2種免疫檢驗(yàn)方法檢測乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物的臨床研究

付林平

[摘要] 目的 分析并比較兩種不同免疫方法檢測乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物的臨床效果。 方法 方便選取在2016年3月—2017年5月期間在該院收治并確診的乙型肝炎感染患者100例，對100例患者分別采取電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）來檢測感染血清標(biāo)志物，并將兩種免疫檢驗(yàn)方法的臨床效果進(jìn)行分析對比。 結(jié)果 酶聯(lián)免疫吸附法診斷準(zhǔn)確率（75.0%）明顯低于電化學(xué)發(fā)光法診斷準(zhǔn)確率（98.0%），且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法分別對乙肝病毒感染血清進(jìn)行檢測，將結(jié)果進(jìn)行比較，電化學(xué)光法的臨床效果明顯強(qiáng)于酶聯(lián)免疫吸附法。

[關(guān)鍵詞] 電化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附法；乙型肝炎；病毒感染；血清學(xué)標(biāo)志物

[中圖分類號] R5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）11（b）-0021-03

[Abstract] Objective This paper tries to analyze and compare the clinical effects of two different immunological methods on the detection of blood serological markers of hepatitis b virus. Methods 100 patients diagnosed with hepatitis b infection from March 2016 to May 2017 in this hospital were convenient selected and were respectively adopt electrochemical luminescence （ECLIA） and enzyme-linked immunosorbent （ELISA） to detect serum marker of infection， and the clinical effect of these two immunity test methods were compared and analyzed. Results The diagnostic accuracy of ELISA was 75.0%， significantly lower than the diagnostic accuracy of ECLIA of 98.0%， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion The serum hepatitis b virus（HBV） infection has been tested by electrochemical luminescence method and enzyme-linked immunosorbent method respectively， the clinical effect of the electrochemical method is better than the enzyme-linked immunosorbent method.

[Key words] Electrochemical luminescence； Enzyme-linked immunosorbent method； Hepatitis b； Virus infection； Markers of serology

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒所引起，主要經(jīng)血液傳播。乙型肝炎病毒的感染甚至可能會導(dǎo)致肝硬化或者腎衰竭，嚴(yán)重危害了人類健康，不僅對患者自身的身心健康產(chǎn)生重大影響，還會加重患者的家庭負(fù)擔(dān)。目前乙型肝炎病毒的感染是以發(fā)展中國家為主，因此快速而準(zhǔn)確的檢測出乙型肝炎病毒顯得尤為重要[1-3]。而乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物是診斷乙型肝炎的重要指標(biāo)，目前臨床上主要采用電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法對乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢測，為了對比電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法對乙型肝炎病毒感染的檢測價(jià)值以及臨床效果，該文方便選取了2016年3月—2017年5月期間在該院收治并確診的乙型肝炎病毒感染患者100例為研究資料，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為方便選取該院收治并確診的乙型肝炎病毒感染患者100例，獲得患者知情同意，并且符合醫(yī)院倫理學(xué)要求，其中男性60例，女性40例，年齡分布25～45歲，平均年齡（35.8±4.3）歲?；颊咴谛詣e年齡等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），有可比性。

1.2 臨床納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

電化學(xué)發(fā)光法中，將計(jì)算機(jī)所制作出的分析曲線，轉(zhuǎn)變?yōu)檠鍖W(xué)標(biāo)志物的含量，且以乙型肝炎e抗原、乙型肝炎病毒表面抗體以及乙型肝炎病毒表面抗原大于或者等于臨界值為陽性，酶聯(lián)免疫吸附法中乙型肝炎病毒e抗原以及乙型肝炎病毒核心抗體小于臨界值為陽性。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心、腦、肝腎以及造血系統(tǒng)等嚴(yán)重的原發(fā)性疾?。痪癫』颊撸辉袐D以及哺乳期婦女；服從性較差以及中途退出的患者。

1.3 方法

所有患者均采用電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢測，且在檢測之前采取患者空腹時的靜脈血4 mL進(jìn)行離心，分離出的血清置于-20°的冰箱里進(jìn)行冷藏保存，而后采取ELISA和ECLIA法對患者血清標(biāo)本進(jìn)行感染標(biāo)志物檢測，檢測項(xiàng)目包括HBV表面抗原（HBsAg）、HBV e抗原（HBeAg）、HBV表面抗體（HBsAb）、HBV核心抗體（HBcAb）、HBV e抗體（HBeAb）等。電化學(xué)發(fā)光法采取cpbase411全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對血清標(biāo)本進(jìn)行分析，而酶聯(lián)免疫吸附法則是在試劑盒回溫后，在反應(yīng)板中加入患者的血液樣品，再加入稀釋液進(jìn)行混勻，送檢。全自動電化學(xué)免疫分析儀由雅培診斷公司提供，酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。endprint

1.4 觀察指標(biāo)

在電化學(xué)發(fā)光法中，HBV表面抗體濃度大于0.05 IU/mL呈陽性，HBeAg、HBcAb和HBeAb采用臨界相對光強(qiáng)度比值進(jìn)行測定，HBeAg、HBcAb比值≤1.0呈陽性，HBeAb比值≤1.0呈陽性。酶聯(lián)免疫吸附法中，采用臨界值OD值比值測定，HBeAg、HBs Ag、 HBsAb比值≥1.0呈陽性，HBeAb、HBcAb比值≤1.0呈陽性[4-5]。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

對結(jié)果采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法診斷感染乙肝病毒的的準(zhǔn)確度結(jié)果分析

經(jīng)電化學(xué)發(fā)光法檢測的準(zhǔn)確度明顯高于用免疫吸附法所檢測的準(zhǔn)確度，組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 不同的檢測方法對血清標(biāo)志物的陽性率進(jìn)行臨床比較

兩種不同檢測方法對HBsAg、HBeAb/HBeAg、HBcAb/HGSAb的陽性率比較，見表2。

3 討論

乙型肝炎是一種傳染性極強(qiáng)的疾病，由于現(xiàn)今人類生活的復(fù)雜性導(dǎo)致該病的發(fā)生也越來越高，如若不及時治療很容易發(fā)展為肝硬化、肝衰竭以及肝癌等疾病。目前研究表明，我國發(fā)生乙型肝炎病毒感染的人數(shù)高達(dá)3 000萬，對于患者本身和國家都產(chǎn)生了很大的壓力，而且嚴(yán)重影響了患者的身心健康[6-7]。我國肝炎患者中，乙肝病毒感染者占到了30%的比例，傳統(tǒng)對乙肝的診斷方法較為落后，效果并非十分理想，因此尋找到一種安全可靠且有效的辦法，對乙型肝炎的診斷和治療有著建設(shè)性意義。

乙型肝炎病毒又被稱為Dane顆粒，可以導(dǎo)致各種急性或者慢性肝炎的發(fā)生，而我國又是乙型肝炎的高發(fā)國家，感染人群超過半數(shù)，病毒攜帶者占到了我國總?cè)藬?shù)的是1/3，但是傳統(tǒng)的診斷方式較為一般，容易發(fā)生誤診，因此找到一種靈敏度較高，效果理想且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠又簡便的方式成為了臨床上的熱門話題，并且科研人員對此也進(jìn)行了廣泛的研究[8-9]。而現(xiàn)在對乙型肝炎病毒的檢測主要使用電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測。目前，國內(nèi)的絕大部分醫(yī)院采取的是酶聯(lián)免疫吸附法對感染乙型肝炎病毒感染血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測，并且成為了判斷病情是否有傳染性的重要依據(jù)，而且此種免疫檢測方法具有操作簡單、成本低、靈敏性較高的特點(diǎn)，因此在臨床上應(yīng)用較為廣泛，但是由于保存方式不同、試劑的制作工藝不同以及運(yùn)輸環(huán)節(jié)等問題導(dǎo)致酶聯(lián)免疫吸附法的檢測穩(wěn)定性比較差，并且由于酶聯(lián)免疫吸附法只能進(jìn)行定性而不能進(jìn)行定量分析，容易出現(xiàn)較高的誤診率。

隨著檢測技術(shù)的不斷進(jìn)步，電化學(xué)發(fā)光法逐漸運(yùn)用到檢測乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物之中，是目前臨床上較為先進(jìn)的免疫測定技術(shù)，電化學(xué)發(fā)光法將免疫測定技術(shù)與發(fā)光技術(shù)相結(jié)合，可進(jìn)行定量或者半定量的實(shí)施微量抗體或者抗原的檢測，與酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行比較，可以看出電化學(xué)發(fā)光法不僅具有可測范圍更廣、靈敏度更高、而且檢測結(jié)果準(zhǔn)確度高、操作更為簡便，反應(yīng)時間也更短，應(yīng)用前景較好，值得進(jìn)行推廣運(yùn)用。

該次研究目的為將酶聯(lián)吸附免疫法和電化學(xué)發(fā)光法對感染血清標(biāo)志物的檢測準(zhǔn)確度進(jìn)行分析，而此次研究顯示，用電化學(xué)發(fā)光發(fā)檢測乙型肝炎病毒的感染準(zhǔn)確率（98.0%）明顯高于用酶聯(lián)免疫吸附法對其進(jìn)行檢測的準(zhǔn)確率（75.0%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并且從我國醫(yī)學(xué)研究者劉菊[10]對120例乙型肝炎病毒感染者的研究中同樣可以看出使用電化學(xué)發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒的感染準(zhǔn)確率（97.87%）高于使用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測的準(zhǔn)確率（77.49%）。即可以看出感染者即對于乙型肝炎病毒感染，用電化學(xué)發(fā)光法對其進(jìn)行檢測更具有診斷價(jià)值，并且可以有的提高診斷的準(zhǔn)確性，降低誤診率。HBeAg、HBeAb、HBsAg、HBsAb、HBcAb是用于診斷乙型肝炎病毒感染的血清學(xué)標(biāo)志物，而如果HBsAg、HBcAb、HBeAg均為陽性則為乙型肝炎感染，且傳染性強(qiáng)，易感染其他人群[11]。而HBeAb、HBcAb、HBsAg均為陽性也為乙型肝炎感染，但是傳染性較低，該次研究中分別采取了這兩種免疫檢測方法對這5種血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢測，并且可以明顯看出用電化學(xué)發(fā)光法對HBeAb、HBeAg以及HBs Ag進(jìn)行檢測的檢出率明顯高于用酶聯(lián)免疫吸附法對其的檢出率，但是兩者對HBsAb以及HBcAb檢測的差異率不明顯，因此，從該次研究中可以看出電化學(xué)發(fā)光法相比酶聯(lián)免疫吸附法來說可以更加準(zhǔn)確清晰的顯示乙型肝炎病毒感染的程度以及傳染程度，對于乙型肝炎的病情檢測和臨床治療效果更好。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光法較酶聯(lián)免疫吸附法來說，具有靈敏度高，檢測快、重復(fù)性強(qiáng)、特異性高等特點(diǎn)，對于乙型肝炎患者來說應(yīng)更多的應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法對感染血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測，來減少或者避免誤診的情況發(fā)生，因此在病情的診斷檢測方面電化學(xué)發(fā)光法價(jià)值更高，值得在臨床上進(jìn)行推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2017-08-19）endprint