2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者外周血T淋巴細胞亞群的變化

王昊

[摘要]目的探討2型糖尿病合并Hp感染胃潰瘍患者外周血中T淋巴細胞亞群的變化及其臨床意義。方法選取45例2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍組作為研究對象（DM組），同期住院的50例不伴有2型糖尿病僅存在Hp感染的胃潰瘍組作為對照組，采用流式細胞儀免疫熒光法檢測兩組T淋巴細胞亞群的百分數并對結果進行統計學分析，并觀察兩組患者白介素-17（IL-17）以及C-反應蛋白水平（CRP）。結果DM組和對照組CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺的測定結果相比較，差異均有統計學意義，DM組的CD4⁺呈顯著負相關（P<0.01），CD4⁺/CD8⁺呈顯著負相關（P<0.05）。DM組患者IL-17、CRP水平明顯高于對照組。結論2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者存在細胞免疫功能紊亂，提示與Hp感染相關。

[關鍵詞]2型糖尿病；Hp感染；胃潰瘍；T淋巴細胞亞群

[中圖分類號]R587.1；R573.1 [文獻標識碼]B [文章編號]2095-0616（2017）17-227-03

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是指發生于胃的潰瘍，是常見的消化道疾病。幽門螺桿菌（helicobacterpylori，Hp）感染是GU最常見的病因，根除Hp已成為治療Hp相關性GU的共識。研究發現Hp與胃腸外疾病也存在一定的關系，如慢性阻塞性肺疾病、糖尿病等。近年來，2型糖尿病合并消化性潰瘍相關研究受到越來越多重視，T淋巴細胞是機體重要的免疫細胞群，可維持機體正常的免疫功能。本研究通過對伴和不伴2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者外周血T淋巴細胞亞群的測定探討2型糖尿病合并胃潰瘍機體細胞免疫的變化。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2014年10月-2015年10月我院消化內科收治的經胃鏡、病理、快速尿素酶和呼氣試驗檢查明確診斷Hp陽性的胃潰瘍患者，并排除患有感染性及免疫性疾病，心腦血管疾病及惡性腫瘤，近期未用質子泵抑制劑，H₂受體拮抗劑或抗生素者，入選105例患者分為兩組，其中DM組為伴有2型糖尿病者的GU組（2型DM診斷符合國際糖尿病聯盟的糖尿病診斷標準）45例，男28例，女17例，年齡（60.7±4.9）歲；對照組為不伴糖尿病的GU組50例，男32例，女18例，年齡（63.6±5.3）歲，兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2儀器和方法

1.2.1胃鏡檢查和C¹³尿素酶呼氣實驗 患者就診時行胃鏡檢查明確診斷胃潰瘍，且經活檢組織尿素酶試驗和C¹³呼氣實驗兩項均陽性定為Up感染。活檢組織尿素酶試驗：患者行胃鏡檢查時統一取距幽門2cm內胃竇小彎側組織1塊經快速尿素酶試驗盒（由珠海市克迪科技開發有限公司提供）顯色。C¹³呼氣實驗（由河北省協和藥業有限公司提供）：患者空腹漱口后在維持正常呼氣情況下，用吸管將氣緩慢呼入1號樣品管維持4-5s，拔出吸管后立即扭緊試管蓋。此收集為0min呼氣。后用80-100mL涼飲用水送服一袋尿素[¹³C]散劑后靜坐。30min后按上述收集呼氣方法再次收集呼氣進入2號樣品管，扭緊試管蓋。將收集的2個編號的樣品管分別在相應的儀器上進行¹³CO₂檢測。結果判定：通常以30min樣品所測¹³CO₂的δ‰值的差值表示，即檢測值=δ%。（30min）-δ%（0min）。檢測值≥4.0±0.4時，判定受試者為Hp陽性。

1.2.2T淋巴細胞亞群檢測方法患者晨起空腹坐位取肘正中靜脈血4mL，采用流式細胞儀（購自北京博奧森生物技術有限公司）單克隆免疫熒光法，用乙二胺四乙酸抗凝，取CD3+、CD4+和CD8+細胞單克隆抗體試劑各20μL（均購自北京博奧森生物技術有限公司）加入到全血100μL中混勻，置15min，制備標本后放流式入細胞儀分別進行免疫熒光檢測，每個標本計數5000個細胞，計算CD3+、CD4+和CD8+細胞百分率。

1.2.3IL-17、CRP水平檢測方法采用Elisa法（試劑盒購自上海賣約爾生物科技有限公司）檢測IL-17水平；免疫比濁法檢測CRP水平（試劑盒由北京九強生物技術股份有限公司提供）。

1.3統計學處理

采用SPSS17.0軟件統計，計算各組均值，數據均值用（x±s）表示，組間比較用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組患者外周T淋巴細胞亞群水平比較

兩組的CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺比較見表1，DM組較對照組的CD4⁺，CD4⁺/CD8⁺具有顯著差異，DM組水平顯著低于對照組，而CD3⁺，CD8⁺則無明顯差異。即2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者較不伴2型糖尿病的胃潰瘍患者機體存在細胞免疫功能紊亂。見表1。

2.2兩組患者血清IL-17、CRP水平比較

DM組患者IL-17水平高于對照組，DM組CRP水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3討論

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是臨床常見的消化道疾病，因胃酸，胃蛋白酶，Hp感染或各種理化等致病因素破壞能力超過胃黏膜防御能力時，就可能發生胃潰瘍。幽門螺桿菌（helicobacterpylori，Hp）是一種覆蓋胃黏膜的黏液層與胃上皮細胞定居繁殖的革蘭陰性螺旋狀桿菌，目前Hp感染是胃潰瘍重要的致病因素，2型糖尿病（diabetesmellitus，DM）是以慢性高血糖為特征的代謝性疾病，容易引發一系列的代謝紊亂。常由于糖代謝紊亂，免疫功能受損等因素，易引起其胃黏膜，呼吸道等部位合并感染。研究發現Hp感染率較高，易合并糖尿病慢性并發癥。糖尿病患者胃黏膜毛細血管基底膜增厚，微血管內皮細胞增生腫脹，致使胃黏膜血流量明顯減少，細胞再生修復能力下降，黏膜防御能力減弱，使Hp更易于對胃黏膜造成嚴重的損害。因此，Hp感染是糖尿病合并消化道潰瘍發病主要病因之一。T淋巴細胞是人體重要的免疫細胞群，外周血成熟T細胞主要有CD4⁺（輔助性T細胞）和CD8⁺（細胞毒性T細胞）2個亞群，正常情況下，它們在體內進行免疫應答時相互協同，相互制約，以維持免疫應答的相對平衡，平衡失調會導致免疫功能紊亂，影響機體的免疫保護機制。Hp相關性胃潰瘍患者外周血T淋巴細胞亞群水平較低，有效根除Hp治療后，患者T淋巴細胞亞群水平增高，提示Hp感染機體后，患者機體內存在的胃黏膜細胞損傷及免疫防御系統破壞。T淋巴細胞介導的免疫異常可造成胰島β細胞的損傷，在2型糖尿病的發生發展中起重要作用。2型糖尿病患者體內的代謝紊亂可使淋巴細胞、樹突細胞等免疫細胞有不同程度損傷，導致T2DM患者免疫功能紊亂，這可能也是T2DM患者容易發生感染的原因之一。

本研究顯示，2型糖尿病合并Hp陽性的胃潰瘍患者與對照組相比較，CD4⁺，CD4⁺/CD8⁺顯著降低，而CD3⁺，CD8⁺變化不明顯，提示機體存在細胞免疫紊亂和功能缺陷，Hp在其中發揮重要作用。一般認為循環中CD3⁺及CD4⁺減少，CD4⁺/CD8⁺比例降低是免疫缺陷的重要特征。在觀察IL-17和CRP水平上發現，DM組IL-17、CRP水平明顯高于對照組。IL-17是促炎性細胞因子，IL-17水平升高提示人體發生炎癥反應，對人體免疫功能產生影響。CRP是人體血漿急性時相蛋白，參與細胞凋亡、激活補體功能，調理感染，CRP水平升高也顯示有明顯感染。對于合并糖尿病的患者，Hp感染通過釋放內毒素入血不僅促進胃潰瘍發生，還使炎性因子和氧自由基生成增加，加重胰島素抵抗，造成患者血糖難以控制，加速糖尿病并發癥的進程，具體機制有待于進一步研究。由此可推斷，對于合并糖尿病的胃潰瘍患者，提高Hp根除率，同時有效控制血糖，可提高胃潰瘍的愈合率。

（收稿日期：2017-06-05）