不同治法方藥促中樞神經修復與再生的實驗研究進展

馬丙祥，張 晰

(河南中醫藥大學第一附屬醫院，河南 鄭州 450000)

近年來，新的觀點認為成熟的中樞神經系統(central nervous system, CNS)受到損傷后可以再生，這一理論已逐漸被人們接受，這為CNS損傷修復及功能重建帶來了希望。因此，學者們不斷尋求促進CNS再生的有效方法，但由于神經發生過程中受生理、病理、藥理刺激等多種因素共同作用的影響[1]，即使可一定程度上促進神經結構的再生，但功能恢復卻是又一難題。祖國醫學治療神經損傷相關疾病方面臨床療效顯著，具有獨特的優勢。依據整體觀念，辨證論治的中醫學特點，大量實驗研究證實不同治法方藥均可促進CNS損傷后神經的再生與修復。因此，探討總結中醫不同治法方藥促中樞神經修復與再生的實驗研究現狀具有重要意義。本文整理近年來相關文獻報道做一綜述，以期能夠對更深層次的實驗研究與臨床治療提供啟發。

1 中醫藥促神經修復與再生的研究方向

1992年，Reynolds和Richards的新發現[2]顛覆了傳統的認為中樞神經發育成熟后不能再生的觀點，為CNS損傷相關疾病的治療提供了新方向。研究表明，CNS再生主要受兩方面因素的影響：①受損神經元自身的再生能力有限；②受損神經所處的微環境不適合神經元生長，其中神經生長抑制因子的作用最為強烈。研究表明，中醫藥不但可以提高神經元自身抵抗損傷的能力，還可以促進神經干細胞增殖并誘導其定向分化為功能性神經元，改善其微環境，達到治療神經功能缺損疾病的目的[3]。目前的實驗研究多集中在這兩個方向，故中醫藥促中樞神經再生的研究方向應從以下兩方面入手：一是提高受損神經再生能力；二是改善受損神經所處微環境，以減少神經生長抑制因子的表達、減輕炎癥反應等，以促進損傷神經功能的恢復[4]。

2 中醫藥促神經修復與再生的治則方法

中藥因其具有劑型豐富、方法多樣、多系統、多靶點等優勢,可為神經損傷的治療提供新的思路和方法。臨床應用時應體現中醫學整體觀念及辨證論治的特點，具體藥物及方法應因人而異。招遠祺等[4]認為應著重“醒神”的治則；胡懷強等[5]認為滋補肝腎是促進中樞神經再生的重要方法；卜菲菲等[6]強調了益氣活血法、化痰通絡法、補益肝腎法的重要作用；馬丙祥等[7-8]發現化痰活瘀法對急性缺氧缺血性腦病有明確療效；王義周等[9]還提到了調肝解郁方藥的有效性。所以在治療前，應依據患者病證特點，四診合參，選用不同治則方法。

3 不同治法方藥促神經再生的相關實驗研究

治則方法不同，選方、選藥不同，起到的臨床療效不同。但由于神經損傷過程機制復雜，干預其中某一環節或途徑的單一治療收效甚微，治療時應涉及多系統、多途徑、多靶點，以期能夠起到修復受損神經，促進神經結構重建與功能再生的療效。

3.1益氣活血法 目前活血化瘀類中藥在神經再生修復領域具有廣闊的研究前景。研究表明，丹參主要成分為丹參酮類及酚酸類物質,其中丹參酮可促進腦缺血大鼠SVZ區神經干細胞的增殖,并改善其學習能力[10]。丹參酮ⅡA通過PI3K/AKT信號途徑，可抑制細胞凋亡，保護神經細胞[11]，丹參乙酸鎂可增加腦缺血損傷后缺血半暗帶NGF、BDNF的表達[12]。三七有效成分三七總皂苷可提高MCAO模型大鼠腦組織PSD-95、Syp的表達,促進軸突的再生重塑，降低缺血后腦組織Nogo-A、NgR及RhoA的蛋白及mRNA表達；同時可降低模型大鼠術后血清IL-1β和TNF-α的含量；調節Nogo-A/RhoA通路，對細胞損傷具有保護作用[13]。當歸的提取物ADR可顯著降低SCI模型大鼠BV2細胞中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS和COX-2等的水平，降低BV2細胞活性氧水平，抑制小膠質細胞 p38絲裂原活化蛋白激酶的活化和pronerve生長因子的表達，抑制神經元和少突膠質細胞的細胞凋亡，促進損傷后的功能恢復[14]。川芎嗪具有抗腦缺血再灌注損傷的作用，是治療神經細胞缺血—再灌注損傷的有效藥物[15]。銀杏葉提取物能彌補海馬星形膠質細胞的數量減少[16]。夏天無可抑制腦梗死模型大鼠腦組織中炎癥因子hs-CRP的增加，促進神經營養因子BDNF的生成，改善梗死灶，起到腦神經細胞保護和再生作用[17]。

益氣類代表中藥黃芪的提取物黃芪總苷可上調MCAO模型大鼠腦組織BDNF及其受體Trk B mRNA的表達，下調NTFs受體p75NTR mRNA的表達，提高神經抗損傷的能力[18]。黃芪多糖具有改善腦損傷大鼠的神經功能作用，其機制可能與促進海馬NCAM和c-fos 表達，起到阻止或逆轉海馬神經元凋亡的作用有關[19]。人參皂甙Rg1可顯著促進神經細胞的增殖，上調表達和分泌GDNF、BDNF和NGF[20]，增加神經干細胞中神經球的數量，促進神經細胞的生存和增殖[21]。

補陽還五湯有益氣活血通絡之功，方中補氣藥和活血藥具有協同作用[22]，可改善局部神經生長微環境，促進NTFs類物質的表達，降低神經抑制因子的表達，減輕繼發性損傷，誘導NSC增殖、遷移及定向分化[23]。通竅活血湯可促進MCAO模型大鼠SDF-1 的高表達，誘導刺激相關內源性神經干細胞的增殖、分化，對于病灶部位的結構重建和功能恢復具有積極的意義[24]。

3.2滋補肝腎法 補腎生髓中藥地黃的有效成分梓醇和地黃多糖對腦缺血、神經衰老和腦損傷均有保護作用[25]。梓醇可增強模型大鼠梗死灶周圍大腦皮質區錐體神經元樹突可塑性，上調突觸素P38表達，促進神經缺失功能恢復[26]。生地黃免煎顆粒能夠下調缺血腦組織髓鞘抑制因子Nogo-A蛋白表達，促進中樞受損神經再生[27]。龜板治療神經退行性疾病具有潛在的臨床應用價值，其提取物具有抑制PC12細胞凋亡的作用,可能與上調BCL-X/L的表達有關[28]。山茱萸主要有效成分莫諾苷可抑制細胞凋亡，影響細胞生存信號，起到神經保護作用[29]。淫羊藿苷能夠明顯抑制胡須體覺皮質局灶性腦缺血大鼠梗死周邊區 PTEN 的表達，同時明顯上調 GAP-43 的表達[30]。淫羊藿苷抗AD作用是多方面共同調節的結果,可改善Tg2576 模式小鼠空間學習及記憶能力，可能與降低 APP 蛋白的高表達、減少Aβ沉積形成的老年斑，并通過增加內源性BDNF 而促進 Tg2576 模式小鼠海馬齒狀回神經再生有關[31]。左歸丸和右歸丸是補腎陰和補腎陽的代表方劑。二方均能夠抑制EAE大鼠凋亡蛋白Fas、Bax的表達，并不同程度上調節NogoA/NgR信號通路對于軸突再生的抑制作用[32]；上調CREB mRNA 和蛋白表達[33]，調節APP和GAP-43蛋白與基因的表達,且左歸丸的作用明顯優于右歸丸[34]。

3.3醒神開竅法 具有芳香開竅作用的麝香臨床應用廣泛。實驗表明，鼻腔給予麝香酮可降低創傷性腦損傷后腦含水量,減輕腦水腫,促進嗅鞘細胞分泌BDNF和NGF[35]。復方麝香注射液可升高全腦缺血再灌注損傷模型大鼠損傷不同階段NGF、BDNF水平，早期使用可使時限延長[36]。牛珀至寶丹可明顯促進老年記憶減退大鼠學習記憶能力,促進內源性NPCs的增殖,增加腦尾殼核及皮質區bFGF陽性神經元的數量[37-38]。

3.4化痰法 具有化痰、益智、醒神功效的石菖蒲可以用于防治衰老及疾病相關的神經退行及相關的再生性治療。β-細辛醚和丁香酚為石菖蒲的有效成分，二者可通過調控凋亡基因的表達，對多種神經損傷均具有保護功效[39]。石菖蒲可通過介導JNK信號通路和Bcl-2蛋白家族的表達，減少細胞色素C和凋亡蛋白Caspase-3的激活，抑制Aβ對PC12細胞產生的神經毒性[40]。且其不同藥效部位均能顯著改善Aβ1-42致AD模型小鼠的學習記憶能力,降低大腦和海馬內NOS活性,減少NOS陽性神經元數量,提示作用機制可能與降低大腦和海馬中的NOS活性有關[41]。遠志在臨床應用時常與石菖蒲配伍，研究證實，遠志能改善慢性應激抑郁大鼠的抑郁癥狀，提高海馬區BDNF和Trk B mRNA的基因轉錄，加強神經元營養，促進損傷神經元恢復[42]。蒲金口服液具有抗氧自由基，降低NOS含量的作用，驗證了化痰活瘀療法對急性缺氧缺血性腦損傷的治療有較好療效[8-9]。

3.5調肝解郁法 在高濃度CORT環境下，逍遙散能促進海馬神經前體細胞增殖,抑制由其分化形成的神經膠質細胞和神經元的凋亡,發揮抗海馬損傷的作用[43]。臨床常用于調肝的方藥加味四逆散對應激性海馬損傷具有明顯的保護效應，可提高海馬神經元的存活率[44]。另外，抑肝散[45]、越鞠丸[46]等均可在一定程度上起到神經保護作用。

3.6其他 此外，具有升陽發表功效的葛根[47]、清熱作用的黃芩素[48]，以及復方中的清熱化瘀方[49]等均被證實可在一定程度上促進神經再生。

4 總結與展望

中醫藥在促中樞神經修復與再生方面已經凸顯出不可替代的作用,傳統方藥具有多途徑、多系統、多靶點的作用機制，可在一定程度上改善神經損傷微環境，促進受損神經再生。單藥或其提取物有效成分療效明確，中藥復方具有諸藥協同特點,藥效更為廣泛，且目前的研究已取得一定進展,應用前景廣闊,有深入探索的必要。

目前的相關實驗研究主要存在以下幾點問題：①實驗選藥治療過程中未能充分考慮整體辨證施治的原則，多為實驗前期選擇單種方藥應用于整個治療過程中，一定程度上忽略了造模過程中不同個體體質與證型的差別。中醫辨證論治過程應體現在治療的整個過程中，臨床應用時更應充分考慮病因、臨床證候、個體體質等差異，相信可對神經修復發揮更為理想的促進作用。②從目前的實驗研究結果來看，不同治則方藥均可對中樞神經再生發揮作用，但是治則、功效各異的藥物作用機制是否相同，單一治則藥物應用與多種藥物合用或分期應用藥效是否存在差別尚少有研究，這為以后的相關實驗研究提供了思路，需進一步努力以探明其具體作用機制及藥效差別以更好地指導臨床治療。③觀察指標較單一。可能限于時間、經濟、模型等的因素，實驗多集中于觀察某一信號通路或單一因子的表達。神經損傷修復再生的過程機制相當復雜，且目前的機制研究尚未完全透徹，選擇觀察指標應更加廣泛，涉及不同的環節、通路等，實驗結果說服力會更加明顯。但可以肯定的是，挖掘中醫藥對CNS修復與再生方面的優勢和作用具有不可替代的價值意義。相信隨著現代技術的發展，在促神經修復與再生方面的實驗研究能取得突破性進展，中藥新藥可以得到更廣泛的開發與應用。

[參考文獻]

[1] Ratajczak J,Zuba-Surma E,Paczkowska E,et al. Stem cells for neural regeneration-a potential application of very small embryonic-like stem cells[J]. J Physiol Pharmacol,2011,62(1)：3-12

[2] Reynolds BA,Weiss S. Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system[J]. Science,1992,255(5052):1707-1710

[3] 莊朋偉,張艷軍. 中藥調控神經干細胞促進中樞神經系統神經再生與修復的研究進展[J]. 中國醫藥生物技術,2008,3(2):134-136

[4] 招遠祺,喬利軍,袁龍健,等. 從神經干細胞角度探索中醫藥介入中樞神經再生的研究策略[J]. 中國中醫基礎醫學雜志,2015,21(7):915-918

[5] 胡懷強,周永紅,王新陸. 試論滋補肝腎是促進中樞神經再生的重要方法[J]. 天津中醫藥,2009,26(4):296-298

[6] 卜菲菲,郜巒. 中醫藥療法促進中樞神經修復的實驗研究進展[J]. 中國中醫藥現代遠程教育,2015,13(4):153-154

[7] 馬丙祥,趙向,琚瑋,等. 蒲金口服液對缺氧缺血性腦損傷大鼠自由基的影響研究[J]. 河南中醫學院學報,2004,19(2):25-27

[8] 馬丙祥,趙向,琚瑋,等. 蒲金口服液對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠一氧化氮合酶的影響[J]. 中國臨床康復,2004,8(19):3826-3827

[9] 王義周,寇爽,劉妍,等. 中醫藥促進中樞神經再生的研究進展[J]. 中國實驗方劑學雜志，2010,16(12):197-201

[10] 陳巖,李志偉,楊謙. 丹參酮對大鼠腦缺血后神經干細胞增殖影響的研究[J]. 陜西醫學雜志,2011,40(7):774-775

[11] Dong HM,Mao SP,Wei JJ,et al. Tanshinone IIA protects PC12 cells from β-amyloid 25-35-induced apoptosis via PI3K/Akt signaling pathway[J]. Mol Biol Rep,2012,39(6):6495-6503

[12] 劉鵬,王瑾,苗常青,等. 丹參乙酸鎂對大鼠局灶性腦缺血損傷后神經營養因子表達的影響[J]. 腦與神經疾病雜志,2015,23(3):165-169

[13] 劉麗星. 三七總皂苷調節MCAO大鼠Nogo-A/RhoA通路及保護Aβ25-35誘導SH-SY5Y細胞損傷的機制[D]. 北京：北京中醫藥大學,2014

[14] Moon YJ,Lee JY,Oh MS,et al. Inhibition of inflammation and oxida-tive stress by Angelica dahuricae radix extract decreases apoptotic cell death and improves functional recovery after spinal cord injury[J]. J Neurosci Res,2012,90(1):243-256

[15] 蔣躍絨，陳可冀. 川芎嗪的心腦血管藥理作用及臨床應用研究進展[J]. 中國中西醫結合雜志,2016,33(5):707-711

[16] Jahanshahi M,Nikmahzar E,Yadollahi N,et al. Protective effects of Ginkgo biloba extract (EGB 761 ) on astrocytes of rat hippocampus after exposure with scopolamine[J]. Anat Cell Biol,2012,45(2):92-96

[17] 劉晶,李麗. 夏天無對腦梗死大鼠腦源性神經營養因子及高敏C反應蛋白影響的實驗研究[J]. 中國中醫急癥,2010,5(6):23-25

[18] 尹艷艷,李衛平,李維祖,等. 黃芪總苷對大鼠局灶性腦缺血/再灌注損傷后 BDNF,TrkB和p75NTR m RNA表達的影響[J]. 中國藥理學報,2009,25(5):672

[19] 顏玲,周慶華. 黃芪多糖對缺血性腦損傷大鼠的神經保護作用及其機制研究[J]. 中國應用生理學雜志,2012,28(4):373-377

[20] Lu ZF,Shen YX,Zhang P,et al. Ginsenoside Rg1 promotes proliferation and neurotrophin expression of olfactory ensheathing cells[J]. JAsian Nat Prod Res,2010,12(4):265-272

[21] 鄭友生,廖聯明,江敏,等. 人參皂苷Rg1促進神經干細胞增殖的實驗研究[J]. 世界中西醫結合雜志,2011,6(12):1021-1023

[22] 郭文娟,張紅珍,李艷花,等. 補陽還五湯促進中樞神經再生作用研究進展[J]. 中國中醫基礎醫學雜志,2016,22(3):434-436

[23] 曲鐵兵,俞天虹,劉志婷,等. 補陽還五湯及其拆方對大鼠腦缺血后神經發生的影響[J]. 中國中西醫結合雜志,2014,34(3):342

[24] 盧昌均,頓玲露,劉國成,等. 通竅活血湯對腦缺血-再灌注大鼠基質細胞衍生因子-1的調控作用[J]. 醫藥導報,2016,35(1):44-46

[25] 李紅偉,孟祥樂. 地黃化學成分及其藥理作用研究進展[J]. 藥物評價研究,2015,38(2):218-228

[26] 萬東,祝慧鳳,羅勇,等. 梓醇對大鼠梗死灶周圍大腦皮質神經元樹突生長及突觸素表達的影響[J]. 中國藥理學通報,2012,28(11):1515-1521

[27] 宋紅普,魏江磊,吳中華,等. 生地黃免煎顆粒對大鼠腦缺血后Nogo-A蛋白表達的干預[J]. 中國中醫急癥,2012,21(12):1948-1950

[28] 劉洋,伍藝靈,曹佳會,等. 龜板提取物對PC12細胞凋亡的影響及其機制[J]. 中藥材,2011,34(3):400-403

[29] 蔡小軍,邵南齊,宋惠珠,等. 山茱萸主要有效成分的腦保護作用及其分子機制研究進展[J]. 中國生化藥物雜志,2015,35(1):181-184

[30] 徐成成,張鵬飛,丁新生,等. 淫羊藿苷對腦缺血大鼠PTEN和GAP-43蛋白表達的影響[J]. 中風與神經疾病雜志,2015,32(1):4-7

[31] 蔡銳,李菲,董紅心,等. 淫羊藿苷對Tg2576小鼠學習記憶功能及海馬神經細胞再生的影響[J]. 遵義醫學院學報,2015,38(4):350-354

[32] 寇爽. 左歸丸與右歸丸調控EAE大鼠軸突再生NogoA/NgR信號通路的實驗研究[D]. 北京：首都醫科大學，2012

[33] 寇爽,王義周,趙暉,等. 左右歸丸對EAE大鼠中樞神經系統 CREB mRNA和蛋白表達的影響[J]. 中醫藥信息,2014,31(5):19-23

[34] 王義周,寇爽,閆翠翠,等. 左歸丸與右歸丸對EAE大鼠APP及GAP-43表達的影響[J] 中西醫結合心腦血管病雜志，2011,9(10):1221-1224

[35] 姜濤,黃李法,周水晶,等. 麝香酮對腦損傷大鼠腦保護作用的研究[J]. 中國中西醫結合雜志,2016,3(6):724-728

[36] 陳偉峰,韓繼媛,田兆興,等. 復方麝香注射液在大鼠急性全腦缺血再灌注損傷中對BDNF、NGF的影響[J]. 廣西中醫學院學報,2015,8(3):8-10

[37] 謝斌,侯吉華,陳威. 牛珀至寶丹對老年大鼠腦TGF-β1表達和NPCs增殖的影響[J]. 中藥藥理與臨床,2010,26(1):5-8

[38] 謝斌,鄒國明,蘭楊,等. 牛珀至寶丹對老年大鼠腦內bFGF陽性神經元的影響[J]. 時珍國醫國藥,2011,22(2):361-363

[39] 王睿,費洪新,李曉明,等. 石菖蒲的化學成分及藥理作用研究進展[J]. 中華中醫藥學刊,2013,31(7):1606-1610

[40] Li C,Xing G,Dong M,et al． Beta-asaroneprotection against beta-amyloid-induced neurotoxicity in PC12 cells via JNK signaling and modulation of Bcl-2 family proteins[J]. Euro J Pharmacol,2010,(2):1-7

[41] 田素民,馬宇昕,孫靈芝,等. 石菖蒲不同藥效部位改善阿爾茨海默病模型小鼠的認知功能[J]. 中國病理生理雜,2012,28(1):159-162；167

[42] 孫艷,謝婷婷,王東曉,等. 中藥遠志對慢性應激抑郁大鼠BDNF及其受體Trk B mRNA表達的影響[J]. 南方醫科大學學報,2009,29(6):1199

[43] 吳麗麗,冉川蓮,嚴燦,等. 逍遙散對高濃度皮質酮環境下海馬神經前體細胞增殖和分化的影響[J]. 中國病理生理雜志,2009,25(1):97-103

[44] 應娜,李瑩,李姍姍,等. 抑肝散發揮抗抑郁作用的機制研究[J]. 中國衛生檢驗雜志，2016,26(1):46-49

[45] 祝鵬輝,吳麗麗,嚴燦,等.加味四逆散對應激性海馬神經元損傷的保護作用[J]. 廣州中醫藥大學學報,2016,33(2):229-234

[46] 陳暢,唐娟娟,夏寶妹,等. 越鞠丸對帕金森病體外模型的神經保護作用研究[J]. 南京中醫藥大學學報,2015,31(2)：156-159

[47] 徐曉虹. 葛根素對去卵巢小鼠學習記憶和突觸結構的影響[J]. 國藥學雜志，2008,43(16):1238-1242

[48] Matrisciano F,Busceti CL,Bucci D,et al. Dickkopf-1 is involved in stress-induced hippocampal damage[J]. PLoS One,2011,6(1):e16447

[49] 胡躍強,唐農,劉泰,等. 清熱化瘀方對腦缺血再灌注損傷大鼠神經干細胞增殖的影響[J]. 中西醫結合心腦血管病雜志,2011,9(8):977-979