家禽胚蛋注射技術的應用研究(綜述)——維生素篇

賈良梁 夏俊花

摘? 要：在種蛋孵化時，給胚胎注射維生素會影響家禽的孵化率、骨骼生長、免疫機能和抗氧化機能。

關鍵詞：胚蛋注射技術;維生素;雛雞

中圖分類號：S815 文獻標志碼：C 文章編號：1001-0769（2020）03-0004-03

多個實驗室探討了維生素C、維生素E、維生素D3和葉酸對改善家禽入孵種蛋胚胎的健康狀況和發育的潛在功效。El-Senousey等以中國的黃羽肉雞為試驗動物，研究了維生素C（L-抗壞血酸）對其抗氧化系統和免疫基因表達水平的影響。他們在黃羽肉雞種蛋孵化第18天時將0.2 mL含有3 mg抗壞血酸的0.9%生理鹽水溶液手工注入每枚種蛋的氣室內。結果發現，所孵出雛雞1日齡時的總抗氧化能力、血漿谷胱甘肽過氧化物酶水平以及谷胱甘肽過氧化物酶和脾臟中過氧化物歧化酶mRNA的表達水平均得到了提高，但是血清丙二醛水平、mRNA白細胞介素-1β、白細胞介素-6和脾臟中的腫瘤壞死因子-α1表達水平均下降。這些聯合效應表明，在孵化第18天給種蛋胚胎注射3 mg抗壞血酸可以提高所孵出雛雞的抗氧化能力和免疫力。Zhang等在羅斯708肉雞種蛋孵化第17天用手工方式給胚胎注射0.5 mg、1.5 mg、4.5 mg或13.5 mg的L-抗壞血酸。將不同劑量的抗壞血酸溶于100 μL的0.85%無菌生理鹽水中，并用配置長度為2.53 cm的22-G針頭的注射器注入羊膜內。結果發現，雖然胚胎注射L-抗壞血酸未影響種蛋的孵化率，但與未注射L-抗壞血酸的對照組種蛋相比，入孵種蛋胚胎注射4種劑量抗壞血酸中的任一種后，所孵出的雛雞會有一個更長的出殼時間。隨后，El-Senousey等讓每一個處理組的一半雛雞等待48 h后入舍，研究雛雞體重和卵黃吸收受影響情況。結果發現，所有由注射維生素C的種蛋孵出的雛雞沒有因為推遲入舍而使體重和卵黃吸收率受到不利影響。

Fatemi等在隨后的一篇論文中進一步報道了給入孵種蛋胚胎注射L-抗壞血酸對所孵出肉雛雞的早期生長速度和血漿抗氧化能力的影響。他們用商用多蛋注射系統對入孵的肉雞種蛋胚胎注射? ?3 mg、6 mg、12 mg或36 mg的抗壞血酸。結果發現，與Zhang等完成的前一項研究結果相似，在孵化第17天給羅斯708肉雞種蛋的胚胎注射100 μL添加抗壞血酸的0.85%無菌生理鹽水溶液，當抗壞血酸的注射濃度為3 mg時，所孵出雛雞7日齡時的體重以及0～7日齡的平均日增重均高于不注射的對照組種蛋所孵出雛雞的，7～14日齡的平均日增重大于注射生理鹽水溶液的對照組種蛋所孵出雛雞的。此外，當抗壞血酸的注射劑量為3 mg或6 mg時，所孵出雛雞出殼時和7日齡時的血漿丙二醛濃度下降，而 7日齡時血漿總過氧化物歧化酶水平得到了提高。因此，給入孵種蛋的胚胎注射3 mg或6 mg的抗壞血酸具有加快所孵出肉雛雞早期生長速度以及提高它們全身抗氧化能力的潛力。

Gore和Qureshi探討了利用胚蛋注射技術給火雞和肉雞的入孵種蛋胚胎注射維生素E作為提高家禽體液免疫力及細胞免疫力手段的潛力。在進行胚蛋注射時，他們以維生素E的一種商用水溶性溶液d-α生育酚聚乙二醇-1000琥珀酸酯（d-α tocopherol polyethylene glycol-1000 succinate）為試驗制劑，用配置長度為2.54 cm的20-G針頭的結核菌素注射器手工將維生素溶液（溶解于無菌蒸餾水的維生素E）注入孵化第25天（從孵化機轉入出雛機的當日）的火雞種蛋胚胎和孵化第18天（從孵化機轉入出雛機的當日）的肉雞種蛋胚胎的羊膜腔中。火雞入孵種蛋胚胎的注射量為100 μL、200 μL和300 μL，維生素E的含量分別為10 IU、20 IU和30 IU;肉雞入孵種蛋胚胎的注射量為300 μL含10 IU維生素E的溶液。火雞和肉雞的試驗均以注射300 μL生理鹽水的入孵種蛋作為假注射對照組。

所孵出雛雞7日齡時接種綿羊紅細胞，抗體反應表明向入孵種蛋胚胎羊膜腔內注射維生素E可以提高所孵出雛火雞和肉雛雞的體液免疫力和細胞免疫力。然而，當維生素E的注射水平為20 IU或30 IU時，火雞的入孵種蛋孵化率急劇降低，但10 IU的注射劑量不會顯著影響種蛋的孵化率。不過，維生素E的三種注射劑量均未影響所孵出雛火雞0～35日齡的增重以及35日齡時法氏囊和脾臟的相對重量。與此相似，給肉雞的入孵種蛋胚胎注射10 IU的維生素E后，所孵出雛雞0～35日齡的增重以及35日齡時法氏囊和脾臟的相對重量均未受到顯著影響。總之，雖然該研究未能說明給入孵種蛋胚胎注射維生素E對所孵出雛禽35日齡時生產性能的影響情況，但是，雛禽出殼后的免疫力可以很快得到增強。

Bello等在一系列研究中探討了向入孵種蛋注射100 μL含不同濃度純晶體25-羥膽骨化醇[25-hydroxycholecalciferol，25-（OH）D3]的商用稀釋液的效果。他們在孵化第18天用商用多蛋自動注射系統將商用稀釋液注入羅斯708肉雞的入孵種蛋胚胎羊膜腔內。Bello等首先指出，入孵種蛋胚胎注射0.30 μg～1.20 μg的25-（OH）D3可以提高孵化第19天胚胎血清中25-（OH）D3的濃度，還可以用于消除注射商用稀釋液對所注射種蛋孵化率的不利影響。Bello等隨后指出，給入孵種蛋胚胎注射0.15 μg～1.20 μg的25-（OH）D3不會影響所孵出的不同性別肉雛雞出殼當日和21日齡時骨骼的發育或礦化;這些注射劑量不會影響所孵出雛雞隨后的存活率和生產性能。然而，由注射0.20 μg、0.60 μg或1.80 μg 25-（OH）D3的入孵種蛋胚胎所孵出的公雛雞28日齡時的骨骼抗斷裂強度大于注射稀釋液的對照組種蛋所孵出公雛雞的。Bello等還發現，入孵種蛋胚胎注射? 0.60 μg 25-（OH）D3可以消除因胚胎性別不同導致的卵黃鈣含量的差異，該指標可能會影響與性別相關的卵黃鈣的吸收率，并且其可能與早先在雛雞骨骼強度上發現的性別相關的差異有關。

Yair等探討了將維生素D3 （劑量為240 IU）與磷酸鹽和有機微量元素（鋅、錳和銅）同時注入入孵種蛋胚胎后對所孵出雛雞和成年肉雞骨骼性能的影響。在孵化第17天，他們向科寶500肉雞的入孵種蛋胚胎羊膜腔中手工注入0.6 mL的溶液。結果表明，無論是否與維生素D3一起注射，給入孵種蛋胚胎補充礦物質均可以提高所孵出雛雞對卵黃中微量元素的吸收量;另外，給入孵種蛋胚胎同時注射有機微量元素和維生素D3不會延長落盤時間，但是會提高成年肉雞骨骼中的灰分含量以及骨質和整體骨架的強度。這些結果表明，給入孵種蛋的胚胎注射含有維生素D3和微量元素的溶液可以提高所孵出肉雞的骨骼強度。

Nouri等用配置22-G針頭的注射器手工將40 μL含80 μg或120 μg葉酸的滅菌水注入孵化第18天的羅斯308肉雞種蛋的蛋白中。雖然種蛋的孵化率沒有受到影響，但注射葉酸提高了所孵出雛雞42日齡時血液中葡萄糖、葉酸和血磷的水平，同時降低了血液中膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白以及鈣和堿性磷酸酶的水平。注射葉酸同時改善了所孵出雛雞的增重和飼料轉化率。這些研究人員總結道，葉酸會對肉雞產生全面的積極影響。此外，Liu等（2016）在孵化第11天向科寶肉雞種蛋胚胎的卵黃囊中手工注入0.1 mL含 50 μg、100 μg或150 μg葉酸的溶液。結果發現，向入孵種蛋胚胎的卵黃囊中注射150 μg葉酸可以上調胚胎中胰島素樣生長因子-2的表達，因此能夠促進種蛋胚胎的生長和組織發育。這些研究的結果表明，給入孵的肉雞種蛋胚胎注射葉酸可以促進胚胎以及所孵出雛雞的生長。

原題名：In ovo applications in poultry： a review（英文）

原作者：E. D. Peebles （美國密西西比州立大學）