液相色譜技術(shù)在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用

馮 巖 祝 金

（黑龍江省哈爾濱市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)中心，黑龍江哈爾濱 150028）

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中，為保證農(nóng)產(chǎn)品不受到病蟲害的危害，菜農(nóng)會(huì)通過噴灑農(nóng)藥來進(jìn)行處理，這就導(dǎo)致一些蔬菜、水果上殘存了一定量的農(nóng)藥，人畜在食用含有大量農(nóng)藥殘留的產(chǎn)品后極易引發(fā)急性食物中毒。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在所有食物中毒事件中，由農(nóng)藥殘留引起的食物中毒比例高達(dá)40%。基于各種農(nóng)藥的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，高效液相色譜法能有效合理地檢測(cè)農(nóng)藥殘留，其中液相色譜及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)儼然成為對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性、定量分析的最佳手段之一。

1 農(nóng)藥殘留種類及其檢測(cè)技術(shù)

目前，在農(nóng)作物生產(chǎn)中主要使用的農(nóng)藥有機(jī)磷農(nóng)藥、有機(jī)氯農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。農(nóng)藥殘留以農(nóng)藥母體、農(nóng)藥殘留危害衍生物、降解物、代謝物及其他雜質(zhì)的形式存在于環(huán)境、生物體和農(nóng)產(chǎn)品中。

食品中農(nóng)藥殘留的樣品前處理通常采用溶劑萃取、固相萃取及固相微萃取技術(shù)，其中固相微萃取技術(shù)是近年來發(fā)展起來的新技術(shù)，具有效率高、樣品量少、所需試劑量少等優(yōu)點(diǎn)，并且應(yīng)用環(huán)境對(duì)揮發(fā)性的要求很低。農(nóng)殘檢測(cè)方法分為農(nóng)殘快速檢測(cè)法和農(nóng)殘色譜檢測(cè)法。國際上用于農(nóng)殘快速檢測(cè)的方法很多，究其原理主要分為生化測(cè)定法和色譜快速檢測(cè)法。色譜檢測(cè)法即通過氣相色譜、液相色譜及色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性、定量檢測(cè)[1]。

2 高效液相色譜法檢測(cè)農(nóng)藥殘留

早在幾十年前，人們就利用液相色譜分析速率快、分離效能高、分析靈敏度高的特點(diǎn)來對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行定性定量分析。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，液相色譜技術(shù)已經(jīng)運(yùn)用到了食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的各個(gè)方面，成為了農(nóng)藥殘留檢測(cè)不可或缺的一部分。

液相色譜在檢測(cè)農(nóng)藥殘留時(shí)，不受待測(cè)物熱穩(wěn)定性和揮發(fā)性的限制，色譜的流動(dòng)相和固定相選擇范圍大、適用種類多，對(duì)各類型農(nóng)藥的分析優(yōu)勢(shì)比其他方法更加顯著，使得高效液相色譜成為農(nóng)藥殘留檢測(cè)中普遍采用的方法。

2011年，陳若虹等[2]采用高效液相色譜法，用迪馬公司C18色譜柱、甲醇-乙酸水溶液作為流動(dòng)相梯度洗脫，色譜柱溫度為室溫，以紫外檢測(cè)器檢測(cè)了樂果、敵敵畏、甲拌磷等10種有機(jī)磷農(nóng)藥在飲料中的殘留量，檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)大于99.83%，加標(biāo)回收率平均值達(dá)到76.2%～114.0%，檢測(cè)限為0.05～0.42 μg/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.8%～16.0%。結(jié)果表明檢測(cè)飲料中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，液相色譜法相對(duì)于氣相色譜法有著試劑用量少、前處理方法簡(jiǎn)便、方法穩(wěn)定度高、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。

2015年，王潔蓮等[3]用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定了大蔥和韭菜中包括多菌靈在內(nèi)的7種農(nóng)藥的殘留量，采用乙腈作為提取劑，采用氨基固相萃取小柱進(jìn)行凈化，色譜柱溫度為40 ℃，進(jìn)樣量為20 μL，利用紫外檢測(cè)器測(cè)定，用外標(biāo)法定量計(jì)算，該方法的檢出限在0.006～0.050 mg/kg，相關(guān)線性系數(shù)高達(dá)0.99，添加3個(gè)濃度的添加回收，平均回收率79%～103%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.70%～6.12%，該方法各技術(shù)參數(shù)都符合標(biāo)準(zhǔn)。

3 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在農(nóng)藥殘留中的應(yīng)用

超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀是以超高效液相色譜作為分離系統(tǒng)，以串聯(lián)質(zhì)譜作為檢測(cè)系統(tǒng)，這樣既能對(duì)多種農(nóng)藥待測(cè)物進(jìn)行有效的分離，還能通過質(zhì)譜準(zhǔn)確鑒別農(nóng)藥的結(jié)構(gòu)信息。超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀分離效率高、鑒別能力強(qiáng)，在食品分析和藥物分析等很多領(lǐng)域都得到了廣泛的應(yīng)用。

2016年，馬琳等[4]運(yùn)用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定草莓中19種農(nóng)藥殘留，樣品經(jīng)乙腈提取，氨基固相萃取柱凈化，以反相C18色譜柱分離，以乙腈、甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫分離，運(yùn)用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式定量分析。結(jié)果表明：19種農(nóng)藥在0.000 5～1.000 0 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.999，分別添加高、中、低3個(gè)濃度測(cè)試回收率，平均回收率為77.3%～100.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于12.3%；吡唑醚菌酯、聯(lián)苯肼酯、雙炔酰菌胺和啶氧菌酯的定量下限為0.001 mg/kg，其余為0.010 mg/kg。超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法具有簡(jiǎn)便快速、靈敏度高、抗基質(zhì)干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn)，能滿足草莓中19種農(nóng)藥殘留同時(shí)快速檢測(cè)的要求。

[1]劉建慧，孫鑫，劉希光，等.果蔬中農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀及檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2014（15）：119-122.

[2]陳若虹，凌東輝，段夏菲.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定果汁飲料中的10種有機(jī)磷農(nóng)藥[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011（4）：854-855，858.

[3]王潔蓮，董燕飛.高效液相色譜法同時(shí)檢測(cè)蔬菜中7種農(nóng)藥殘留方法的分析[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2015（12）：267-272.

[4]馬琳，黃蘭淇，陳建波，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定草莓中19種農(nóng)藥殘留量[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2016（6）：698-703.