不同產地南五味子中木脂素和總多糖的比較

王宇暉， 蔡子平

（1.南京農業大學園藝學院，江蘇 南京 210095；2.甘肅省農業科學院中藥材研究所，甘肅 蘭州730070；3.甘肅省中藥材種質改良與質量控制工程實驗室，甘肅 蘭州 730070）

南五味子為木蘭科植物華中五味子（Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.） 的干燥成熟果實［1］，具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之功效，用于久嗽虛喘、夢遺滑精、遺尿尿頻、久瀉不止、自汗、盜汗、津傷口渴、氣短脈虛、內熱、消渴、心悸失眠等癥。其廣泛分布于江蘇、安徽、河南、山西、陜西、甘肅、湖北、四川、江西、湖南、貴州和云南等地［2］。南五味子現在陜西和甘肅隴南地區規模栽培，含五味子甲素、五味子酯甲、乙、丙、丁、戊等木脂素類成分［3］。研究發現，南五味子中含有大量的木脂素類成分，具有很好的降酶、抗炎、抗氧化、抗腫瘤等作用［4］，如五味子酯類成分能顯著降低谷丙轉氨酶［5］，木脂素具有鎮靜、催眠等多種藥理作用［6］。藥理臨床實驗表明，酯甲、酯乙、酯丙、酯丁對遷延性、慢性病毒性肝炎有較好的降SGPT作用，其商品制劑“五酯膠丸”已用于臨床治療急、慢性肝炎［7］。

為了探討不同產地南五味子的差異，我們于2017年8月在甘肅省中藥材種質改良與質量控制工程實驗室以南五味子醇提物中木脂素的含量和總多糖為評價指標，采用紫外分光光度法分別對甘肅、陜西、四川產地的南五味子木脂素和多糖含量進行了測定，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試南五味子藥材分別購自蘭州旭康藥業（批號：20130910），產地陜西；復興厚藥業（批號：20130510），產地甘肅；隴西百寶藥業（批號：20130225），產地四川。五味子乙素對照品（110765-201311）購自中國食品藥品檢定研究院。供試試劑變色酸、苯酚、95%乙醇、甲醇、濃硫酸均為分析純。

1.2 儀器設備

可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司生產，型號規格：T6新悅），電子天平（奧豪斯儀器有限公司生產，型號規格：SE602F），調溫型電熱套（型號規格：MH-250）。

1.3 試驗方法

1.3.1 試樣的制備 ①南五味子木脂素樣品溶液的制備。準確稱取甘肅、陜西、四川產南五味子各20.0 g，用95%乙醇80mL，回流提取2 h，室溫冷卻，過濾；提取液濃縮至60mL，取2mL水浴蒸干，用甲醇定容至50mL，即得南五味子木脂素樣品溶液。②南五味子多糖樣品溶液的制備。準確稱取甘肅、陜西、四川產南五味子各20.0 g，水煎煮提取2次，第1次加15倍水，煎煮1h；第2次加10倍水，煎煮0.5h。提取液過濾，合并兩次提取液，濃縮、醇沉、抽濾，取沉淀加蒸餾水溶解，即得南五味子多糖樣品溶液。

1.3.2 標準曲線繪制 ①木脂素標準曲線的繪制。精確稱取五味子乙素對照品0.0026g，置10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得質量濃度為0.26 mg/mL的標準溶液。分別精確吸取五味子乙素標準溶液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL置5mL容量瓶中，加95%乙醇定容至刻度，搖勻，在570 nm處測定其吸光度，以吸光度為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制木脂素標準曲線。②多糖標準曲線的繪制。精確稱量葡萄糖0.9947g，定容于250mL容量瓶中，稀釋40倍，即得質量濃度為0.099 47 mg/mL的葡萄糖標準溶液。稱取苯酚固體5 g，蒸餾水溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，備用。分別精密吸取葡萄糖標準溶液 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9 、1.0mL置于20mL試管中，補加蒸餾水至1.0mL，再加入5%苯酚1mL及濃硫酸5mL，靜置10min，搖勻，室溫放置20min。以1.0mL水按同樣操作為空白。在490 nm處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制多糖標準曲線。

圖1 木脂素標準曲線

圖2 葡萄糖標準曲線

1.3.3 木脂素質量濃度和總多糖質量濃度測定采用紫外-分光光度法測定南五味子中的木脂素質量濃度和總多糖質量濃度［8-15］。準確吸取南五味子木脂素樣品溶液和多糖樣品溶液，按照1.3.2的方法操作，根據標準曲線計算南五味子木脂素質量分數和總多糖質量分數。

2 結果與分析

2.1 標準曲線

木脂素標準曲線：Y=0.880X+0.0782（r=0.9997），在0～0.26 mg/mL范圍內具有良好的線性關系。

多糖標準曲線：Y=31.92191241X-1.377699945（R=0.998 2），在0～0.099 47 mg/mL范圍內有良好的線性關系。

2.2 不同產地南五味子總木脂素

在570 nm波長處，測定不同產地的南五味子樣品溶液的吸光度值，根據標準曲線計算木脂素量，結果見表1。由表1可以看出，以四川產南五味子木脂素量最高，為374.498 9 mg，折合藥材木脂素質量分數為1.872 5%；陜西產南五味子次之，木脂素量為282.516 7 mg，折合木脂素質量分數為1.412 6%；甘肅產南五味子總木脂素量最低，為250.684 4 mg，折合藥材木脂素量為1.253 4%。

表1 不同產地南五味子藥材中木脂素

2.3 不同產地南五味子總多糖含量

在490 nm波長處，測定不同產地的南五味子樣品溶液的吸光度值，根據標準曲線計算總多糖含量，結果見表2。由表2可以看出，整粒提取時，陜西產地南五味子的折合藥材總多糖質量分數為9.665%，四川產南五味子的折合藥材總多糖質量分數為10.080%，甘肅產南五味子的折合藥材總多糖質量分數為11.180%；研碎提取時，陜西產南五味子的折合藥材總多糖質量分數為10.360%，四川產南五味子的折合藥材總多糖質量分數為9.560 0%，甘肅產南五味子的折合藥材總多糖質量分數為12.830%。由此可看出，研碎后不同產地南五味子總多糖質量分數差異性明顯，甘肅產南五味子總多糖質量分數較研碎前增加了1.650百分點，四川產南五味子總多糖質量分數較研碎前減少了0.520百分點，陜西產南五味子總多糖質量分數較研碎前增加了0.695百分點。

表2 不同產地南五味子藥材中總多糖①每個產地的南五味子均重復3次，多糖含量為平均值。

3 小結與討論

測定結果表明，甘肅、陜西、四川產南五味子中以四川產南五味子折合藥材木脂素質量分數最高，達1.872 5%；陜西產南五味子折合藥材木脂素質量分數次之，為1.412 6%；甘肅產南五味子折合藥材木脂素質量分數最低，為1.253 4%。整粒提取和研碎后提取均以甘肅產南五味子折合藥材總多糖質量分數最高，分別為11.180%、12.83 0%，均高于四川產和陜西產。經研碎處理后，甘肅產南五味子折合藥材總多糖質量分數較研碎前增加了1.65百分點，四川產南五味子折合藥材總多糖質量分數較研碎前減少了0.52百分點，陜西產南五味子折合藥材總多糖質量分數較研碎前增加了0.695百分點。甘肅產和陜西產的南五味子研碎處理測的總多糖質量分數明顯高于研碎前整粒提取，說明傳統“五味子宜研碎入藥”的合理性。四川產南五味子研碎之后提取所得多糖質量分數低于研碎前的整粒提取，這可能與人工研碎材料不均勻以及醇沉時間短有關。

有關文獻報道，影響南五味子多糖提取得率的因素很多，如料液比、時間、pH、溫度等［8-15］。本研究測定的是南五味子水提物中的木脂素質量分數和總多糖質量分數，之所以選擇水提醇沉法提取木脂素和多糖，采用紫外-分光光度法測定木脂素質量分數和總多糖質量分數，因為其簡單，易操作。木脂素質量分數和總多糖質量分數有差異的原因，除產地環境外，南五味子的栽培管理、采收季節、加工方式都可能產生影響。近年來，由于市場經濟刺激，多數藥農以及加工企業有搶收，或者以次充好的情況存在。在推廣規范化生產技術的同時，也不能忽視生長環境對南五味子木脂素質量分數和總多糖質量分數的影響。

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