。

1 靜態吸附實驗

分別取100 mL處理好的大孔樹脂，放入燒杯中，分別加入0160403批次的超濾液900 mL、1 200 mL、1 500 mL、2 000 mL，攪拌25 min后，取適量吸附后溶液，分別測定其中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。

2 動態吸附實驗

模擬尿多酸肽注射液生產工藝進行小試試驗，取120 mL處理好的大孔樹脂裝柱（徑高比為1:2），使液面高出樹脂5 cm左右，取0160501-01、0160501-02、0160501-03批次的超濾液各約2.5 L，以60 mL/min的流速上樣于已裝好的大孔樹脂柱中，控制流穿液的流速為60 mL/min，流穿液用接收器接收，每200 mL收集一次，分別測定其中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。

3 流穿液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的測定

按照已經批準的方法測定流穿液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量。靜態吸附后溶液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的測定結果如表1所示。動態吸附后各流穿液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的測定結果如表2～表6所示。

動態吸附實驗中三批超濾液的各流穿液中多肽以及馬尿酸的泄漏曲線分別如圖1、圖2所示。

表1 靜態吸附結果

表2 不同比例上樣量與樹脂用量下流穿液中多肽的測定結果

表3 不同比例上樣量與樹脂用量下樹脂吸附多肽的結果

表4 不同比例上樣量與樹脂用量下流穿液中馬尿酸的測定結果

表5 不同比例上樣量與樹脂用量下樹脂吸附馬尿酸的結果

表6 不同比例上樣量與樹脂用量下流穿液中苯乙酰谷氨酰胺的測定結果

圖1 三批超濾液的各流穿液中多肽的泄漏曲線

圖2 三批超濾液的各流穿液中馬尿酸的泄漏曲線

4 結語

靜態吸附實驗結果顯示：隨著上樣量增加，樹脂吸附量增加，當上樣量與樹脂用量體積比為15:1時馬尿酸吸附飽和，體積比增至20:1時吸附量不再增加；多肽與苯乙酰谷氨酰胺在上樣量與樹脂用量體積比為20:1時均未達到飽和。

動態吸附實驗結果顯示：大孔樹脂對各組分的吸附作用有強有弱。隨著上樣量的增加，多肽組分也逐步增加，即在大孔樹脂柱中容易泄漏，上樣過程中會流失。多肽的泄漏曲線顯示，隨著上樣量的增加，多肽的泄漏趨勢趨于平緩，即上樣量與泄漏量處于相對平衡的狀態。多肽組分的含量測定不適合作為樹脂與上柱藥液量的計算依據及樹脂飽和終點的判定。

馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺不容易泄漏，大孔樹脂在一定程度上對馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺起到富集的作用。苯乙酰谷氨酰胺含量較小，不適合作為樹脂與上柱藥液量的計算依據。考慮到馬尿酸作為本品的主要活性成分，在質控上有一定的意義，因此選擇馬尿酸泄漏點作為樹脂吸附終點的判定依據，可避免主要有效成分的流失，通過合理計算上樣量，可有效控制工藝的穩定性。

因此，采用HPLC法檢測馬尿酸是否泄漏，可作為判定大孔樹脂吸附飽和終點的依據。根據三批超濾液動態吸附結果顯示，馬尿酸在上樣量與樹脂用量的體積比值為11.7～13.3時開始泄漏，得到馬尿酸的最佳上樣量與樹脂用量比為11:1。

[1]陳建真，季憶，陳彬.槐花散總黃酮大孔樹脂分離純化的工藝研究[J].中華中醫藥雜志，2015，30（7）：2607-2609.

[2]韓偉，劉曦.枇杷葉三萜酸的大孔樹脂分離純化工藝[J].南京工業大學學報（自然科學版），2014，36（6）：66-71.