幾種藥劑對柑桔潰瘍病菌的毒力和防治效果

韋文添+關明

摘要：【目的】尋求高效環(huán)保的理想的藥劑，為柑桔潰瘍病化學防治提供科學依據(jù)。【方法】采用抑菌圈法，測定5種殺菌劑對柑桔潰瘍病菌（Xanthomonas citri subsp.citri）的毒力，并進行了田間藥效果試驗。【結果】對柑桔潰瘍病菌的毒力最強的是“32%唑酮·乙蒜素乳油”，EC50為0.9512μg/ml；其次是“2%春雷霉素水劑”，EC50為22.1449μg/ml；而“46%氫氧化銅可濕性粉劑”、“3%噻霉酮微乳劑”和“20%噻菌銅懸浮劑”次之，EC50分別為446.2117μg/ml、2099.1205μg/ml和2302.8969μg/ml。田間藥效試驗“32%唑酮·乙蒜素乳油”、“2%春雷霉素水劑”防治效果最好，兩種藥劑與“46%氫氧化銅可濕性粉劑”、“3%噻霉酮微乳劑”和“20%噻菌銅懸浮劑”防治效果差異顯著，“32%唑酮·乙蒜素乳油”與“46%氫氧化銅可濕性粉劑”、“3%噻霉酮微乳劑”和“20%噻菌銅懸浮劑”差異極顯著；“46%氫氧化銅可濕性粉劑”、“3%噻霉酮微乳劑”和“20%噻菌銅懸浮劑差”差異不顯著。【結論】“唑酮·乙蒜素”和“春雷霉素”與其它藥劑防治效果差異顯著，防效達90%以上，在柑桔潰瘍病可持續(xù)防治上，可以推廣使用。

關鍵詞：柑桔；殺菌劑；潰瘍病菌；毒力；田間防效

中圖分類號：S436.6文獻標識碼：A文章編號：1003-4374（2017）01-0021-04

Abstract： 【Objective】Its of great significance to find out efficient and environment-friendly fungicides to kill Botryosphaeria Dothidea of citrus.【Method】 By using an inhibition zone method，the field experiment is conducted to measure the potency of five fungicides to kill Botryosphaeria Dothidea of citrus.【Result】 Results show that：32% Triadimefon has the strongest potency（EC50=0.9512μg/ml）；2% kasugamycin water has the second strongest potency（EC50=22.1449μg/ml）；next come 46% copper hydroxide WP（EC50=446.2117μg/ml），3% cefotaxime microemulsion （EC50=2099.1205μg/ml）and 20% thiodiazole copper SC （EC50=2302.8969μg/ml）；in terms of prevention & cure effect，32% Triadimefon and 2% kasugamycin water perform best，which have more remarkable effects than 46% copper hydroxide WP，3% cefotaxime microemulsion and 20% thiodiazole copper SC；among the four fungicides （32% Triadimefon，46% copper hydroxide WP，3% cefotaxime microemulsion and 20% thiodiazole copper SC），the effects are dramatically different；among the three fungicides （46% copper hydroxide WP，3% cefotaxime microemulsion and 20% thiodiazole copper SC），the effects are slightly different.【Conclusions】Conclusions are：due to its effects of prevention and cure （90%），Triadimefon and kasumin with remarkably better performance are recommended.

Key words： citrus；fungicide；Botryosphaeria dothidea；potency

柑桔潰瘍病（citrus canker）寄主范圍廣，主要為害蕓香科植物，引起葉片、枝條、果實潰瘍斑，影響植株長勢，造成產(chǎn)量和品質下降，對柑桔生產(chǎn)影響極大。“沃柑”是雜交晚熟寬皮柑橘，廣西于2012年最早引進到南寧市武鳴區(qū)種植[1]。沃柑植株長勢旺盛、早結豐產(chǎn)、果品優(yōu)質、市場競爭力強，經(jīng)濟效益好[2]。廣西南寧的氣候條件比較容易引發(fā)潰瘍病，沃柑屬寬皮類柑橘，容易感染柑橘潰瘍病（Xanthomonas citri subsp.citri），隨著“沃柑”種植迅猛發(fā)展，潰瘍病的發(fā)生對沃柑生產(chǎn)構成較大威脅，目前藥劑防治是防治該病有效方法之一。本次試驗采用常用殺菌劑對潰瘍病菌毒力測定，并進行田間藥效試驗，為沃柑生產(chǎn)提供參考。

1材料與方法

1.1材料

牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基（NA培養(yǎng)基）[3]：蛋白胨10g，牛肉浸膏3g，瓊脂18g，水1000ml，PH值7.0。

供試病原細菌為柑桔潰瘍病菌，分離自廣西農(nóng)墾國營明陽農(nóng)場向陽分場沃柑果園，且已經(jīng)進行致病性測定，證明為“沃柑”潰瘍病菌的致病菌。

供試藥劑有“46%氫氧化銅可濕性粉劑”（美國杜邦公司生產(chǎn)）；“20%噻菌銅懸浮劑”（浙江東風化工有限公司生產(chǎn)）；“3%噻霉酮可濕性粉劑”（陜西西大華特科技實業(yè)有限公司生產(chǎn)）；“32%唑酮·乙蒜素乳油”（含三唑酮2%、乙蒜素30%）（開封大地農(nóng)化生物科技有限公司生產(chǎn)）；“2%春雷霉素水劑”（日本北興化學工業(yè)株式會社生產(chǎn)）。

1.2方法

1.2.1室內(nèi)毒力測定含菌培養(yǎng)基平板制備將供試菌株接種于NA斜面培養(yǎng)基上活化培養(yǎng)24h后，加入5ml滅菌水，制成潰瘍病菌懸液備用。取病菌懸液1ml移入直徑為90mm的無菌培養(yǎng)皿中，倒入冷卻至45℃左右的NA培養(yǎng)基10ml，并充分搖勻，冷卻凝固后即得含潰瘍病菌的培養(yǎng)基平板[4～5]。

藥液的配制將原藥用無菌水配成8mg/ml的母液，再按梯度稀釋的方法，依次配得1600、320、64、12.8μg/ml的系列藥液[4～6]。

抑菌圈測定采用抑菌圈法，用打孔器打取直徑5mm的濾紙片，滅菌后烘干備用。在系列濃度的藥液中浸入濾紙片，取出瀝去余藥，移至準備好的含菌培養(yǎng)基平皿上，每處理重復3次，以浸無菌水的濾紙片為對照。置28℃人工氣候箱培養(yǎng)2d后，用十字交叉法測量抑菌圈直徑（mm），計算菌落生長抑制率，菌落生長抑制率（%）=[（處理組抑制圈直徑-對照組抑制圈直徑）/處理組抑制圈直徑]×100[5-7]。以各濃度的對數(shù)值為橫坐標（x），對應的抑制率幾率值為縱坐標（y），運用DPS軟件分析，得毒力回歸方程、斜率、EC50和相關系數(shù)（r）[5～9]。

1.2.2田間藥效試驗試驗地選在廣西農(nóng)墾國營明陽農(nóng)場向陽分場，試驗品種為較易感病的“沃柑”品種，樹齡為2年生幼樹，肥水管理水平一致，植株長勢中等。試驗選用上述常用的5種藥劑，設“46%氫氧化銅可濕性粉劑”1000倍、“20%噻菌銅懸浮劑400倍”、“3%噻霉酮微乳劑”500倍、“32%唑酮·乙蒜素乳油”2000倍、“2%春雷霉素水劑”400倍和清水對照六個處理。

隨機區(qū)組設計，每小區(qū)處理10株樹，3次重復，共施藥二次。于2016年8月23日噴藥第1次，此時秋梢長約2cm。隔10d即8月31日噴施第2次藥。末次施藥15d后，每小區(qū)隨機調查2株樹的發(fā)病情況，共調查20條枝梢，每株5個點按東南西北中取樣[10-12]。葉片病情分級方法，0級：無病斑；1級：每張葉有病斑1～5個；3級：每葉有病斑6～10個；5級：每葉有病斑11～15個；7級：每葉有病斑16～20個；9級：每葉有病斑21個以上[10～13]，計算病情指數(shù)及防治效果，用新復極差（Duncan）法分析結果。

病情指數(shù)（%）=[∑（各級病葉數(shù)×相對級數(shù)值）/調查總葉數(shù)×9）]×100

防治效果（%）=[（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)]×1002結果與分析

2.1毒力測定結果

從表1可以看出，5種供試藥劑及不同濃度間對潰瘍病菌的抑菌作用有明顯差異。從抑菌率可以看出，“32%唑酮·乙蒜素乳油”、“2%春雷霉素水劑”兩種藥劑對潰瘍病菌的抑抑制效果最顯著，最小濃度就有明顯的抑制效果，濃度為64μg/ml時，抑制率分別高達71.9%、59.0%；其它3種藥劑“46%氫氧化銅可濕性粉劑”、“20%噻菌銅懸浮劑”和“3%噻霉酮微乳劑”效果較好，在終濃度為8000μg/ml時，抑制率分別為70.6%、66.0%、70.0%，“20%噻菌銅懸浮劑”和“3%噻霉酮微乳劑”兩種藥劑在低濃度下不表現(xiàn)抑制作用。

從表2得知，5種供試藥劑的劑量與抑制率的相關系數(shù)均達顯著水平，兩者線性相關。依EC50來看，“32%唑酮·乙蒜素乳油”、“2%春雷霉素水劑”的EC50最小，均沒到100μg/ml，說明這2種藥劑毒力較大，抑制效果最好；其次是“46%氫氧化銅可濕性粉劑”的抑制效果較好，其為EC50為446.2117μg/ml；而“20%噻菌銅懸浮劑”和“3%噻霉酮微可濕性粉劑”的EC50最大，分別為2302.8969μg/ml和2099.1205μg/ml，毒力最小，抑制效果一般。5種藥劑可進一步開展田間試驗。

2.2田間藥效試驗結果

田間防治試驗結果看出，“32%唑酮·乙蒜素乳油”2000倍與“2%春雷霉素水劑”400倍防治效果最好，防效均在90%以上，兩藥劑防治效果差異不顯著；“32%唑酮·乙蒜素乳油”2000倍極顯著差異于“46%氫氧化銅可濕性粉劑”1000倍、“20%噻菌銅懸浮劑”400倍和“3%噻霉酮可濕性粉劑”500倍，“2%春雷霉素水劑”400倍與“46%氫氧化銅可濕性粉劑”1000倍差異沒達到極顯著水平；“46%氫氧化銅可濕性粉劑”1000倍、“20%噻菌銅懸浮劑”400倍、“3%噻霉酮可濕性粉劑”500倍之間防治效果差異不顯著；“20%噻菌銅懸浮劑”400倍和“3%噻霉酮可濕性粉劑”500倍的防治效果較差（見表3）。

3討論與結論

試驗比較了5種藥劑對柑桔潰瘍病的毒力測定和田間防治效果。毒力試驗結果表明，對柑桔潰瘍病菌的毒力強弱依次為“唑酮·乙蒜素”>“春雷霉素”>“氫氧化銅”>“噻霉酮”>“噻菌銅，噻霉酮”和“噻菌銅”在低濃度下不表現(xiàn)抑菌效果；田間藥效試驗結果表明，“唑酮·乙蒜素”防治效果最好，“唑酮·乙蒜素”和“春雷霉素”與其它藥劑防治效果差異顯著，防效達90%以上；“氫氧化銅”、“噻霉酮”和“噻菌銅”三藥劑防效差異不顯著。“噻霉酮”和“噻菌銅”防效也在74%以上，“噻菌銅”的防效略好于“噻霉酮”，與毒力測定有些偏差，可能與藥劑在植物體內(nèi)活化有關。

“沃柑”在廣西近幾年的種植面積發(fā)展迅猛，由于比較易感潰瘍病，對果農(nóng)造成較大的損失，對防治柑桔潰瘍病以化學防治為主的綜合防控措施可收到良好的效果。通過防止病源傳播、加強肥水管理、控放秋梢、修剪清園等農(nóng)業(yè)防治也得到一定的控制，拮抗生物防治因其局限性還沒得到很好的推廣應用，所以就要選用高效環(huán)保的藥劑，合理使用農(nóng)藥。“唑酮·乙蒜素”是“三唑酮”和“乙蒜素”復配的新型殺菌劑，有高效低毒無殘留，持效期長，可被植物內(nèi)吸性、雙向傳導，防治效果好等特點，是防治柑桔潰瘍病的理想藥劑。“春雷霉素”為生物制劑，毒性低、環(huán)保，防治效果效果好；氫氧化銅為無機銅制劑，目前在柑桔潰瘍病防治上用量較大，誘發(fā)柑桔螨類的發(fā)生；“噻霉酮”和“噻菌銅”是有機銅制劑，具有高效、廣譜，低毒、低殘留等特點。在柑桔潰瘍病可持續(xù)防治上，可以推廣使用“唑酮·乙蒜素”復配殺菌劑、“春雷霉素”生物制劑，可按試驗濃度使用；注意與“噻霉酮”及“噻菌銅”等有機化學制劑交替使用，減緩抗藥性，“乙蒜素”作用機理獨特，是環(huán)保廣譜仿生殺菌劑，與其它殺菌劑無交互抗性，復配使用可增效，可以適當復配“80%乙蒜素乳油”2000倍提高防治效果。相關藥劑的合理復配，提高柑桔潰瘍病的防治效果有待進一步的研究。

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