撫州地區IL-28B基因型多態性對慢性丙型肝炎患者的療效預測及復發分析

章艷娟

（撫州市第一人民醫院感染科，江西 撫州 344000）

HCV是指人體被感染后，引發肝臟細胞受損，繼而誘發肝臟變性及壞死與炎癥，最終導致肝硬化，甚至肝癌等[1]。這一方面與患者感染HVC基因病毒有關，另一方面還與宿主基因機體免疫狀態與細胞因子表達水平及基因型等原因相關。患者受到HCV感染后，約20%～30%的受感染者可以自發性的清除病毒，70%～80%會發展為CHC，當然自發性清除有賴于病原體及宿主基因相關因素，宿主基因的免疫反應占有重要地位在自發性清除中，一旦免疫反應無法對HCV徹底清除時，就會導致其發生慢性感染[2]。其慢性炎癥感染會誘發肝臟組織出現大量纖維增生，更甚者致使感染者發生肝硬化及肝癌[3]。IL-28B基因對CHC發生及預后復發有著重要的預測功效，可為臨床提供其參考價值，現做如下報道。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 從2012年1月～2016年12月間，來本院接受慢性丙型肝炎（chronic hepatitis C，CHC）治療的200例病患作為研究對象。同時本研究經本院倫理委員會審核并批準通過。入選標準：①所有患者均符合《丙型肝炎預防指南》對CHC診斷標準；②CHC患者感染均有超過6個月，或是病發日期不明；③抗HCV-RNA及HCV陽性；④患者或家屬均對本研究知情并簽署同意書。排除標準：①感染者有合并HE與HAV及HDV與HBV者；②肝硬化處于失代償期；③代謝性（或自身免疫件）肝病；④人類免疫缺陷病毒（HIV）合并感染者；⑤其長期酗酒或戒酒不足半年者；⑥長期接受免疫抑制劑患者，另外還包括器官移植者。依據丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）基因分型，將入選患者分為1b型組（100例）與2a型組（100例）。其中1b型組男59例，女41例，年齡15～71歲，平均（45.28±12.76）歲，BMI指數為22～31 kg/m2,平均BMI指數為（22.25±2.65）kg/m2。2a型組男58例，女42例，年齡15～71歲，平均（45.35±12.25）歲，BMI指數為22～31 kg/m2,平均BMI指數（23.13±2.49）kg/m2。兩組患者在性別年齡以及BMI指數等資料方面相比差異無統計學意義，有可比性。

1.2 研究方法 兩組患者距給予48周普通干擾素聯合利巴韋林（PR方案）規范治療，并進行為期24周的隨訪。選用提取儀（杭州博日）試劑盒（Promega GoTaq Green Mix from USA）對患者進行DNA提取，操作步驟嚴格按照說明書執行。同時經本院檢驗科使用的自動生化儀檢測血常規及肝功。用COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 48定量檢測RNA：PCR-熒光法。基因庫中IL-28B-rs12979860及IL-28B-rs12980275與IL-28B-rs8099917基因序列引物用軟件DNAMan6.0.3.99軟件。Life Pro PCR擴增儀（北京鼎國昌盛DG-600C）引物序列：rs8099917下游5’-ACATAAAAAGCCAGCTACCAAACT-3’，上游 5’-CTCCTTTTGTTTTCCTTTCTGTGA-3’，rs12989760下游5’-AGCGCGGAGTGCAATTCA-3’，上游5’-GTCGTGCCTGTCGTGTACTGA-3’；rs12980275下游 5’-TACCCCGGCAAATATTTAGACAC-3’，上游 5’-ACATGAGGTGCTGAGAGAAGTCAA-3’。

1.3 療效評價 記錄患者快速病毒學應答率（RVR）、早期應答率（EVR）、持續病毒學應答率（SVR）、ALT 復常率、HCV-RNA轉陰率、不良反應等情況。

1.4 統計學方法 數據的處理用SPSS 19.0軟件進行，計數資料以百分數和例數表示，組間比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 治療后兩組患者HCV-RNA轉陰率對比 治療后12周以及24周和48周1b組患者轉陰率均顯著低于2a組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 治療后兩組患者HCV-RNA轉陰率對比（n）

2.2 治療后兩組患者RVR以及EVR和SVR對比 兩組EVR差異無統計學意義，1b組RVR為47.00%，低于2a組的67.00%；1b組SVR為59.00%，低于2a組的82.00%；差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 治療后兩組患者RVR以及EVR和SVR對比（n）

2.3 兩組不良反應對比 兩組均有不同程度不良反應發生，1b組總不良反應發生率為51.00%，顯著高于2a組的28.00%，差異有統計學意義（均P＜0.05），見表3。

表3 兩組不良反應對比（n）

2.4 兩組患者IL-28B rs12979860、rs8099917和rs12980275三個位點的SNP對比 1b組rs12979860CC占比81.00%，2a組CC占比76.00%；1b組rs8099917TT占比83.00%，2a組TT占比76.00%；1b組rs12980275AA占比77%，2a組AA占比78.00%，差異均無統計學意義，見表4。

表4 兩組患者IL-28B rs12979860、rs8099917和rs12980275三個位點的SNP對比[n（%）]

3 討論

目前本市CHC患者人數較多，且多數患者承擔治療的經濟能力有限，為此選擇患者能接受的行之有效的治療方案成為我們醫療工作者研究的難點也是重點[4-5]。國產抗病毒干擾素較之其他治療藥物經濟實惠，我們希望經CHC患者IL-28B基因多態性與國產抗病毒干擾素治療后的預后關聯，來進一步明確療效及復發與療程中的狀況[6]。治療前對疑似患者行IL-28B SNP檢測，為患者提供其能接受的治療方案，并對其提供科學合理的有針對性的治療意見及預后科學指導，進一步為民著想，擴大治療的效益，確保患者的治療有效可行。

本院通過IL-28B基因型多態性對慢性丙型肝炎不同分型患者的療效預測及復發分析，結果發現，治療后12周以及24周和48周1b組患者轉陰率均顯著低于2a組。與李沛元等[7]的報道相一致，表明IL-28B基因多態性與國產抗病毒干擾素對2a組的治療轉陰率更高。IL-28B基因型多態性能較為準確預測國產抗病毒干擾素的治療效果，這是IL28B基因IFN-γ3編碼為干擾素3型，在染色體（19號）上，囊括6個外顯子，是IFN-γs家族成員，IL-28B基因的變異是預后病情的影響的重要因素，白介素及干擾素有效刺激基因多態性同HCV感染相關，影響免疫功能進而對CHC病情產生影響[8-9]。其診斷及抗HCV療效預測為臨床制定治療決策提供有力的依據[10]。此外，兩組EVR差異無統計學意義，1b組RVR為47.00%，低于2a組的67.00%；1b組SVR為59.00%，低于2a組的82.00%。符合彭瑾瑜等[11]的報道，表明對HCV患者給予IL-28B基因多態性與國產抗病毒干擾素治療，2a分型的病毒應答率更高。本研究還發現，1b組rs12979860CC占比81.00%，2a組 CC占比 76.00%；1b組 rs8099917TT占比83.00%，2a組TT占比76.00%；1b組rs12980275AA占比77%，2a組AA占比78.00%，差異均無統計學意義。這表明IL-28B-rs12979860點及PIL-28B-rs12980275點與HCV抗病毒與自發清除有密切相關性，IL-28B rs8099917點與CHC患者干擾素療效相關。這是IL28B基因作為干擾素能經過通路（Jak-SATA）激活部分抗病毒蛋白[12-13]。IL-28B基因型保護性抗病毒治療對持續應答獲得更加容易。rs12979860點位1b組與2a組CC型占比均顯著高于CT型占比；rs8099917點位1b組與2a組TT型占比均顯著高于TG型占比；rs12980275點位1b組與2a組AA型占比均顯著高于AG型占比。說明IL-28B的基因多態性對普通干擾素抗丙型肝炎病毒治療應答有重要影響，可以預測抗病毒療效，為實現個體化治療提供重要依據。本研究還發現，兩組患者均出現以下不良反應，白細胞降低以及血小板降低，部分患者出現貧血和發熱癥狀，且1b組總不良反應發生率為51.00%，顯著高于2a組的28.00%。表明2a分型患者經IL-28B基因多態性與國產抗病毒干擾素治療其不良反應更少。有報道稱IL-28B基因檢測干擾素治療CHC療效顯著，這是由于IL-28B基因多態性對肝臟功能具有具體機制的影響，再加之對HCV RNA水平具有抑制復制的作用[14-15]。

綜上所述，撫州地區IL-28B基因型多態性對CHC患者的療效預測具有非常重要的意義，其不同分型的轉陰率不同，且不同分型治療后的RVR以及EVR和SVR不同，因此可根據多態性反應中應答率對基因分型進行檢測分析。

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