禽白血病及其防控技術研究進展

余春林 楊朝武 邱莫寒 尹華東 虎 彪 胡陳明

（1.四川省畜牧科學研究院，四川成都 610066；2.動物遺傳育種四川省重點實驗室，四川成都 610066；3.四川農業大學動物科技學院，四川成都 611130；4.四川省正鑫農業科技有限公司，四川成都 610400）

禽白血病（AL）是由禽白血病病毒（ALV）引起的一種禽類傳染病，臨床上以免疫抑制、生長抑制以及多器官組織發生良性和惡性腫瘤等為主要特征，ALV既可垂直傳播，也可以水平傳播，嚴重危害家禽產業發展。當前，禽白血病的研究已成為動物醫學的熱點領域。然而，禽白血病的防控依然是阻礙產業發展的重大技術瓶頸，解決這個問題是科學研究和產業發展面臨的共同挑戰。

1 禽白血病概述

1.1 病原學特征 禽白血病病毒為反轉錄病毒，由外部囊膜和內部核芯組成。對熱不穩定，在pH值為5～9時較穩定，乙醚、甲醛、脂溶劑可破壞其囊膜中的脂類，從而影響其感染性。十二烷基硫酸鈉（SDS）等去污劑也可裂解病毒。

該病毒基因組為單股正鏈線性RNA二聚體，編碼區為gag/pro、pol和env基因。gag/pro基因編碼前體蛋白Pr76，該蛋白可加工成基質蛋白p19、衣殼蛋白p27（主要群特異性抗原）、核衣殼蛋白p12（參與RNA加工和包裝）、蛋白酶p15（負責前體蛋白剪切）及部分多肽；pol基因是病毒基因組插入宿主細胞染色體基因組的關鍵，編碼的前體蛋白經p15剪切產生反轉錄酶蛋白p68和整合酶蛋白p32；env基因與病毒抗原性、組織親嗜性及毒力相關，是關鍵致腫瘤基因，其變異決定了ALV-J毒株的變異。

1.2 禽白血病不同亞群特征 根據病毒與宿主細胞特異性相關的囊膜蛋白的抗原性，ALV可分為A～K共11個亞群，其中A、B、C、D、E、J和K等7個亞群能感染雞，其中致病性外源病毒以A、B、J、K為主，C、D亞群有致病性但很少見，E亞群為內源性病毒。

1.2.1 A/B亞群 雞群中自然發生的白細胞增多癥和腫瘤多由此亞群病毒所致。血清流行病學調查顯示，全國約50%雞群ALV-A/B抗體呈陽性，但很少有ALV-A/B誘發腫瘤的病例報告[1]。目前，相關毒株的分離鑒定主要是證明外源性ALV存在。

1.2.2 J亞群 雞是ALV-J的自然宿主，一些野鳥也可感染[2]。ALV-J根據致瘤快慢，分為慢性和急性致腫瘤ALV-J。前者多為分離到的ALV-J野毒株，經幾個月潛伏期才發生腫瘤；后者只需7 d或幾周就能誘導腫瘤，如966[3]。自然病例中，急性白血病腫瘤較少見，劉紹瓊等[4]從山東817肉雜雞中發現1例腫瘤，分離后鑒定與ALV-J相關，并能在較短時間內復制。目前已證明急性致腫瘤ALV的整個pol基因及部分gag和env基因片段被fps腫瘤基因替代[5]。J亞群于20世紀90年代中期擴散至全世界所有品系白羽肉雞，但經十多年對原種雞群的凈化，至2005年已基本實現凈化。而我國ALV-J隨引進雞種在白羽肉雞中大流行后，又擴散至蛋雞、黃羽肉雞培育品種及地方品種，流行嚴重。

1.2.3 K亞群 Li X等[6]2014年從我國地方雞種中發現一個新的ALV-K毒株，且該病毒可能已長期存在于我國本地雞中。其gag、pol和gp37基因與其他ALV亞群（尤其是ALV-E）具有高度相似性，gp85基因序列分析及進化分析顯示其與ALV-K相似。與其他ALV毒株相比，該病毒株具有較低的復制力和致病力。

2 禽白血病流行病學特征

我國禽白血病流行情況形勢嚴峻。1999-2005年，崔治中等[7]已分別從江蘇、山東、河南、寧夏等省區分離到ALV-J。采用病毒分離技術對國外引入種雞直接檢疫，極大地加快了我國白羽肉雞ALV-J凈化進程。2006年后，全國范圍內未見白羽肉雞ALV-J腫瘤相關投訴與報道，但仍存在不同程度的ALV-J感染。ALV-J已傳入我國其他類型雞群。2005年，徐鑌蕊等[8]在河北省某蛋雞群發現典型骨髓細胞瘤病理，并通過免疫組化法證實了蛋雞中ALV-J的存在。同時，我國地方雞種中也普遍存在禽白血病流行。張桂枝等[9]對河南省地方品種泄殖腔拭子、蛋清、血清進行P27抗原檢測，采集血清進行ALV-J、ALV-A/B亞群抗體檢測，同時采集血液接種DF-1細胞進行外源ALV病毒分離，結果顯示，泄殖腔拭子P27抗原檢測陽性率為10.99%～23.55%，蛋清樣本P27抗原陽性率為5.43%～12.32%，血液樣本P27抗原檢測陽性率為22.83%～26.63%，ALV-A/B抗體陽性率為18.48%～30.43%，ALV-J抗體陽性率為6.52%～17.39%，外源病毒分離陽性率為8.00%～13.04%。敖越[10]、王宏燕等[11]也分別報道了我國部分地區禽白血病的流行情況。

3 禽白血病診斷技術

禽白血病主要通過流行病學、臨床癥狀和病理變化進行初步診斷，但確診還需實驗室通過病毒學、免疫學或分子生物學方法進行病毒分離鑒定。其中病毒分離與鑒定是禽白血病診斷最可靠的方法，多在DF1細胞或CEF細胞上進行。在核酸斑點雜交試驗、酶聯免疫吸附試驗、免疫熒光技術、免疫組化技術等基礎上，禽白血病檢測技術發展迅速，已研究出多種基于上述技術的商品化試劑盒。此外，采用膠體金進行標記的免疫層析法研制的快速檢測試紙條，具有快速、可操作性強、成本低的優點，但其靈敏度和準確性存在差異。

4 禽白血病綜合防控技術

4.1 構建禽白血病防控系統 構建科學的疾病防控體系，落實有效的防控措施，是解決當前禽白血病威脅的突破口。禽白血病防控體系是一項系統工程，其核心是要做到引種、飼養、生物安全控制、疾病監測、孵化和出雛等環節的精細化管理。通過制定科學的入場檢疫將病原引入潔凈的群體，實施全進全出制；強化飼養管理制度，保障機體健康狀況，減少水平傳播；定期開展病原監測，掌握疾病感染狀況；執行合理的免疫程序，確保疫苗無外源病毒污染。

4.2 推進禽白血病凈化進程 種源疫病凈化是防控該疾病的首要環節。1987年前后，國際大型育種公司已基本消除白羽肉雞中A/B亞群禽白血病，2005年我國ALV-J也基本得到有效的控制。我國禽白血病感染情況普遍，凈化工作亟待加強。2012年，國務院發布《國家中長期動物疫病防治規劃（2012-2020年）》提出將白血病作為種禽場重點疫病凈化考核標準。2015年，農業部已認證了2個禽白血病凈化示范場和5個禽白血病凈化創建場。

疾病凈化是一項長期持久的工作。目前禽白血病根除主要采用多種綜合檢測手段相結合、多個世代持續凈化、每個世代開展多次全群凈化的方案，對檢出的陽性雞進行嚴格淘汰。這一根除計劃主要受到凈化方法、人員支持、資金保障等因素的限制。尤其是檢測技術方面，病毒分離法是檢測該病的金標準，但技術要求高、耗時長，需結合Elisa法、PCR法、免疫膠體金檢測技術等多種檢測手段進行。由于專業技術人員的缺乏，加之凈化及凈化效果的維持需要長效持續的資金保障，只依靠企業自主能力難以實現。

4.3 開展藥物與疫苗研發 疫苗和藥物是防制禽白血病的重要手段。Sun Y等[12]發現櫛孔扇貝多糖可通過阻斷病毒吸附到宿主細胞而起到抑制作用，其中分子量越低，抑制作用越明顯，提示該來源的多糖可用于禽白血病的預防和治療。Yu C等[13]發現泰山馬尾松花粉多糖（TPPPS）通過直接切斷病毒感染和提高機體免疫力來抑制ALV-J病毒感染；TPPPS作為免疫增強劑，與gp85蛋白疫苗和不同佐劑聯合使用時誘導的抗體應答和保護作用也進行了研究[14]，為ALV-J亞單位疫苗的研制提供了有力的依據。Wang X等[15]研制出一種ALV-J多變種抗原全價疫苗，該疫苗免疫后42 d，抗體滴度可達1∶64 000，且在SPF雞中維持126 d以上免疫保護期。

5 結語

禽白血病感染普遍的高壓下，由于缺乏有效的疫苗和藥物，該病的防控形勢極為嚴峻。盡管近幾年我國對該病的重視程度越來越高，對禽白血病的研究也頗為廣泛，但仍有許多問題亟待解決，且研究成果在生產中的應用廣度和深度還不夠。要加快推進禽白血病凈化進程，從根本上解決禽白血病帶來的影響及危害，需要了解禽白血病病毒感染和分子遺傳機制。同時，作為免疫抑制性疾病，禽白血病疫苗研發尚處于起步階段，要實現實驗室到臨床應用仍需要開展深入研究。現代生物學技術的飛速發展及其在動物醫學方面的應用，有效促進了禽白血病在病原學、基因組特征、流行病學、檢測方法和防治措施等方面的研究，使得通過藥物和疫苗對該病進行控制成為可能，這將為從根本上實現禽白血病的有效防控提供保障。

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