中藥專業(yè)薄層色譜實驗的綠色化改進

劉月新++徐菲++劉芳++江星明

摘 要：結(jié)合學院實驗室條件，對中藥學專業(yè)原有的薄層實驗項目進行綠色化改進。通過不斷地篩選、優(yōu)化，最終選擇開設(shè)中藥一枝黃花的薄層色譜鑒別實驗。改進后的實驗項目，與中藥專業(yè)結(jié)合緊密，操作簡便，具有良好的實驗教學效果。實驗的改進，為促進分析化學實驗室的綠色化建設(shè)奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：薄層色譜法 一枝黃花 中藥專業(yè) 實驗綠色化

中圖分類號：O657.7 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2017）11（a）-0215-02

薄層色譜法鑒別是在1985版中國藥典〔一部〕被首次收載的，眾所周知，薄層色譜法（TLC）的優(yōu)勢是能夠提供近似圖畫的成像，使得中藥中的組分能夠整體地被可視化。不同種屬的草藥產(chǎn)生的TLC圖像具有各自的專屬性。在如今中藥制劑的檢驗，特別是定性分析中，得以廣泛應用[1]。

薄層色譜法自收載于中國藥典以來，它在控制中藥質(zhì)量方面起到積極的作用，已為中藥生產(chǎn)及質(zhì)量監(jiān)督管理部門所廣泛認同。因此，作為中藥學專業(yè)的學生需要特別注意學習掌握。為今后的工作、學習奠定基礎(chǔ)。

1 實驗原理

薄層色譜法，是將固定相涂布于玻璃板、塑料板或鋁基片上，形成均勻的薄層。待點樣、展開后，與相應的對照品按同法所得的色譜圖，比較比移值（Rf）的大小，用以進行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法[2]。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù)，也用于跟蹤反應進程[3]。

筆者根據(jù)授課學生的專業(yè)特點，將實驗教學與中藥實踐相結(jié)合，探討適合的實驗和教學方法。

2 學生實驗時存在的問題

（1）傳統(tǒng)的薄層色譜實驗為奎寧和辛可寧的薄層鑒別，雖然非常經(jīng)典，但所用展開劑為苯-乙醚-二乙胺（8∶3∶1）[4]，其中苯和乙醚的毒性很大，不符合綠色化實驗室建設(shè)。并且實驗內(nèi)容與中藥專業(yè)結(jié)合針對性不夠強，學生對其知識的了解興趣不夠，迫切需要進行實驗內(nèi)容和教學的改進。

（2）傳統(tǒng)的薄層色譜實驗，需要學生自己制備硅膠G板，而學生在制備薄層板時的技術(shù)和熟練程度，直接影響薄層板的質(zhì)量，比如制備的板厚度不均勻，板表面凹凸不平等，都會影響實驗的分離效果[5]。

（3）傳統(tǒng)的薄層色譜實驗，學生在進行鑒別時，可能會出現(xiàn)斑點成像不圓，有拖尾現(xiàn)象，顯色不清晰，分離時間過長，不易鑒別等問題[6]。

筆者總結(jié)經(jīng)驗，反復摸索，在該項實驗中提出以下幾方面的改進措施。

3 實驗的綠色化改進

經(jīng)過反復實驗，結(jié)合中藥學專業(yè)的特點，我們最終選取中藥一枝黃花作為薄層鑒別對象，鑒定其中的蘆丁和綠原酸。

一枝黃花為菊科植物一枝黃花Solidago decurrens Lour的干燥全草[7]，具有清熱解毒，消腫止痛等功能，用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，痰熱咳嗽，毒蛇咬傷，瘡瘍腫痛，濕疹等[8]。

為了讓實驗更順利的開展，我們首先查閱了藥典，并對藥典中一枝黃花的薄層鑒別方法進行了改進，使其更適合在實驗室對學生廣泛進行開展。

（1）我們對藥典中一枝黃花的供試品的處理方法進行了改進，改進后的方法更簡便，節(jié)約了學生配制對照液的時間，同時減少了該操作的失誤。更適合學生實驗開展。方法為：取樣品粉末2g，加乙醇30mL，超聲處理20min，過濾。濾液作為供試品溶液[9]。

（2）我們對藥典中一枝黃花的薄層展開條件進行了改進，改進了的展開劑更環(huán)保，減少了實驗室有機試劑的使用量，減小了實驗室污染。符合綠色化學的理念。展開劑為：36%的乙酸溶液。

（3）制作薄層板是薄層實驗操作難度之一，學生在短時間內(nèi)是難以熟練掌握的。因此，我們直接使用正規(guī)廠家生產(chǎn)的聚乙酰胺薄膜板，這一改進措施，使實驗時間縮短。實驗成功率大大提高了。

（4）手動點樣的方法和點樣的量也是影響實驗效果的因素之一，我們經(jīng)過多次實驗教學發(fā)現(xiàn)，用毛細管點樣，點樣的力度不易掌握，容易造成板破損。所以在實驗過程中需要給學生特別強調(diào)，在第一次點樣完成后，待溶劑揮發(fā)后再進行第二次點樣。并且要注意點樣點的直徑不大于3mm[10]。

（5）在講授實驗原理的同時，引入該實驗項目的綠色化改革內(nèi)容，從節(jié)約資源和保護環(huán)境的角度引導學生加強預習，讓學生在對實驗操作過程了解后再進行實驗。在實驗中對操作要點要進行強調(diào)，要求學生必須做到規(guī)范操作，做到動作準確、規(guī)范靈活、操作嫻熟，盡量避免學生因操作失誤而造成重復實驗。引導學生時刻注意節(jié)約藥品，能少用一定要少用，能回收一定要回收，減少試劑損失和對環(huán)境的污染[11]。

儀器分析這門學科中一些重要的方法和理論，僅以課堂講授的形式傳播給學生，往往比較抽象、空洞，學生反應很難學習掌握。用薄層色譜法鑒別中藥一枝黃花的主要成分，只是中藥一枝黃花鑒別項目的其中一種方法，筆者旨在通過對該項實驗內(nèi)容的改進，使薄層色譜法的概念形象化，具體化。結(jié)合實驗室學生人數(shù)多、學生專業(yè)層次的特點，設(shè)計實驗內(nèi)容，并在實驗教學中適當改進操作步驟，以及通過改變實驗條件，進行對比實驗，使學生認識到理論知識的重要性和實驗操作的直觀性。

實驗的改進，更好的利用實驗室條件，與學生專業(yè)特點相結(jié)合，讓學生學以受用，大大提高了學生的興趣，又能降低實驗成本，節(jié)約資源，減少浪費。今后，如何更好的開展儀器分析實驗教學，開展對環(huán)境友好的實驗項目，實現(xiàn)綠色化實驗室，這是我們繼續(xù)思考的目標和動力。

參考文獻

[1] 顧英，馮怡.薄層色譜新技術(shù)在中藥藥物分析方面的應用[J].時珍國醫(yī)國藥，2006，17（12）：2589-2590.

[2] 潘國石.分析化學[M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005.

[3] 尹麗，宗蘭蘭，蒲曉輝，等.薄層色譜法在藥物分析中的應用[J].河南大學學報：醫(yī)學版，2016，35（2）：77-80.

[4] 池玉梅.分析化學實驗[M].第1版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2014.

[5] 吳倩.從中藥大黃的鑒別談薄層色譜法實驗教學[J].新一代（下半月），2012，7（443）：152.

[6] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[7] 李美琴，潘紅玲.一枝黃花與加拿大一枝黃花的鑒別比較研究[J].海峽藥學，2009，21（3）：71-72.

[8] 沈校，鄒崢嶸.一枝黃花屬植物的化學成分和生物活性研究進展[J].中國中藥雜志，2016，41（23）：4303-4313.

[9] 石海，孫傳梅，孫晉，等.一枝黃花抗感顆粒質(zhì)量標準研究[J].貴陽中醫(yī)學院學報，2007，29（2）：20-22.

[10] 單紅艷.薄層色譜法檢驗中藥應注意的問題[J].中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育，2011，9（17）：146-147.

[11] 張學東，張宜欣，劉永紅.化學分析實驗室綠色環(huán)保化建設(shè)探討[J].實驗技術(shù)與管理.2012，21（3）：357-359.endprint