大花蕙蘭的組培繁育和栽培技術研究

葛坤紅?李芹

摘 要： 大花蕙蘭是一種具有很高觀賞價值的蘭科植物，深受廣大消費者的歡迎。傳統繁殖方式一般采用分株繁殖，繁殖系數較低，繁殖出的品種質量品質不高。本文主要介紹大花蕙蘭的組培快繁和栽培技術兩方面內容的研究情況。

關鍵詞： 大花蕙蘭;組織培養;栽培管理

大花蕙蘭俗稱“虎頭蘭”，為蘭科蘭屬植物，屬于復莖蘭類的附生蘭。原產于中國、印度、緬甸、泰國、越南。大花蕙蘭是中國傳統節日的主要禮品花卉之一，市場前景廣闊，無論是切花品種還是盆花，在國際市場上都占有重要地位。蘭花的傳統繁殖方式為分株繁殖，然而，一株健壯的蘭花一年只能繁殖幾個芽，繁殖系數較低，增殖倍數也只有1～3倍。我國許多珍稀品種不能大量繁殖，多數需從國外進口，遠遠不能滿足市場需求，價格長期居高不下，每個葉芽高達上萬元。不少品種在栽培條件下不能或很少結種子，如果通過有性繁殖，由于蘭花的種子小，胚發育不完全，沒有提供營養的胚乳和其它組織，不易發芽。要借助共生的菌類提供營養才能發芽。許多名貴品種實際上是一些自然突變體，如果借助有性生殖過程產生種子，再由種子繁殖后代，那么，這個品種的絕大多數個體將失去原有品種的獨特的觀賞價值。另外，長期的無性繁殖，造成帶病毒的植株日益增多，使蘭花的品質嚴重下降。因此，通過組織培養技術快速繁殖蘭花無毒苗和通過現代栽培管理技術生產高品質產品具有十分重要的現實意義。

一、大花蕙蘭的組培繁育技術

大花蕙蘭傳統繁殖方式是分株繁殖，繁殖系數低，易引起退化，新品種少。通過組織培養繁殖，可大大提高繁殖率，且生產的同一批苗易控制花期，能較好地占有市場。

1.外植體的選擇與原球莖的誘導。大花蕙蘭原球莖誘導采用的外植體主要有莖尖、莖段、試管苗莖段、幼根、花梗等，切取試管苗莖段，用改良White、Vacinandwent培養基附加0.4BA+蔗糖20g/L。將培養物置于搖床上，進行液體振蕩培養，光照每天12小時，光照強度2000lx，培養溫度25℃±3℃。2周左右外植體膨大，6周左右形成綠色原球莖。取新芽8.0～10.0cm ，切取莖尖0.2～0.5cm。利用5cm以內的葉基進行誘導試驗，發現只有在距葉基部0.5～1.0cm處才能誘導出原球莖;利用新出芽的2.0～3.0cm長的幼根，將其切成0.5～0.8cm 的根段，接種后2周左右切口開始膨大，3周以后形成淡綠色原球莖;而利用開花期的花梗進行培養，出愈率達61%，并由愈傷組織誘導出原球莖，誘導率為20%，由于花瓣和葉片在培養過程中褐化嚴重，均未能誘導出原球莖。由此可見，外植體的最佳選擇是新芽和試管苗莖段。

2.原球莖的增殖。在原球莖分化出莖葉之前，將原球莖取出切成小塊轉移到增殖培養基上。增殖用培養基一般與誘導培養基成份相同，也可用液體振蕩培養。將已出現葉原基或長出幼葉的原球莖轉移到含有10%香蕉勻漿汁的Knud-sonc固體培養基，幼葉生長迅速，并向下長出根，3個月左后形成10～20cm的完整植株。培養時可根據不同培養物種類，對所有激素及附加物進行調整。加入精氨酸，天門冬氨酸，酵母提取物對原球莖和植株的生長均有促進作用。NAA低于0.1時促進芽的形成，含量約0.6促進根的生長。

將誘導出的大花蕙蘭原球莖為培養原材料，在無菌條件下，選取呈嫩綠色、大小基本一致、生命力處于旺盛時期的原球莖，切割后接種到增殖培養基上。15d左右開始長出綠色的原球莖，一般25 d左右，原球莖增殖系數基本穩定。用不同濃度的香蕉汁、6-BA、NAA3種不同的添加物對原球莖的增殖效果進行了對比實驗。實驗結果表明，3種添加的物增殖效果各有不同。其中，增殖效果最好的是香蕉汁lO%+NAA0.5mg/L，增殖系數達到了4.8;其次為NAA0.5mg/L，增殖系數為4.4，再次為香蕉汁lO%+6-BA0.5mg/L，增殖系數為3.5。總的來說，在NAA濃度為0.5 mg/L的情況下，大花蕙蘭的增殖效果均比較好。6-BA對大花蕙蘭的原球莖增殖效果不如NAA。

3.原球莖繼代過程褐化的防治。縮短繼代周期，在誘導7天時做繼代培養，可有效克服原球莖誘導過程中的褐化現象，或在初始培養過程中進行短時間的暗培養可顯著抑制褐變發生。在原球莖或叢生芽的繼代增殖過程中，在培養基中加人0.5～1.0g/L的活性炭，可抑制培養物產生紅色的多酚氧化物，從而提高繁殖速度。另外，采用降低瓊脂用量制成半固體培養基，將培養塊浸在培養基內，可降低培養塊黃枯和切口褐化的機會。

4.生根壯苗。生根階段之前，降低培養基中的激素含量，以便形成健壯芽。在生根壯苗培養基中，NAA用量以0.2～1.0mg/L為最佳，幼苗健壯，葉色深綠，根粗且長、根毛多。在培養基中添加香蕉泥、肌醇和水解酪蛋白能夠提高生根率。生根培養基中減少大量元素用量、添加適量的蔗糖、活性炭能夠促進生根。研究表明，光照強度大小也是影響大花蕙蘭瓶苗培養中健壯苗生產量和移栽苗成活率的關鍵因素之一。強光照下（2500Lx）的瓶苗根系發達，植株健壯，移栽成活率高，而弱光照下（500Lx）的瓶苗較弱且不分葉片。

二、培養基質及組培苗處理

1.培養基質準備。大花蕙蘭屬氣生性蘭類，對植料的通氣性要求很高，并要求有一定的保水能力。培養基質應以疏松透氣的材料為主，如樹皮塊、木炭、碎磚塊、苔鮮等。Kim Dong Won et al.（1997）研究認為混合基質與單一基質相比更有利于大花蕙蘭‘MoonVenus幼苗的生長。苔蘚是最適合大花蕙蘭生長的基質，樹皮、磚塊、苔鮮（3：1：1）和樹皮、煤渣、苔醉（3：1：l）次之。有研究認為在天水地區大花蕙蘭栽培用朽木屑作基質較為理想，栽培的大花蕙蘭生長最為健壯。也有研究表明，以樹皮+碎木炭作為大花蕙蘭的栽培植料比較理想，只是應根據花苗的大小確定樹皮、木炭的粗細;其次為樹皮+碎磚，再次為松樹皮;鋸木屑最差。

為此，用不同培養基進行對原球莖的誘導進行了實驗。將新芽接種于MS、1/2MS及Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L三種不同配方的基礎培養基上。lOd左右，新芽開始膨大，20d左右可觀察到新芽周圍有大小不一的黃白色顆粒狀組織，30d左右轉為綠色原球莖，培養三種培養基均能誘導大花蕙蘭原球莖的產生，誘導期分別為32d、35d和28d，誘導率分別為55%、40%、79%。由此可知，采用Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L，誘導原球莖所需時間最短且誘導率最高，故大花蕙蘭原球莖誘導的最適培養基為Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L。

2.組培苗處理。當試管苗生長至15cm左右高，2～3條根時即可移植。將生根的瓶苗放置在蘭棚1周左右。出瓶前， 先將瓶蓋完全打開， 使瓶苗在自然環境中適應3～5d， 再從瓶中移出幼苗， 放在清水中沖洗幼苗根上的培養基， 并用短毛筆輕輕地把附在根上的培養基清洗干凈， 然后用托布津1000～1500倍液浸泡30秒;最后，按大小規格分極，置于鋪有報紙的花架上晾干，以備種植。根據經驗，煉苗 2d 后即可將苗取出，用清水洗凈根部的瓊脂，植于溫室苗床內、栽培基質為松針+苔蘚+粗砂，苗床底部墊以碎石、碎磚塊，用稀薄的營養液噴霧，每隔1周噴1次800倍的多菌靈溶液，溫度保持在lO～25℃，在大棚里亦可生長良好，1個月后統計移栽成活宰可達98%以上，1年后上盆，栽培基質用泥炭土+蕨根+樹皮，每周澆1次液肥。

三、環境控制

1.溫度。研究表明，適合大花蕙蘭生長的溫度為15～25℃，但大花蕙蘭對溫度的適應性很強，溫度在5～30℃均能維持生命。另有報道，生長期日溫最適溫度為22℃～28℃，夜溫最適溫度為18℃～22℃，生長適溫15℃～25℃。花芽分化期日溫最適溫度為18℃～22℃;夜溫最適溫度為12℃～18℃，不能高于18℃，也不能低于12℃，否則花芽分化不良。花期日溫20℃～25℃，夜溫15℃～20℃。

2.水分。大花蕙蘭性喜溫暖、濕潤的氣候條件。在整個生長期空氣濕度應保持在80﹪～90﹪。開花期則應控在80﹪～90﹪。但高溫高濕條件，大花蕙蘭易患病害，因此應注意通風換氣。大花蕙蘭的根系肉質，基質水分過多，會造成爛根爛葉，易滋長病蟲害;但大花蕙蘭又原產于熱帶亞熱帶地區，性習溫暖高濕環境，空氣濕度不夠，基質水分不足，影響新芽生長和開花。大花蕙蘭澆水應依據植株的年齡、生長勢、栽培基質不同而不同。

3.光照強度。光照對大花蕙蘭生長發育及成花有一定的作用。據報道，大花蕙蘭是比較喜陽光的一種，夏季可遮光50～60%，春秋應遮去30%的陽光，冬季需日光充足。假鱗莖遮光處理可以促進新生側芽的發育，一般處理4～5個月時效果比較明顯。在幼苗期，光照強度應控制在15000～30000lx;到了中苗期以后，光照強度應控制在40000～50000lx。然而，光照強度也應隨溫度和水分條件的變化作適當調節。當溫度太高，強烈的光照會使植株呈休眠狀態，停止生長，甚至造成灼傷;溫度太低時，光照不足也會使植株呈休眠狀態，停止生長。當光照強時，水分蒸發迅速，光合作用旺盛故必須充分供水;光照弱時，光合作用進行緩慢，所需消耗水分較少，給水過多反而影響根系發生。

四、栽培管理技術

1.灌水。生長期：處于旺盛生長時期，需水量多，需要充足的水分，特別是光合作用旺盛時，不能缺乏水分。每天都得及時灌水。冬季植株生長慢，需求少，2～3天灌水1次即可。

開花期：灌水以保持適量水分為宜。水分過多導致新陳代謝加速，反而縮短花期;水分過少，則無法滿足開花消耗的養分及水分，花朵會過早萎蔫。灌水時注意水溫應與土溫相近，否則容易傷根。總之，灌水應掌握見干見濕。

2.施肥。大花蕙蘭生長旺盛期較其它洋蘭喜肥。使用的無機肥以復合肥為主，濃度為，0.1%～0.2%，每周1次。有機肥以發酵過的餅肥與骨粉或過磷酸鈣制成直徑約2cm的丸狀，置于盆面，隨水分的滲透慢慢釋放肥力，每丸有效時間約為30d，全年施6～8次。

幼苗期一般以根外追肥為主，應薄肥勤施，每7d1次，N：P：K按1：1：1稀釋1000倍液噴施;中苗期和大苗期按N：P：K按1：2：3，花期按N：P：K按1：4：2稀釋1000倍液噴施。7d1～2次，冬季停施。在生長旺季追施腐熟的餅肥，稀釋至0.02%使用。

除了基本的N、P、K三要素外，微量元素對大花蕙蘭的生長也非常重要。應適量補充一些微量元素。

3.通風。大花蕙蘭習性介于地生蘭和附生蘭之間，性喜通風良好的環境。通風不良將造成二氧化碳的不足，影響光合作用，且易引起病菌滋長，通風量須達到植株葉梢晃動為宜。

4.疏芽。大花蕙蘭從中苗期開始，需進行適當疏芽。其新假球莖每年可繁殖2次，為充實分生假鱗莖，生長中途分生假球莖發生的芽，必須全部除去。1個球莖若同時長出兩個或更多芽，可留下茁壯芽1個，將其余的摘去。若1個球莖同時長出花芽（先端飽滿）和葉芽（先端瘦長），應將葉芽摘除，否則影響花芽生長。

五、病蟲害防治

1.莖腐病。該病每年發生在6～10份， 是因為棚內溫度過高、澆水過多、通風不良引起發病， 一經發現就會無藥可救， 應把發生病害的植株清理出棚燒毀， 并用可殺得、鏈霉素或土霉素1000～1500倍液噴施植株， 3天1次連續3次。

2.軟腐病。軟腐病通常侵害大花蕙蘭的葉片、芽、球莖。一年中從春季到秋季都可能發生， 冬天較少發現， 主要也是高溫高濕引起的， 平時要注意通風透氣，一旦發病只好拋棄病株， 清理出棚并燒毀。可用68.8%多保鏈霉素或18.8%鏈霉素1000倍液防治， 每隔7～10天噴灑1次， 連續3～4次。

3.根腐病。根腐病是大花蕙蘭毀滅性病害之一。在大花蕙蘭植株的任何生育期， 不論是聚苗盆中的幼苗、中苗、大苗以及老熟的開花株都容易感染。發現病株時要及時隔離并進行燒毀， 可用代森鋅或甲基托布津稀釋1000倍液充分噴灑植株， 每5天1次， 連續3次。

4.介殼蟲類。一般多在高溫高濕、通風不良、日光不足的情況下比較容易發生。可用40%氧化樂果或速滅松乳劑1000倍液噴殺， 每隔7～10天噴灑1次， 噴灑時葉片及鱗莖都要噴到， 連續噴灑3次。少量時可用小刷子蘸肥皂水擦除。

5.螨蟲類。也主要是由高溫高濕、光照不足、通風不良引起的。可用5%的馬拉硫磷800倍液或用速滅松乳劑1000倍液噴殺， 每隔7天噴1次， 連續3次。

六、結語

研究結果表明，大花蕙蘭組織繁育外植體的最佳選擇為新芽和試管苗莖段;原球莖增殖效果最好的基質激素為香蕉汁lO%+NAA0.5mg/L，增殖系數達到了4.8;原球莖誘導的最適培養基為Ms+6-Bal.0mg/L+NAA0.5mg/L;組培苗栽培基質用泥炭土+蕨根+樹皮并輔以液肥效果較佳。通過以上繁育技術，可以實現大花蕙蘭的快速繁殖。另外，通過后期的栽培管理技術，為廣大的花卉愛好者生產出了高品質的大花蕙蘭。在未來時期，科技的不斷進步，社會的不斷發展，大花蕙蘭組培快繁及栽培管理技術將更加的完善，設備更加的齊全，定會有更為廣闊的發展空間，這項技術定將會給我們帶來不可估量的價值。

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