采收期對寶興縣華重樓皂苷含量的影響

李碧琴+王春濤+劉帆+鄭順林

摘要 〔目的〕通過對華重樓不同生長發育期有效成分（重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ）含量的研究，為華重樓適宜采收期的確定提供試驗依據。〔方法〕采用高效液相色譜法。〔結果〕不同生長期華重樓中4種皂苷總含量發生明顯變化。從不同月份采集看，4—9月重樓皂苷含量呈升高趨勢，8—9月含量最高，10月后開始下降。不同生長年份看，前期華重樓皂苷積累較慢，第5～6年重樓皂苷達到最高，之后有下降趨勢。〔結論〕明確了華重樓重樓皂苷含量高的最佳采收期，即一年中8—9月是最佳采收期，以生長年限第5～6年采收最佳。

關鍵詞 華重樓；皂苷；采收期；四川寶興

中圖分類號 S567 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）01-0056-01

四川華重樓[Paris polyphylla Smith var. chinensis（Franch.）Hara]，為《中國藥典》收載的常用中藥材[1]，其主要活性成分為甾體皂苷，具有止血、抗菌、抗腫瘤、調節免疫、鎮靜、鎮痛等生物活性，是一些著名中成藥宮血寧膠囊、樓蓮膠囊等的主要原料之一，市場需求量較大。

由于四川華重樓藥用價值較高，遭到長期掠奪式的采挖，野生資源日益減少，導致工業藥用原料嚴重緊缺。近年來，對人工栽培華重樓逐漸重視，人工栽培品種逐漸增多。寶興縣是四川華重樓傳統而集中的分布區域之一，在生產實踐中，如何采取有效措施控制與提高藥材質量，同時獲得最好的經濟效益是值得關注的重要問題。重樓皂苷是華重樓的活性成分和衡量藥材質量的重要指標，已有人對不同生長年限華重樓的皂苷含量進行了檢測[2]，但目前尚未查閱到對華重樓藥材不同采收期進行系統研究的相關資料，而利用物候期來指導中藥材采收是保證良好品質的重要措施[3]。因此，本試驗擬采用HPLC法對年度間（同一年不同時期采收）和年際間（不同生長年限采收）的華重樓4種重樓皂苷進行含量分析，以期為確定華重樓的最佳采收期提供依據，進一步服務于四川人工栽培華重樓的規范化種植與采收。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試儀器。1100 LC高效液相色譜儀、KQ-250B型超聲波清洗器、RE-2000型旋轉蒸發儀、SHZ-m循環水式真空泵、1/10 000電子天秤。

1.1.2 供試試劑。重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ對照品為標品；乙腈為色譜醇，水為去離子蒸餾水，其他試劑均為分析純。

1.1.3 供試樣品。7份華重樓樣品于2016年4—10月采自四川省雅安市寶興縣靈關重樓種植基地，為2011年栽培的試驗材料，測定年內不同月份采收期華重樓品質的變化；取用種苗栽培2～8年的華重樓，測定不同年份華重樓皂苷積累量。以上材料均為華重樓的干燥根莖。

1.2 試驗方法

采用高效液相色譜法[4]。精確稱量樣品粉末（過3號篩）0.400 0 g，置具塞錐形瓶中，精密加75%乙醇30 mL，超聲處理30 min，提取溫度為6 ℃，放冷過濾，重復1次，合并濾液。回收乙醇至干，用甲醇溶解定容至10 mL，得供試品溶液。

2 結果與分析

2.1 華重樓品質月份間的變化

華重樓不同采挖月份重樓皂苷含量的變化如表1所示。可以看出，4—9月生長階段，重樓皂苷總含量呈不斷上升趨勢。4—5月，變化不大，增加很慢，6—7月重樓皂苷總含量開始加快增長，8月和9月為重樓皂苷總含量的最高峰，以后開始迅速下降。表明重樓皂苷總含量一年中有一個峰值，出現在8—9月，是一年中采挖華重樓的最佳時間。8月后，重樓開始衰老，地上部的營養開始逐漸向地下部轉移，為來年的出苗生長做準備，因此其藥用品質也達到最佳。

2.2 華重樓品質年際間的變化

不同年份華重樓皂苷含量的變化如表2所示。可以看出，不同生長年限華重樓中重樓皂苷的含量差異較明顯，華重樓在2～3年間，重樓皂苷的含量積累很緩慢，總量均在0.3%以下，沒有達到藥典規定的要求。4年以后開始上升，在5年以后，皂苷總量積累迅速增加，達到0.96%，第6年達到最高，為1.0%。以后含量有下降趨勢，維持在0.5%以上水平。表明華重樓皂苷總量最高生長年限是5～6年，不足5年的重樓4種皂苷積累量不足，有可能是皂苷積累時間不足，但也可能是受到生長過程中澆水、施肥、光照等多種因素的影響。因此，從藥用品質的角度講，五至六年生是獲得華重樓藥用品質最佳的采收時間。而生長時間過長，皂苷總含量反而有所下降，可能是生長時間太長，基部營養為保證頂端生長而大量消耗，導致整體含量下降所致。

3 結論與討論

該試驗結果表明，4種重樓皂苷總含量在8—9月（果熟期）達到高峰，10月開始下降，翌年4—9月呈升高趨勢（前期慢，中期快，后期迅速）；華重樓皂苷總量最高生長年限是第5～6年，不足5年的重樓4種皂苷積累量不足，7年以后含量總體呈下降趨勢。因此，兼顧產量和重樓皂苷含量，華重樓的最佳采收期為8—9月，在寶興縣及類似生態區，種苗栽植后5～6年是獲得華重樓藥用品質最佳的采收時間。

寶興縣華重樓的生長發育一般分為營養生長期（4月）、授粉期（5—6月）、果熟期（7—9月）、衰老期（9—10月）等4個物候期。不同生長發育期的華重樓其4種重樓皂苷的積累處于一個動態的過程中，隨時間的變化而變化，含量差異較大。采收期是影響中藥材產量和質量的重要環節之一，確定最佳采收期需要從藥材的產量和質量2個方面進行綜合考慮，華重樓的最佳采收期兼顧產量和含量因素，認為應以8—9月（果熟期—衰老期）為宜，這與實際生產中傳統采收期基本一致。

重樓皂苷的積累是一個動態過程，在一定年限內，皂苷含量呈遞增積累；但超過一定年限后，皂苷含量呈遞減變化，可能是生長時間過長，尾端木質化加快或者藥效成分流失引起。同時華重樓生長年限過長，發現尾端有腐爛或者被蟲子啃食的現象，促進藥效向頂端轉移，這些都可能導致藥效下降。華重樓皂苷總量最高生長年限是第5～6年，不足5年的重樓4種皂苷積累量不足，可能是皂苷積累時間不足，也可能是受生長過程中澆水、施肥、光照等多種因素的影響[5-6]。

4 參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中國藥典，I部[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010：243.

[2] 李化，黃璐琦，楊濱.論植物物候學指導中藥材采收期的研究[J].中國藥學雜志，2008，43（19）：1441.

[3] 張燁，呂霜霜，周濃，等.不同生長年限滇重樓中4種重樓皂苷的含量比較[J].中國藥房，2011，22（43）：4081-4083.

[4] 黃蕓，崔立劍，劉偉娜，等.HPLC-ELSD法分析重樓商品藥材中甾體皂苷的含量[J].中國中藥雜志，2006，31（15）：1230.

[5] 張玨，王躍華，楊華，等.華重樓研究現狀[J].時珍國醫國藥，2013，24（1）：196-198.

[6] 尹顯梅，張開元，蔣桂華，等.華重樓皂苷類成分的動態分布規律對藥材質量的影響[J].中草藥，2017，48（6）：1199-1204.